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抑制性消减杂交和cDNA微阵列技术研究星星草耐盐机理

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
1 绪论第9-22页
   ·引言第9页
   ·植物的盐害及耐盐机理第9-14页
     ·植物的盐害第9-10页
     ·盐生植物耐盐机制第10-14页
   ·盐生植物星星草研究动态第14-17页
     ·星星草是一种良好的植物抗逆机理研究材料第14-15页
     ·星星草通过调节一些生理过程抵抗盐害第15-16页
     ·星星草利用特异性结构抵抗盐害第16-17页
     ·盐生植物星星草在改良盐碱地中的应用动态第17页
   ·基因表达研究技术在植物耐盐机理研究中的应用第17-20页
     ·DNA微阵列技术特点第17-18页
     ·抑制性消减杂交技术特点第18-19页
     ·EST分析技术的应用领域第19-20页
   ·本项研究的目的和意义第20-21页
   ·研究的主要内容及技术路线第21-22页
2 材料与方法第22-37页
   ·材料处理第22页
     ·材料及材料处理方法第22页
     ·酶及化学试剂第22页
     ·主要仪器设备第22页
   ·星星草抑制性消减文库的构建方法第22-27页
     ·星星草总RNA提取步骤第22-23页
     ·磁性球珠分离mRNA第23-24页
     ·抑制消减杂交文库的构建第24-27页
   ·消减文库中EST序列的测定方法第27-31页
     ·载体的连接及转化第27-28页
     ·插入片段长度的检测第28页
     ·菌体的培养与保存第28-29页
     ·模板制备和电泳检测过程第29页
     ·DNA测序操作步骤第29-30页
     ·cDNA序列的测定与编辑第30-31页
   ·cDNA微阵列的制备方法第31-36页
     ·芯片点样第31-32页
     ·样品标记(采取反转录cDNA第一链标记)第32-35页
     ·cDNA微阵列杂交步骤第35页
     ·数据分析第35-36页
   ·ESTs序列分析及星星草表达谱的建立第36-37页
3 结果与分析第37-58页
   ·抑制性消减文库的构建第37-38页
     ·总RNA的提取和mRNA的分离结果第37页
     ·SSH文库的构建质量检测第37-38页
     ·SSH产物的电泳鉴定第38页
     ·PCR扩增检测插入片段长度第38页
   ·ESTs序列测定及分析结果第38-48页
     ·DNA测序模板的质量检测和测序引物优化第38-40页
     ·ESTs序列分析结果第40-48页
   ·cDNA微阵列的杂交及数据分析结果第48-58页
     ·星星草cDNA微阵列特征第48-52页
     ·星星草cDNA微阵列中的NaHCO_3胁迫差异表达基因第52-56页
     ·NaHCO_3胁迫后差异表达基因的表达模式分析第56-58页
4 关于星星草耐盐分子机理的讨论第58-67页
   ·NaHCO_3胁迫后星星草中增强光合作用类基因的表达分析第59页
   ·NaHCO_3胁迫后星星草可溶性有机溶质类合成基因的表达分析第59-60页
   ·NaHCO_3胁迫后星星草转运蛋白类基因的表达分析第60-61页
   ·NaHCO_3胁迫后星星草中活性氧清除基因的表达分析第61-63页
   ·NaHCO_3胁迫后星星草的信号传导和转录调控类基因的表达分析第63-64页
   ·NaHCO_3胁迫后星星草胁迫蛋白的差异表达分析第64-65页
   ·NaHCO_3胁迫后星星草的代谢调节和合成激素类基因的表达分析第65页
   ·NaHCO_3胁迫后星星草中蛋白质的合成与再生类基因的表达分析第65-67页
结论第67-69页
参考文献第69-79页
附录第79-80页
攻读学位期间发表的学术论文第80-81页
致谢第81-82页

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