| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 菌核病菌的生物学特性 | 第13-16页 |
| ·病原 | 第13-14页 |
| ·寄主 | 第14页 |
| ·症状 | 第14页 |
| ·菌核病流行规律 | 第14-15页 |
| ·核盘菌的生态学特性 | 第15-16页 |
| ·温度与病菌生长的关系 | 第15页 |
| ·湿度与病菌生长的关系 | 第15页 |
| ·pH值与病菌生长的关系 | 第15页 |
| ·营养与病菌生长的关系 | 第15-16页 |
| ·光照与病菌生长的关系 | 第16页 |
| ·其它条件与病菌生长的关系 | 第16页 |
| 2 植物抗病性研究 | 第16-19页 |
| ·植物抗病反应 | 第16-17页 |
| ·植物抗病相关基因及诱导抗性机制 | 第17-19页 |
| ·植物抗病相关基因 | 第17-18页 |
| ·诱导抗性机制 | 第18-19页 |
| 3 抗病基因功能研究技术 | 第19-22页 |
| ·表达谱技术 | 第19-20页 |
| ·转基因沉默技术 | 第20-22页 |
| ·转基因沉默 | 第20-21页 |
| ·转基因沉默机制 | 第21页 |
| ·RNA沉默载体 | 第21-22页 |
| 4 油菜抗菌核病研究 | 第22-25页 |
| 第二章 油菜中防御基因的诱导表达和抗菌核病相关基因的筛选 | 第25-33页 |
| 1 材料与方法 | 第25-29页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·化学物质 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-29页 |
| ·植株培养 | 第25页 |
| ·化学物质诱导处理 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR | 第26-28页 |
| ·UniGene文库中筛选与菌核病抗性相关的目的基因 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-32页 |
| ·化学物质诱导了叶片中防御反应基因表达 | 第29页 |
| ·MeJA激活了防御基因的表达 | 第29-30页 |
| ·BTH对防御基因的诱导表达 | 第30页 |
| ·OA对防御基因的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·不同化学物质诱导不同的信号途径 | 第31页 |
| ·目的基因的确定 | 第31-32页 |
| 3 小结与讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 抗病相关基因在甘蓝型油菜中的转化 | 第33-50页 |
| 1 材料与方法 | 第33-39页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·菌株 | 第33页 |
| ·质粒 | 第33页 |
| ·本研究所构建的质粒 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33-34页 |
| ·抗生素 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-39页 |
| ·大肠杆菌感受态制备(化学法) | 第34页 |
| ·质粒DNA转化大肠杆菌(化学法) | 第34-35页 |
| ·质粒DNA小量提取 | 第35页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第35页 |
| ·凝胶回收目的DNA | 第35-36页 |
| ·DNA的限制性酶切 | 第36页 |
| ·酶切载体与目的DNA的连接 | 第36-37页 |
| ·重组质粒转化大肠杆菌 | 第37页 |
| ·重组质粒DNA的PCR检测 | 第37页 |
| ·重组质粒DNA的大量提取(SDS碱裂解法) | 第37-38页 |
| ·甘蓝型油菜的遗传转化(花粉管通道法) | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-49页 |
| ·目的基因植物表达载体的构建 | 第39-47页 |
| ·目的基因的植物过表达载体的构建 | 第39-44页 |
| ·目的基因 RNAi植物表达载体的构建 | 第44-47页 |
| ·甘蓝型油菜的遗传转化 | 第47-49页 |
| ·植物表达载体转化甘蓝型油菜 | 第47页 |
| ·甘蓝型油菜转基因 T0代种子收获 | 第47-49页 |
| 3 小结与讨论 | 第49-50页 |
| 第四章 转基因甘蓝型油菜检测分析及其菌核病抗性研究 | 第50-59页 |
| 1 材料与方法 | 第50-52页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·植物材料 | 第50页 |
| ·除草剂 | 第50页 |
| ·菌核 | 第50页 |
| ·PDA培养基 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-52页 |
| ·T0代转基因甘蓝型油菜幼苗培养 | 第50页 |
| ·除草剂喷施 | 第50-51页 |
| ·幼苗移栽 | 第51页 |
| ·SDS法小量提取油菜基因组 DNA | 第51页 |
| ·转基因油菜的 PCR鉴定 | 第51-52页 |
| ·转基因油菜菌核病抗性鉴定 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-58页 |
| ·转基因甘蓝型油菜幼苗除草剂筛选 | 第52-54页 |
| ·转基因甘蓝型油菜的 PCR检测 | 第54-55页 |
| ·转基因甘蓝型油菜的菌核病抗性鉴定 | 第55-58页 |
| 3 小结与讨论 | 第58-59页 |
| 第五章 抗病相关基因在白菜型油菜中的转化及鉴定 | 第59-64页 |
| 1 材料与方法 | 第59-61页 |
| ·材料 | 第59页 |
| ·植物材料 | 第59页 |
| ·菌株 | 第59页 |
| ·本研究所用的质粒 | 第59页 |
| ·LB培养基 | 第59页 |
| ·抗生素 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-61页 |
| ·大肠杆菌感受态制备 | 第59页 |
| ·质粒 DNA转化大肠杆菌 | 第59页 |
| ·质粒 DNA提取 | 第59页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第59页 |
| ·从凝胶中回收目的DNA | 第59页 |
| ·DNA的限制性酶切 | 第59-60页 |
| ·酶切载体与目的DNA的连接 | 第60页 |
| ·重组质粒转化大肠杆菌 | 第60页 |
| ·重组质粒DNA的PCR检测 | 第60页 |
| ·重组质粒DNA的大量提取 | 第60页 |
| ·白菜型油菜植株培养 | 第60页 |
| ·白菜型油菜的遗传转化(花粉管通道法) | 第60页 |
| ·T0代转基因白菜型油菜幼苗培养 | 第60页 |
| ·除草剂喷施 | 第60页 |
| ·SDS法少量提取油菜基因组DNA | 第60页 |
| ·转基因油菜的PCR鉴定 | 第60-61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-63页 |
| ·白菜型油菜的遗传转化 | 第61页 |
| ·白菜型油菜转化及 T0代种子收获 | 第61页 |
| ·转基因白菜型油菜的筛选及鉴定 | 第61-63页 |
| ·转基因白菜型油菜除草剂筛选 | 第61-62页 |
| ·转基因白菜型油菜除草剂筛选 | 第62-63页 |
| 3 小结与讨论 | 第63-64页 |
| 第六章 主要结论与进一步研究的建议 | 第64-66页 |
| 1 主要结论 | 第64页 |
| 2 进一步研究的建议 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附录 | 第73-78页 |
