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高羊茅(Festuca arundinacea Schreb.)转DREB1A基因的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-11页
缩写词第11-13页
第一章 综述第13-34页
   ·高羊茅育种研究进展概况第13-18页
     ·高羊茅简介第13页
     ·高羊茅育种历史和现状第13-18页
       ·草坪草的育种方法第13-15页
       ·高羊茅国外育种概况第15-16页
       ·高羊茅国内育种概况第16-18页
   ·高羊茅植株再生体系的建立第18-23页
     ·外植体的选择第19-20页
     ·不同再生途径建立再生体系第20-22页
       ·由胚性愈伤组织再生植株第20-21页
       ·由胚性悬浮培养物再生植株第21页
       ·由原生质体再生植株第21-22页
       ·高频再生组织再生植株第22页
       ·花药-幼穗培养再生单倍体植株第22页
     ·高羊茅再生植株过程中的问题第22-23页
       ·胚性愈伤组织诱导频率低第22-23页
       ·再生植株白化现象比较严重第23页
   ·外源基因的遗传转化第23-28页
     ·遗传转化方法第23-26页
       ·农杆菌介导的基因转化第24-25页
       ·PEG法第25页
       ·电激法第25页
       ·硅碳纤维法第25页
       ·基因枪法第25-26页
     ·转化过程中的筛选研究第26-27页
     ·高羊茅转遗传转化中存在的问题及应用前景第27-28页
       ·遗传转化效率较低第27页
       ·转基因植株的遗传稳定性问题第27-28页
       ·安全性问题第28页
       ·高羊茅遗传转化育种展望第28页
   ·DREB类转录因子的结构及功能第28-32页
     ·植物转录因子简介第28-29页
     ·DREB类转录因子的结构第29-31页
     ·DREB类转录因子在植物中的转化第31-32页
   ·本研究的意义、目标及内容第32-34页
     ·研究的背景及意义第32-33页
     ·本研究的目标第33页
     ·本研究的内容第33-34页
第二章 高羊茅植株再生体系的建立第34-53页
   ·材料与方法第34-38页
     ·植物材料第34页
     ·培养基第34页
     ·愈伤组织的诱导与继代第34页
     ·愈伤组织的分化与植株再生及再生植株的移栽第34-35页
     ·实验设计第35-38页
       ·不同因素对高羊茅愈伤组织诱导的影响第35-36页
       ·不同因素对高羊茅愈伤组织的继代培养的影响第36-37页
       ·不同因素对高羊茅愈伤组织再生植株的影响第37-38页
     ·数据统计及分析方法第38页
   ·结果与分析第38-46页
     ·不同因素对高羊茅愈伤组织诱导的影响第38-42页
       ·种子灭菌方法对高羊茅愈伤组织诱导的影响第38-39页
       ·外植体的不同处理方式对愈伤组织诱导的影响第39页
       ·不同品种之间愈伤组织诱导间的差异第39-40页
       ·不同浓度2,4-D,6-BA及不同量水解酪蛋白对愈伤组织诱导的影响第40-42页
     ·不同浓度2,4-D,6-BA,KT,Cu及品种对愈伤组织生长的影响第42-43页
     ·不同因素对高羊茅愈伤组织再生植株的影响第43-46页
       ·不同状态愈伤组织的再生实验结果分析第43-44页
       ·不同浓度6-BA,KT的单因素实验对愈伤组织再生植株的影响第44-46页
   ·结论与讨论第46-53页
     ·外植体的选择、灭菌及处理方式第46-48页
       ·外植体的选择第46-47页
       ·外植体的灭菌第47-48页
       ·外植体的处理方式第48页
     ·基因型对愈伤组织诱导的影响第48页
     ·影响愈伤组织诱导、生长及分化再生的各因素及其用量的选择第48-52页
       ·基本培养基的选择第49页
       ·植物激素及其用量的选择第49-52页
     ·不同状态愈伤组织的分化再生第52-53页
第三章 DREB1A基因导入高羊茅的研究第53-66页
   ·材料与方法第53-57页
     ·材料第53-54页
       ·受体材料第53页
       ·细菌与质粒第53-54页
     ·培养基第54页
       ·细菌培养基第54页
       ·受体材料培养基第54页
     ·基因枪转化方法第54-56页
       ·金粉 DNA复合体的制备第54-55页
       ·受体材料的处理第55页
       ·受体材料的轰击第55-56页
     ·基因枪转化因素的确定第56-57页
       ·Gus基因表达检测溶液的配制第56-57页
       ·染色方法第57页
       ·Gus染色取样方法第57页
     ·转化植株的筛选再生第57页
     ·对转化植株进行田间管理第57页
   ·结果与分析第57-61页
     ·抗生素筛选压的确定第57-59页
     ·基因枪转化参数的多因素正交实验第59-60页
     ·抗性植株的获得第60-61页
   ·结论与讨论第61-66页
     ·遗传转化方法的选择第61页
     ·抗性愈伤组织的筛选压的确定第61-62页
     ·影响基因枪转化方法的各种参数的选择第62-66页
       ·受体愈伤组织的选择第62-63页
       ·金粉直径的选择第63页
       ·金粉和DNA的用量问题第63页
       ·渗透处理对转化效率的影响第63-64页
       ·轰击距离与轰击次数对转化效率的影响第64页
       ·延迟筛选对转化效率的影响第64-66页
第四章 转化植株的分子检测第66-77页
   ·材料与方法第66-71页
     ·植物材料第66页
     ·组织化学染色第66页
     ·抗性植株的分子检测第66-71页
       ·植物DNA的提取第66-68页
         ·SDS法提取植物DNA第66-68页
       ·转化植株的PCR扩增检测第68-69页
       ·转化植株的Southern杂交检测第69-71页
   ·结果与分析第71-73页
     ·Gus组织显色结果第71页
     ·抗性植株的分子检测第71-73页
       ·植物DNA提取第71-72页
       ·转化植株的PCR扩增检测第72页
       ·转化植株的Southern杂交检测第72-73页
     ·总体检测结果第73页
   ·讨论第73-77页
     ·植物基因组DNA的提取方法第73-74页
     ·PCR扩增中常出现的问题第74-76页
       ·反应体系和反应条件第74-75页
       ·污染问题第75-76页
     ·Southern杂交需要注意的问题第76-77页
第五章 转基因植株生理检测第77-85页
   ·材料与方法第77-79页
     ·植物材料第77页
     ·测试指标与测试方法第77-79页
       ·细胞膜透性的测定第77页
       ·丙二醛(MDA)含量的测定第77-78页
       ·过氧化物酶(POD)活性的测定第78页
       ·叶绿素含量的测定第78-79页
   ·结果与分析第79-82页
     ·转基因植株的抗早性表现第79页
     ·植株抗早性指标测定第79-82页
       ·细胞膜透性第79-80页
       ·丙二醛含量第80-81页
       ·POD活性第81页
       ·叶绿素含量第81-82页
   ·结论与讨论第82-85页
     ·生理检测方法的选择第82-83页
     ·抗早指标的选择第83页
     ·实验中存在的问题第83-85页
第六章 结论第85-87页
参考文献第87-96页
附图Ⅰ第96-97页
附图Ⅱ第97-98页
附图Ⅲ第98-99页
个人简介第99-100页
导师简介第100-101页
获得成果目录清单第101-102页
致谢第102页

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