中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-12页 |
前言 | 第12-25页 |
1 对虾白斑综合症病毒(WSSV)及其分子生物学研究 | 第12-24页 |
·对虾白斑综合症病毒研究概况 | 第12-15页 |
·对虾白斑综合症病毒的发现 | 第12页 |
·对虾白斑综合症病症及组织病理学 | 第12页 |
·对虾白斑综合症病毒的形态特征 | 第12-13页 |
·对虾白斑综合症病毒的感染宿主及感染动物模型 | 第13-14页 |
·对虾白斑综合症病毒的分离纯化 | 第14-15页 |
·对虾白斑综合症病毒的基因组学研究 | 第15-16页 |
·对虾白斑综合症病毒的蛋白质组学研究 | 第16-24页 |
·对虾白斑综合症病毒的结构蛋白 | 第16-21页 |
·对虾白斑综合症病毒的功能酶类 | 第21-24页 |
2 本论文研究的内容和意义 | 第24-25页 |
第一部分 对虾白斑综合症病毒膜蛋白VP38基因的鉴定 | 第25-40页 |
1 前言 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-31页 |
·材料 | 第26-27页 |
·方法 | 第27-31页 |
·WSSV完整病毒和核衣壳的制备 | 第27-28页 |
·基因的克隆表达和蛋白质纯化 | 第28-29页 |
·多克隆抗体的制备 | 第29-30页 |
·Western blot分析 | 第30页 |
·Far-Western分析 | 第30-31页 |
·GST pull-down分析 | 第31页 |
3 结果 | 第31-38页 |
·vp38基因的结构 | 第31-32页 |
·GST-VP38、GST-VP38n和GST-VP38c的诱导表达和纯化 | 第32-34页 |
·Western blot分析 | 第34-35页 |
·VP38与VP24之间的相互作用 | 第35-37页 |
·GST pull-down分析VP38n,VP38c和VP24的相互作用 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
第二部分 对虾白斑综合症病毒膜蛋白VP150基因的初步鉴定 | 第40-50页 |
1 前言 | 第40页 |
2 材料与方法 | 第40-43页 |
·材料 | 第40页 |
·方法 | 第40-43页 |
·pGEX-2T-vp150n-(6His)和pGEX-2T-vp150c-(6His)重组表达质粒的构建 | 第40-41页 |
·GST-VP150n-(6His)和GST-VP150c-(6His)在E.coli BL-21中的表达 | 第41页 |
·Ni-NTA柱变性条件下纯化重组蛋白及蛋白复性 | 第41-42页 |
·多克隆抗体的制备 | 第42页 |
·Western blot分析 | 第42页 |
·从感染病毒的螯虾血液中提取WSSV | 第42页 |
·WSSV病毒蔗糖密度梯度超速离心 | 第42页 |
·WSSV膜蛋白蛋白酶活性的测定 | 第42-43页 |
3 结果 | 第43-48页 |
·vp150基因的结构 | 第43页 |
·GST-VP150n-(6His)和GST-VP150c-(6His)在E.coli BL-21中的诱导表达和纯化 | 第43-46页 |
·Western blot分析 | 第46-47页 |
·血液提取WSSV和组织提取WSSV中VP150的降解分析 | 第47-48页 |
·WSSV膜蛋白的蛋白酶活性初步测定 | 第48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-60页 |
缩略词 | 第60-61页 |
附录 | 第61-71页 |
致谢 | 第71页 |