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转CpTI基因苹果特异蛋白质分析和抗虫性株系的筛选

1 引言第1-17页
   ·转抗虫基因植物研究现状第11-13页
     ·蛋白酶抑制剂基因及其应用第11-12页
     ·苏云金芽孢杆菌及其应用第12-13页
   ·外源基因在转基因植物中的表达第13页
     ·转化外源基因的瞬时表达第13页
     ·转化外源基因的稳定表达第13页
   ·蛋白质电泳技术及其在园艺植物蛋白质分析上的应用第13-15页
     ·等电聚焦电泳第13-14页
     ·毛细管电泳第14-15页
   ·抗虫性株系的筛选第15-16页
     ·CpTI基因的抗虫机理第15页
     ·抗性植株的室内鉴定第15-16页
     ·虫体内类胰凝乳蛋白酶活力的测定第16页
   ·本研究课题的目标第16-17页
2 材料与方法第17-24页
   ·试验材料第17页
     ·供试材料第17页
     ·药品与试剂,仪器第17页
   ·试验方法第17-24页
     ·转CpTI基因苹果组培苗的培养第17-18页
     ·棉蛉虫的饲养第18页
     ·蛋白质电泳样品提取方案第18-19页
     ·蛋白质含量的测定方法第19-20页
     ·蛋白质等电聚集电泳胶条的制备第20页
     ·等电聚焦电泳程序的筛选方案第20页
     ·等电聚焦电泳染色程序的筛选方案第20-21页
     ·pH值的测定方法第21页
     ·毛细管电泳体系第21-22页
     ·转化株系抗虫性检测第22页
     ·类胰凝乳蛋白酶活性的测定方法第22-24页
3 结果与分析第24-35页
   ·等电聚焦电泳技术优化与转基因株系特异蛋白识别第24-27页
     ·蛋白质提取方法对蛋白质的量和电泳结果的影响第24-25页
     ·AP与TEMED用量对聚合时间和胶条质量的影响第25页
     ·上样蛋白量对蛋白质条数和分辨率的影响第25页
     ·电极缓冲液种类对聚焦结果的影响第25-26页
     ·电压与电泳时间对聚焦结果的影响第26页
     ·不同考马斯亮蓝染色程序对染色灵敏度的影响第26页
     ·等电聚焦电泳鉴定转CpTI基因组培苗中特异蛋白质第26-27页
   ·毛细管区带电泳体系优化与特异蛋白峰的鉴定第27-28页
     ·检测波长对毛细管电泳结果的影响第27页
     ·毛细管电泳鉴定CpTI特异蛋白第27-28页
   ·抗虫性株系的鉴定第28-35页
     ·转化株系抗虫性检测结果第28-31页
     ·类胰凝乳蛋白酶活力变化检验植株抗性第31-35页
4 讨论第35-41页
   ·等电聚焦电泳程序的优化第35-37页
     ·关于样品处理方法问题第35页
     ·丙烯酰胺的聚合第35页
     ·关于电极溶液的选择第35-36页
     ·关于等电聚焦的时间及电泳程序第36页
     ·关于等电聚焦的染色程序第36页
     ·载体两性电解质的选择第36页
     ·等电聚焦的聚焦效应第36-37页
   ·毛细管电泳的分离效应第37页
   ·转CPTI基因苹果植株抗性的鉴定第37-38页
     ·抗虫实验鉴定转CpTI基因苹果抗性第37页
     ·蛋向酶活性的变化评价转基因株系抗虫能力第37-38页
   ·外源基因不表达的可能机制与原因第38页
   ·结果的相关性第38-39页
   ·转抗虫基因植物前景展望第39-41页
5 结论第41-42页
参考文献第42-47页
附录:图版第47-49页
在读期间发表的学术论文第49-50页
作者简介第50-51页
致谢第51页

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