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猪胸膜肺炎放线杆菌三种毒素重组蛋白对小鼠的毒性及免疫原性的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
缩略词表(ABBREVIATION)第9-10页
1 文献综述第10-18页
   ·猪传染性胸膜肺炎病原学第10-11页
     ·胸膜肺炎放线杆菌分类、理化性质及生长特性第10页
     ·胸膜肺炎放线杆菌血清型第10-11页
   ·胸膜肺炎放线杆菌主要毒力因子第11-14页
     ·荚膜、脂多糖第11页
     ·外膜蛋白、转铁结合蛋白第11-12页
     ·蛋白酶、粘附因子第12页
     ·外毒素第12-14页
   ·猪传染性胸膜肺炎的防制及疫苗研究进展第14-18页
     ·药物防治第14-15页
     ·疫苗研究进展第15-18页
2.目的与意义第18-19页
3 材料与方法第19-25页
   ·材料第19-21页
     ·质粒及菌株第19页
     ·主要试剂与工具酶第19页
     ·引物设计与合成第19-20页
     ·培养基与抗生素第20页
     ·主要生化试剂和溶液的配制第20页
     ·其它试剂第20页
     ·ELISA相关溶液第20页
     ·仪器第20页
     ·实验动物及分组第20-21页
   ·方法第21-25页
     ·三种主要毒素蛋白结构基因的克隆第21-22页
     ·重组蛋白及天然毒素的提取第22页
     ·小鼠毒性试验第22-23页
     ·ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ ELISA检测方法的建立及抗体的检测第23-24页
     ·免疫保护性的研究第24-25页
4 结果与分析第25-40页
   ·克隆表达胸膜肺炎放线杆菌三种主要毒素蛋白结构基因第25-27页
     ·apxⅡA、apxⅢA5'端、apxⅢA3'端片段的扩增结果第25页
     ·重组质粒的酶切鉴定第25-26页
     ·表达产物的SDS-PAGE分析第26-27页
   ·重组蛋白对小鼠的毒性研究结果第27-35页
     ·一般临床表现及体重变化第27-29页
     ·血液学检查第29-31页
     ·血液生化检查第31-33页
     ·病理学检查第33-35页
   ·重组蛋白对小鼠的免疫保护性研究结果第35-40页
     ·毒素ELISA条件的确定第35页
     ·App3、App7、App10半数致死量(LD_(50))的确定第35页
     ·免疫后抗体的检测及攻毒结果第35-40页
5 讨论第40-43页
   ·基因的克隆与表达第40-41页
   ·毒性试验第41页
   ·关于ELISA检测方法第41-42页
   ·关于攻毒菌株的选择第42-43页
6 结论第43-44页
参考文献第44-50页
致谢第50-51页
附录第51页

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