摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-14页 |
缩略语表 | 第14-20页 |
第1章 绪论 | 第20-45页 |
·昆虫的免疫应答 | 第20-32页 |
·昆虫的天然性免疫(innate immunity) | 第20-26页 |
·模式识别受体种类 | 第22-24页 |
·酚氧化酶原活化系统 | 第24-25页 |
·免疫效应物-抗微生物肽(AMPs) | 第25-26页 |
·家蚕天然性免疫相关分子 | 第26-32页 |
·模式识别受体 | 第26-28页 |
·家蚕抗微生物多肽 | 第28-30页 |
·溶菌酶 | 第30页 |
·酚氧化酶 | 第30-31页 |
·蛋白酶抑制剂 | 第31页 |
·蛋白酶 | 第31-32页 |
·昆虫蛋白酶抑制剂 | 第32-41页 |
·蛋白酶抑制剂的分类 | 第32-33页 |
·昆虫蛋白酶抑制剂的研究 | 第33-37页 |
·昆虫蛋白酶抑制剂的性质 | 第33-34页 |
·胰凝乳蛋白酶抑制剂 | 第34-36页 |
·昆虫的胰凝乳蛋白酶抑制剂 | 第36-37页 |
·家蚕血液胰凝乳蛋白酶抑制剂的研究 | 第37-41页 |
·家蚕血液蛋白酶抑制剂种类、分布和作用 | 第37-38页 |
·家蚕血液蛋白酶抑制剂的遗传研究 | 第38-39页 |
·特征分析和生理生化研究 | 第39-41页 |
·Kunitz型胰凝乳蛋白酶抑制剂 | 第39-40页 |
·Serpin型胰凝乳蛋白酶抑制剂 | 第40-41页 |
·课题研究的目的意义 | 第41-42页 |
·研究内容 | 第42-43页 |
·Ict-H基因启动子活性分析 | 第42页 |
·Ict-H基因启动子的多型性分析 | 第42页 |
·BmNPV及其病毒因子对Ict-H基因启动子活性的影响 | 第42-43页 |
·研究方法和技术路线 | 第43-44页 |
本章小结 | 第44-45页 |
第2章 实验材料和常用方法 | 第45-61页 |
·实验材料 | 第45-48页 |
·病毒株、昆虫细胞和家蚕品种 | 第45页 |
·质粒载体和受体菌 | 第45页 |
·酶和主要试剂 | 第45-46页 |
·常用溶液和缓冲液 | 第46-48页 |
·常用实验方法 | 第48-59页 |
·基因克隆实验 | 第48-52页 |
·限制性内切酶反应 | 第48页 |
·DNA片段的分离与回收 | 第48-49页 |
·DNA的连接 | 第49页 |
·感受态细胞的制备 | 第49页 |
·质粒DNA的转化 | 第49页 |
·重组质粒的筛选鉴定 | 第49-50页 |
·碱法少量快速抽提质粒DNA | 第50-51页 |
·碱法大量制备质粒DNA | 第51页 |
·DNA浓度测定 | 第51-52页 |
·转染实验方法 | 第52-54页 |
·昆虫细胞的传代与培养 | 第52页 |
·细胞的冻存 | 第52页 |
·细胞计数 | 第52页 |
·细胞的复苏 | 第52-53页 |
·脂质体介导的功能质粒在昆虫细胞系中的转染与瞬时表达 | 第53页 |
·功能质粒转染后的病毒反式激活与昆虫激素处理 | 第53页 |
·家蚕的饲养和功能质粒在家蚕幼虫中的转染与瞬时表达 | 第53页 |
·细胞抽提物的制备 | 第53-54页 |
·荧光素酶活性分析 | 第54页 |
·蛋白质浓度测定 | 第54页 |
·BmNPV相关实验 | 第54-58页 |
·BmNPV基因组DNA的制备 | 第54-55页 |
·BmNPV基因组文库的构建 | 第55-56页 |
·病毒滴度的测定 | 第56-58页 |
·病毒多角体的计数 | 第58页 |
·Native-PAGE及活性染色实验 | 第58-59页 |
·活性胶的制备及电泳 | 第58-59页 |
·pH4.0缓冲液的活性凝胶电泳储存液配制 | 第58-59页 |
·电泳 | 第59页 |
·活性染色 | 第59页 |
·主要仪器设备 | 第59-61页 |
第3章 家蚕血液胰凝乳蛋白酶抑制剂b1编码基因Ict-H启动子片段的克隆和活性分析 | 第61-69页 |
·材料与方法 | 第61-63页 |
·材料和试剂 | 第61-62页 |
·Ict-H基因启动子的克隆和报告质粒的构建 | 第62页 |
·BmN细胞的转染 | 第62-63页 |
·细胞抽提物制备和荧光素酶活性检测 | 第63页 |
·结果与分析 | 第63-67页 |
·家蚕Ict-H基因启动子片段的克隆 | 第63-65页 |
·家蚕Ict-H基因启动子的结构分析 | 第65-67页 |
·讨论 | 第67-68页 |
本章小结 | 第68-69页 |
第4章 家蚕Ict-H基因启动子的多型性分析 | 第69-79页 |
·生物材料和实验方法 | 第69页 |
·结果分析 | 第69-77页 |
·家蚕Ict-H启动子在品种之间存在差异 | 第69-72页 |
·"苏·菊×明·虎"Ict-H启动子多态性原因分析 | 第72-74页 |
·家蚕不同类型Ict-H启动子片段活性分析 | 第74-75页 |
·家蚕CI13编码基因Ict-A启动子与Ict-H启动子的比较 | 第75-77页 |
·讨论 | 第77-78页 |
本章小结 | 第78-79页 |
第5章 BmNPV及其病毒因子刺激CIb1编码基因Ict-H启动子的活性 | 第79-86页 |
·材料与方法 | 第79-81页 |
·材料和试剂 | 第79-80页 |
·方法 | 第80-81页 |
·BmN细胞的转染方法 | 第80页 |
·病毒感染试验方法 | 第80页 |
·作用时相调查方法 | 第80页 |
·细胞抽提物制备和荧光素酶活性检测方法 | 第80页 |
·BmNPV基因组文库的筛选 | 第80页 |
·IE-1表达质粒的构建及其对Ict-H启动子的作用 | 第80-81页 |
·BmNPV hr3对Ict-H启动子的作用方式 | 第81页 |
·结果分析 | 第81-84页 |
·BmNPV增强家蚕Ict-H启动子的活性 | 第81-82页 |
·Ict-H启动子的表达时相和BmNPV对其作用时相 | 第82页 |
·IE-1能增强家蚕Ict-H启动子的活性 | 第82-83页 |
·hr3能增强家蚕Ict-H启动子的活性 | 第83-84页 |
·讨论 | 第84-85页 |
本章小结 | 第85-86页 |
第6章 BmNPV感染改变家蚕血液CIbl的含量 | 第86-91页 |
·材料与方法 | 第87页 |
·材料 | 第87页 |
·方法 | 第87页 |
·结果分析 | 第87-90页 |
·讨论 | 第90页 |
本章小结 | 第90-91页 |
第7章 家蚕Ict-H基因缺失型启动子特性分析 | 第91-99页 |
·材料与方法 | 第91-93页 |
·材料 | 第91-92页 |
·试验方法 | 第92-93页 |
·结果分析 | 第93-96页 |
·外源刺激对550bp缺失型Ict-H启动子活性的影响 | 第93-96页 |
·缺失型Ict-H启动子体内体外转录活性的比较 | 第96页 |
·讨论 | 第96-98页 |
本章小结 | 第98-99页 |
第8章 主要结论 | 第99-101页 |
·家蚕CIb1编码基因Ict-H的启动子结构 | 第99页 |
·家蚕Ict-H基因启动子的多型性 | 第99-100页 |
·BmNPV及其IE-1和hr3能增强Ict-H启动子活性 | 第100页 |
·BmNPV感染影响家蚕体内CIb1的表达 | 第100页 |
·家蚕Ict-H基因缺失型启动子具有组成型和诱导型特征 | 第100-101页 |
参考文献 | 第101-110页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第110-111页 |
个人简历 | 第111-112页 |
致谢 | 第112页 |