枸杞体细胞胚双向电泳技术的建立与蛋白质表达谱的初步分析
| 缩略词表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-30页 |
| 一 体细胞胚研究进展 | 第11-19页 |
| 1 体细胞胚的发生途径 | 第11-12页 |
| 2 体细胞胚发生过程中的生理生化变化 | 第12-13页 |
| 3 内源激素含量对体细胞胚的影响 | 第13-16页 |
| 4 植物生长调节剂对体细胞胚的作用 | 第16-17页 |
| 5 体细胞胚相关基因和特异蛋白的表达研究 | 第17-19页 |
| 二 植物蛋白质组学研究进展 | 第19-27页 |
| 1 蛋白质组学的概念 | 第19-20页 |
| 2 蛋白质组学的主要研究方法 | 第20-27页 |
| ·双向聚丙烯酰胺凝胶电泳和图像分析 | 第20-23页 |
| ·双向电泳 | 第20-22页 |
| ·图像分析技术 | 第22-23页 |
| ·蛋白质组鉴定技术 | 第23-26页 |
| ·基于MALDI的技术 | 第23-25页 |
| ·基于ESI的技术 | 第25页 |
| ·蛋白质微测序 | 第25页 |
| ·氨基酸组成分析 | 第25-26页 |
| ·蛋白质组数据库 | 第26页 |
| ·同位素译码的亲和标签技术 | 第26-27页 |
| 三 枸杞及其体细胞胚研究进展 | 第27-30页 |
| 1 药用研究 | 第27页 |
| 2 原生质体研究 | 第27-28页 |
| 3 实验现状 | 第28页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第28-30页 |
| 第二章 枸杞体细胞胚高频诱导和再生体系的建立 | 第30-34页 |
| 一 材料与方法 | 第30-31页 |
| ·植物实验材料 | 第30页 |
| ·无菌苗的培养 | 第30页 |
| ·灭菌 | 第30页 |
| ·培养基组成 | 第30页 |
| ·组织培养 | 第30-31页 |
| ·外植体的选择 | 第30页 |
| ·培养条件 | 第30-31页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第31页 |
| ·体细胞胚诱导 | 第31页 |
| 二 结果与分析 | 第31-33页 |
| ·外植体的选择 | 第31-32页 |
| ·激素配方的优化 | 第32页 |
| ·其他条件的优化 | 第32-33页 |
| 三 讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 枸杞体细胞胚双向电泳技术的建立 | 第34-44页 |
| 一 实验试剂和仪器 | 第34页 |
| ·生化试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34页 |
| 二 蛋白质提取方法的选择 | 第34-35页 |
| ·直接提取法 | 第34-35页 |
| ·沉淀法 | 第35页 |
| ·TCA-丙酮沉淀法 | 第35页 |
| 三 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35-36页 |
| ·制胶和电泳 | 第35页 |
| ·凝胶染色 | 第35-36页 |
| ·凝胶图像获取 | 第36页 |
| ·图像分析 | 第36页 |
| 四 双向电泳 | 第36-37页 |
| ·第一向固相化pH梯度等电聚焦电泳 | 第36-37页 |
| ·平衡 | 第37页 |
| ·第二向SDS-PAGE垂直板电泳 | 第37页 |
| ·凝胶染色 | 第37页 |
| ·凝胶图像获取 | 第37页 |
| ·图像分析 | 第37页 |
| 五 结果与分析 | 第37-42页 |
| ·不同蛋白质提取方法效果比较 | 第37-40页 |
| ·蛋白质提取方法的比较 | 第37-39页 |
| ·不同材料蛋白质条带差异 | 第39-40页 |
| ·双向电泳体系优化和差异分析 | 第40-42页 |
| ·不同等电聚焦参数对等电聚焦电泳的影响 | 第40-41页 |
| ·双向电泳图谱分析 | 第41-42页 |
| 三 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 蛋白质差异条带的质谱分析 | 第44-48页 |
| 一 材料与方法 | 第44-45页 |
| 二 结果 | 第45-46页 |
| 三 讨论 | 第46-47页 |
| 四 结论 | 第47-48页 |
| 图版说明 | 第48-49页 |
| 图版 | 第49-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65页 |