| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 引言 | 第7-18页 |
| 1 MAP30 的结构 | 第7页 |
| 2 MAP30 的药理作用 | 第7-10页 |
| ·抗肿瘤 | 第7-8页 |
| ·抗病毒 | 第8-9页 |
| ·抗菌 | 第9页 |
| ·无细胞毒性 | 第9-10页 |
| 3 MAP30 的作用机理 | 第10-11页 |
| ·抑制HIV-1 整合酶活性 | 第10页 |
| ·RNA N-糖苷酶活性 | 第10页 |
| ·DNA拓扑失活活性 | 第10-11页 |
| 4 MAP30 的基因工程进展 | 第11页 |
| 5 植物生物反应器生产药用蛋白的研究进展 | 第11-18页 |
| ·植物生物反应器生产医用蛋白的研究进展 | 第12-18页 |
| ·生产疫苗 | 第12页 |
| ·生产抗体 | 第12-14页 |
| ·生产药物和人类蛋白 | 第14-15页 |
| ·存在的问题与对策 | 第15-18页 |
| 材料与方法 | 第18-37页 |
| 1 材料与试剂 | 第18-22页 |
| ·菌种和质粒 | 第18-19页 |
| ·常用酶和生化试剂 | 第19-21页 |
| ·分子生物学常用酶及试剂盒 | 第19-20页 |
| ·分子生物学常用生化试剂 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 2 方法 | 第22-37页 |
| ·基因克隆 | 第22-26页 |
| ·苦瓜叶片总DNA的提取 | 第22页 |
| ·引物合成 | 第22-23页 |
| ·PCR扩增反应 | 第23页 |
| ·PCR产物回收 | 第23-24页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第24-26页 |
| ·植物表达载体的构建及转化农杆菌 | 第26-31页 |
| ·pBMAP2 和pBMAP3 中间表达载体的构建 | 第26-27页 |
| ·切除GUS基因的线性化pBI121 载体的制备 | 第27页 |
| ·线性化载体与MAP30 基因片段的连接 | 第27页 |
| ·pBMAP1 和pBMAP2 重组载体的鉴定 | 第27页 |
| ·重组农杆菌工程菌株的构建 | 第27-31页 |
| ·番茄遗传转化 | 第31-32页 |
| ·番茄遗传转化体系建立 | 第31页 |
| ·播种 | 第31页 |
| ·Kan抗性敏感试验 | 第31页 |
| ·农杆菌介导转化 | 第31-32页 |
| ·农杆菌侵染液的制备 | 第31-32页 |
| ·根癌农杆菌介导的叶盘法转化番茄 | 第32页 |
| ·抗性愈伤组织筛选及出芽诱导 | 第32页 |
| ·转化植株的诱根培养 | 第32页 |
| ·转基因番茄植株检测 | 第32-37页 |
| ·PCR鉴定分析 | 第33页 |
| ·PCR-Southern blot | 第33-34页 |
| ·Southern blot检测转基因植株基因整合 | 第34页 |
| ·RT-PCR检测转基因植株RNA水平表达 | 第34-37页 |
| 结果与分析 | 第37-44页 |
| 1 MAP30 基因克隆 | 第37-38页 |
| 2 PBMAP1 和PBMAP2 植物表达载体的构建 | 第38-40页 |
| 3 重组农杆菌工程菌株的构建 | 第40页 |
| 4 番茄遗传转化 | 第40-44页 |
| ·外植体对抗生素（Kan）的敏感试验 | 第40-41页 |
| ·番茄子叶出愈和分化Kan敏感试验 | 第40页 |
| ·番茄植株生根Kan敏感试验 | 第40-41页 |
| ·番茄转化植株的筛选 | 第41页 |
| ·转基因番茄植株检测 | 第41-44页 |
| ·PCR检测 | 第41-42页 |
| ·PCR-Southern blot | 第42页 |
| ·Southern blot | 第42-43页 |
| ·RT-PCR检测 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 讨论 | 第45-49页 |
| 1 MAP30 | 第45页 |
| 2 提高外源基因表达的策略 | 第45-46页 |
| ·优化起始密码周边序列 | 第45-46页 |
| ·定位信号的应用 | 第46页 |
| ·启动子的选用 | 第46页 |
| 3 基因沉默 | 第46-47页 |
| 4 转基因植物的安全性 | 第47-48页 |
| 5 本研究的后续工作 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致 谢 | 第54-55页 |
| 详细摘要 | 第55-64页 |
