摘要 | 第1-4页 |
Summary | 第4-11页 |
一、文献综述 | 第11-29页 |
1. 植物转基因技术的研究进展 | 第12-24页 |
·遗传转化的受体系统 | 第12-15页 |
·愈伤组织的培养 | 第13页 |
·悬浮细胞的培养 | 第13-14页 |
·原生质体培养 | 第14页 |
·花药培养 | 第14-15页 |
·茎尖培养 | 第15页 |
·植物的遗传转化方法 | 第15-20页 |
·原生质体直接吸入法 | 第15-16页 |
·基因枪转化法 | 第16-18页 |
·农杆菌转化法 | 第18-19页 |
·硅碳纤维介导法 | 第19-20页 |
·花粉管通道法 | 第20页 |
·电激法 | 第20页 |
·PEG 法 | 第20页 |
·外源基因在转基因植株中的表达 | 第20-21页 |
·转基因植物的筛选和鉴定 | 第21-24页 |
·报告基因 | 第21-22页 |
·选择标记基因 | 第22-23页 |
·转基因植物的分子生物学检测 | 第23-24页 |
2. 转基因技术在牧草及草坪草育种中的应用 | 第24-27页 |
·提高抗逆性 | 第24页 |
·提高抗病虫害的能力 | 第24-25页 |
·改良抗除草剂性能 | 第25-26页 |
·调控花粉过敏源 | 第26页 |
·改良品质 | 第26-27页 |
3. 草坪草及牧草遗传转化中所存在的问题及应用前景 | 第27-28页 |
4. 工作的目的和意义 | 第28-29页 |
二、材料与方法 | 第29-42页 |
1. 实验材料 | 第29页 |
·植物材料 | 第29页 |
·培养基 | 第29页 |
2. 实验方法 | 第29-42页 |
·高羊茅成熟胚离体再生体系的建立 | 第29-30页 |
·高羊茅种子的消毒 | 第29页 |
·愈伤组织的诱导和继代 | 第29-30页 |
·愈伤组织的再生 | 第30页 |
·数据统计 | 第30页 |
·基因枪法对高羊茅进行bar 基因遗传转化 | 第30-33页 |
·植物材料 | 第30页 |
·质粒的构建 | 第30页 |
·质粒的提取 | 第30-31页 |
·质粒的电泳检测及浓度测定 | 第31-32页 |
·金粉的准备 | 第32页 |
·DNA 的包被 | 第32页 |
·轰击受体材料的准备 | 第32页 |
·轰击过程 | 第32页 |
·抗性愈伤的筛选以及转化植株的再生 | 第32-33页 |
·农杆菌法对高羊茅进行bar 基因的遗传转化 | 第33-34页 |
·植物材料及菌株 | 第33页 |
·质粒载体的构造 | 第33页 |
·农杆菌的培养 | 第33页 |
·转化受体材料的准备 | 第33页 |
·农杆菌浸染过程 | 第33-34页 |
·转化体的筛选及再生 | 第34页 |
·β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS)基因表达检测 | 第34页 |
·β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS)基因的瞬时表达分析 | 第34页 |
·β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS)基因的稳定表达分析 | 第34页 |
·β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS)基因在转化植株中的表达分析 | 第34页 |
·转基因植株的RT-PCR 分析 | 第34-37页 |
·植物RNA 的提取 | 第35-36页 |
·反转录(Reverse transcription,RT) | 第36页 |
·PCR 扩增 | 第36-37页 |
·转化植株的Southern 杂交分析 | 第37-42页 |
·植物总DNA 的提取 | 第37-39页 |
·Southern 杂交 | 第39-42页 |
三、结果与分析 | 第42-51页 |
1. 高羊茅离体再生体系的建立 | 第42-44页 |
2.高羊茅 bar 基因的遗传转化及转基因植株的筛选 | 第44-51页 |
·GUS 基因表达情况 | 第44-46页 |
·抗性愈伤及植株的筛选 | 第46页 |
·两种转化方法的转化效率 | 第46-48页 |
·抗性植株的分子生物学检测 | 第48-51页 |
四、结论 | 第51-52页 |
五、讨论 | 第52-56页 |
1. 高羊茅离体再生体系的优化 | 第52页 |
2.农杆菌法和基因枪法转化结果的比较分析 | 第52-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
个人简介 | 第65-66页 |
导师简介 | 第66-67页 |