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拟南芥抗致病疫霉突变体的筛选及T-DNA侧翼序列分析

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 引言第9-12页
2 材料与方法第12-31页
   ·材料第12-14页
     ·供试拟南芥第12页
     ·供试病原菌第12页
     ·供试培养基第12页
     ·试剂第12-13页
     ·杂交液的配制第13页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳胶的配制第13页
     ·质粒提取液的配制第13-14页
     ·拟南芥营养液配方第14页
     ·主要仪器和设备第14页
   ·方法第14-31页
     ·拟南芥的种植第14-15页
     ·拟南芥突变体的筛选第15页
     ·拟南芥感致病疫霉突变体的细胞组织学鉴定第15-16页
     ·拟南芥突变株的PCR鉴定第16-17页
     ·通过 TAIL-PCR扩增 T-DNA插入的基因组旁邻序列第17-20页
     ·候选基因的初步定位(DNA片段的回收、克隆和测序)第20-21页
     ·Southern blotting验证拷贝数第21-24页
     ·AT3G13620.1基因的原核表达第24-31页
3 结果与分析第31-43页
   ·拟南芥突变体感染致病疫霉的表性特征第31-32页
   ·拟南芥突变体感染致病疫霉的组织病理学特征第32-34页
   ·拟南芥突变体的PCR鉴定第34页
   ·通过 TAIL-PCR扩增 T-DNA插入的基因组旁邻序列第34-38页
     ·拟南芥突变株的TAIL-PCR结果第34-35页
     ·阳性克隆的筛选结果第35-36页
     ·插入片段的 PCR检测第36页
     ·差异片段测序结果第36-38页
   ·southern blotting验证拷贝数第38页
   ·AT3G13620.1基因的原核表达第38-43页
     ·AT3G13620.1基因引物的设计第38-39页
     ·AT3G13620.1基因的PCR扩增第39页
     ·pMD-AT3g和pET-21b(+)双酶切的结果第39-40页
     ·重组质粒的PCR检测第40页
     ·目的蛋白的表达第40-41页
     ·用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对表达产物的检测第41-42页
     ·AT3G13620.1基因对致病疫霉的作用第42页
     ·AT3G13620.l基因对致病疫霉的诱导抗性测定第42-43页
4 讨论第43-46页
   ·关于 T-DNA转化整合的机制第43页
   ·关于 T-DNA插入的拷贝数第43页
   ·关于 T-DNA插入位点的侧翼序列分析第43-44页
   ·激发标签技术在功能基因组研究上的应用第44-45页
   ·PPR基因家族第45-46页
5 结论第46-47页
参考文献第47-53页
在读期间发表的学术论文第53-54页
作者简历第54-55页
致谢第55页

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