1 引言 | 第1-17页 |
·转抗虫基因植物研究现状 | 第11-13页 |
·蛋白酶抑制剂基因及其应用 | 第11-12页 |
·苏云金芽孢杆菌及其应用 | 第12-13页 |
·外源基因在转基因植物中的表达 | 第13页 |
·转化外源基因的瞬时表达 | 第13页 |
·转化外源基因的稳定表达 | 第13页 |
·蛋白质电泳技术及其在园艺植物蛋白质分析上的应用 | 第13-15页 |
·等电聚焦电泳 | 第13-14页 |
·毛细管电泳 | 第14-15页 |
·抗虫性株系的筛选 | 第15-16页 |
·CpTI基因的抗虫机理 | 第15页 |
·抗性植株的室内鉴定 | 第15-16页 |
·虫体内类胰凝乳蛋白酶活力的测定 | 第16页 |
·本研究课题的目标 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-24页 |
·试验材料 | 第17页 |
·供试材料 | 第17页 |
·药品与试剂,仪器 | 第17页 |
·试验方法 | 第17-24页 |
·转CpTI基因苹果组培苗的培养 | 第17-18页 |
·棉蛉虫的饲养 | 第18页 |
·蛋白质电泳样品提取方案 | 第18-19页 |
·蛋白质含量的测定方法 | 第19-20页 |
·蛋白质等电聚集电泳胶条的制备 | 第20页 |
·等电聚焦电泳程序的筛选方案 | 第20页 |
·等电聚焦电泳染色程序的筛选方案 | 第20-21页 |
·pH值的测定方法 | 第21页 |
·毛细管电泳体系 | 第21-22页 |
·转化株系抗虫性检测 | 第22页 |
·类胰凝乳蛋白酶活性的测定方法 | 第22-24页 |
3 结果与分析 | 第24-35页 |
·等电聚焦电泳技术优化与转基因株系特异蛋白识别 | 第24-27页 |
·蛋白质提取方法对蛋白质的量和电泳结果的影响 | 第24-25页 |
·AP与TEMED用量对聚合时间和胶条质量的影响 | 第25页 |
·上样蛋白量对蛋白质条数和分辨率的影响 | 第25页 |
·电极缓冲液种类对聚焦结果的影响 | 第25-26页 |
·电压与电泳时间对聚焦结果的影响 | 第26页 |
·不同考马斯亮蓝染色程序对染色灵敏度的影响 | 第26页 |
·等电聚焦电泳鉴定转CpTI基因组培苗中特异蛋白质 | 第26-27页 |
·毛细管区带电泳体系优化与特异蛋白峰的鉴定 | 第27-28页 |
·检测波长对毛细管电泳结果的影响 | 第27页 |
·毛细管电泳鉴定CpTI特异蛋白 | 第27-28页 |
·抗虫性株系的鉴定 | 第28-35页 |
·转化株系抗虫性检测结果 | 第28-31页 |
·类胰凝乳蛋白酶活力变化检验植株抗性 | 第31-35页 |
4 讨论 | 第35-41页 |
·等电聚焦电泳程序的优化 | 第35-37页 |
·关于样品处理方法问题 | 第35页 |
·丙烯酰胺的聚合 | 第35页 |
·关于电极溶液的选择 | 第35-36页 |
·关于等电聚焦的时间及电泳程序 | 第36页 |
·关于等电聚焦的染色程序 | 第36页 |
·载体两性电解质的选择 | 第36页 |
·等电聚焦的聚焦效应 | 第36-37页 |
·毛细管电泳的分离效应 | 第37页 |
·转CPTI基因苹果植株抗性的鉴定 | 第37-38页 |
·抗虫实验鉴定转CpTI基因苹果抗性 | 第37页 |
·蛋向酶活性的变化评价转基因株系抗虫能力 | 第37-38页 |
·外源基因不表达的可能机制与原因 | 第38页 |
·结果的相关性 | 第38-39页 |
·转抗虫基因植物前景展望 | 第39-41页 |
5 结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
附录:图版 | 第47-49页 |
在读期间发表的学术论文 | 第49-50页 |
作者简介 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |