| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-20页 |
| ·苏云金芽胞杆菌概述 | 第8-9页 |
| ·Zwittermicin A的研究进展 | 第9-16页 |
| ·Zwittermicin A的发现、结构及活性 | 第9页 |
| ·影响Zwittermicin A积累的因素及Zwittermicin A的纯化 | 第9-10页 |
| ·Zwittermicin A的抑菌机制 | 第10页 |
| ·Zwittermicin A抗性基因的克隆及抗性机理的研究 | 第10-11页 |
| ·产Zwittermicin A菌株的筛选 | 第11页 |
| ·Zwittermicin A生物合成基因簇的研究 | 第11-16页 |
| ·Zwittermicn A生物合成基因簇的定位 | 第16页 |
| ·微生物基因敲除技术概述 | 第16-19页 |
| ·基因敲除的概念及技术要点 | 第16页 |
| ·微生物基因敲除的技术要点 | 第16-18页 |
| ·基因敲除技术的应用 | 第18-19页 |
| ·立题依据及目的意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-32页 |
| ·材料与仪器 | 第20-24页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·试剂 | 第21-24页 |
| ·仪器设备 | 第24页 |
| ·研究方法 | 第24-32页 |
| ·模板的制备 | 第24页 |
| ·PCR反应 | 第24-25页 |
| ·酶切反应 | 第25页 |
| ·E.coli质粒DNA提取 | 第25-26页 |
| ·Bt质粒DNA的提取 | 第26页 |
| ·Bt总DNA的提取 | 第26页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
| ·目的DNA的回收 | 第26-27页 |
| ·DNA片段的连接 | 第27页 |
| ·E.coli热击感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·质粒热击转化E.coli | 第27页 |
| ·序列测定及分析 | 第27页 |
| ·E.coli电击感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·E.coli电击转化方法 | 第28页 |
| ·Bt感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·Bt电击转化 | 第28页 |
| ·E.coli重组蛋白的提取 | 第28-29页 |
| ·E.coli重组蛋白的纯化 | 第29页 |
| ·同源重组突变体的获得 | 第29页 |
| ·Southern blotting验证 | 第29-31页 |
| ·菌株抑菌活性的测定 | 第31-32页 |
| 3 实验结果 | 第32-61页 |
| ·tzwM基因的研究 | 第32-47页 |
| ·tzwM基因在大肠杆菌中的诱导表达及纯化分析 | 第32-37页 |
| ·tzwM基因敲除突变体的获得 | 第37-43页 |
| ·tzwM基因敲除突变体的生物特性研究 | 第43-44页 |
| ·tzwM基因敲除突变体的恢复 | 第44-47页 |
| ·tzwO基因的研究 | 第47-61页 |
| ·tzwO基因在大肠杆菌中的诱导表达及纯化分析 | 第47-50页 |
| ·tzwO基因敲除突变体的获得 | 第50-56页 |
| ·tzwO基因敲除突变体的生物学特性研究 | 第56-57页 |
| ·tzwO基因突变体的恢复 | 第57-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 6 参考文献 | 第64-70页 |
| 7 在读期间发表的学术论文 | 第70-71页 |
| 8 作者简历 | 第71-72页 |
| 9 致谢 | 第72-73页 |
| 附发表文章 | 第73-80页 |
