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牛羊腐蹄病坏死梭杆菌白细胞毒素重组亚单位疫苗的研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-13页
1 引言第13-25页
   ·病原学第13-16页
     ·坏死梭杆菌第13-14页
     ·节瘤拟杆菌第14-15页
     ·其他病原第15-16页
   ·流行病学第16-17页
   ·腐蹄病发生的原因第17页
   ·腐蹄病的临床症状和病理变化第17-18页
     ·临床症状第17-18页
     ·病理变化第18页
   ·坏死梭杆菌白细胞毒素的研究进展第18-20页
   ·腐蹄病的治疗和预防第20-24页
     ·腐蹄病的治疗第20-21页
     ·腐蹄病的预防第21-24页
   ·试验目的和意义第24-25页
2 材料和方法第25-43页
   ·实验材料第25-29页
     ·菌株和质粒第25页
     ·主要生化试剂第25页
     ·主要培养基及试剂配制第25-27页
     ·引物第27-28页
     ·实验动物第28-29页
     ·主要仪器第29页
   ·方法第29-43页
     ·坏死梭杆菌A25菌株的培养及抗血清的制备第29-30页
     ·坏死梭杆菌白细胞毒素基因的克隆和序列分析第30-33页
     ·坏死杆菌白细胞毒素基因lktA1、lktA2、lktA3、lktA4和lktA5片段的原核表达、纯化及免疫活性分析第33-39页
     ·坏死梭杆菌白细胞毒素蛋白重组亚单位疫苗的研制第39-41页
     ·坏死梭杆菌白细胞毒素重组蛋白诱导羊中性粒细胞的凋亡研究第41-43页
3 结果第43-65页
   ·坏死梭杆菌的培养第43页
   ·坏死梭杆菌白细胞毒素基因的克隆及序列分析第43-47页
     ·坏死梭杆菌A25菌株白细胞毒素基因的克隆第43-46页
     ·坏死梭杆菌H05菌株白细胞毒素基因的克隆第46-47页
     ·坏死梭杆菌A25菌株和H05菌株白细胞毒素基因的序列分析第47页
   ·A25菌株白细胞毒素基因截短片段的原核表达、纯化及免疫活性分析第47-56页
     ·lktA1、lktA2、lktA3、lktA4和lktA5片段的原核表达第47-51页
     ·白细胞毒素基因预测抗原表位区PL1、PL2、PL4和PL5片段的原核表达、纯化及免疫活性分析第51-55页
     ·Western-blot分析重组蛋白免疫活性第55-56页
   ·坏死梭杆菌白细胞毒素重组亚单位疫苗的研制第56-61页
     ·PL1、PL2、lktA3、PL4和PL5重组蛋白浓度的测定第56页
     ·免疫鼠血清特异性抗体的检测第56-57页
     ·免疫鼠攻毒后保护情况第57-61页
   ·坏死梭杆菌白细胞毒素截短蛋白诱导羊中性粒细胞的凋亡研究第61-65页
4 讨论第65-70页
   ·坏死梭杆菌白细胞毒素基因分子特性分析第65页
   ·坏死梭杆菌白细胞毒素基因的原核表达第65-66页
   ·重组白细胞毒素蛋白的免疫保护性分析第66-67页
   ·重组白细胞毒素蛋白的细胞凋亡作用分析第67-68页
   ·坏死梭杆菌白细胞毒素亚单位疫苗的应用前景及问题第68-70页
5 结论第70-71页
致谢第71-72页
参考文献第72-79页
附录第79-106页
攻读博士学位期间发表的学术论文第106页

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