| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-17页 |
| ·课题的提出 | 第9页 |
| ·前人研究进展 | 第9-15页 |
| ·体细胞胚胎发生的概念及影响体细胞胚胎发生的相关因子 | 第9-12页 |
| ·体细胞胚胎发生的概念 | 第9-10页 |
| ·影响体细胞胚胎发生的相关因子 | 第10页 |
| ·植物体细胞胚胎发生相关基因的分离与克隆 | 第10-12页 |
| ·植物体细胞胚胎发生相关特异蛋白 | 第12页 |
| ·植物基因分离克隆方法研究进展 | 第12-14页 |
| ·同源序列法 | 第13页 |
| ·表达序列标签 | 第13-14页 |
| ·SERK基因的研究进展 | 第14-15页 |
| ·SERK基因及SERK基因家族 | 第14页 |
| ·SERK编码的蛋白 | 第14-15页 |
| ·SERK基因的表达 | 第15页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第15-17页 |
| 2 材料和方法 | 第17-24页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-24页 |
| ·RNA的提取 | 第17-18页 |
| ·RNA提取试剂 | 第17页 |
| ·RNA提取步骤 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第18-19页 |
| ·cDNA合成 | 第19页 |
| ·引物的合成、PCR扩增、电泳 | 第19页 |
| ·PCR扩增产物的克隆和测序 | 第19-20页 |
| ·质粒DNA的提取及酶切 | 第20-21页 |
| ·质粒DNA的提取(碱裂解法) | 第20-21页 |
| ·酶切 | 第21页 |
| ·序列分析 | 第21页 |
| ·Southern杂交 | 第21-22页 |
| ·Sense和Antisense植物表达载体构建 | 第22-23页 |
| ·柑橘愈伤组织的遗传转化 | 第23-24页 |
| ·柑橘愈伤组织的准备 | 第23页 |
| ·农杆菌侵染液的制备 | 第23页 |
| ·侵染与共培养 | 第23页 |
| ·筛选培养 | 第23-24页 |
| 3. 结果与分析 | 第24-33页 |
| ·总RNA的提取 | 第24页 |
| ·暗柳橙体细胞胚胎发生过程中CitSERK的克隆与分析 | 第24-30页 |
| ·暗柳橙CitSERK的分离与克隆 | 第24-26页 |
| ·暗柳橙CitSERK的序列分析 | 第26-28页 |
| ·暗柳橙CitSERK的系统进化分析 | 第28-29页 |
| ·暗柳橙CitSERK的拷贝数分析 | 第29-30页 |
| ·植物遗传转化载体的构建 | 第30-33页 |
| ·超量表达和反义抑制植物遗传转化载体的构建 | 第30页 |
| ·CitSERK基因超量表达和反义抑制植物遗传转化载体的构建 | 第30-31页 |
| ·植物遗传转化载体构建体系的优化 | 第31-32页 |
| ·转基因抗性愈伤组织的获得 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| ·体细胞胚胎发生的机制 | 第33页 |
| ·CitSERK与体细胞胚胎发生的关系 | 第33页 |
| ·与体细胞胚胎发生相关的其他因素 | 第33-34页 |
| ·基于本研究的后续工作 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-41页 |
| 附表1: CitSERK基因的核甘酸序列 | 第41-42页 |
| 附表2: CitSERK基因编码的氨基酸序列 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43页 |
