| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 主要缩略词 | 第11-12页 |
| 第一章 文章综述 萝卜细胞质雄性不育的分子机理和细胞学研究 | 第12-28页 |
| 1 雄性不育的来源与分布 | 第12页 |
| 2 雄性不育相关基因的遗传机制 | 第12-13页 |
| ·不育基因的遗传机制 | 第12-13页 |
| ·恢复基因的遗传机制 | 第13页 |
| 3 不育相关基因的克隆及其结构 | 第13-15页 |
| 4 雄性不育性转录水平的调控 | 第15-16页 |
| 5 恢复基因的遗传标记 | 第16-17页 |
| 6 恢复基因的克隆 | 第17-19页 |
| 7 雄性不育的细胞学机理研究进展 | 第19-21页 |
| ·花粉败育的时期 | 第19-20页 |
| ·造孢细胞和花粉母细胞时期 | 第19页 |
| ·减数分裂时期 | 第19页 |
| ·四分体至单核花粉期 | 第19-20页 |
| ·花粉败育前后的细胞学变化 | 第20-21页 |
| ·绒毡层与雄性不育的关系 | 第20页 |
| ·超微结构的变化 | 第20-21页 |
| 参考文献 | 第21-28页 |
| 第二章 萝卜胞质雄性不育基因与恢复基因的研究 | 第28-44页 |
| 1 材料 | 第28-29页 |
| 2 方法 | 第29-33页 |
| ·orf138，Rf基因的筛选 | 第29-30页 |
| ·田间育性调查 | 第29页 |
| ·萝卜基因组DNA的提取 | 第29页 |
| ·PCR引物的合成 | 第29页 |
| ·PCR反应体系 | 第29页 |
| ·扩增产物的回收纯化及测序、分析 | 第29-30页 |
| ·不育系与具有Rf杂种的mRNA差异显示 | 第30-33页 |
| ·RNA提取 | 第30页 |
| ·总RNA纯化 | 第30页 |
| ·反转录 | 第30-31页 |
| ·DDRT-PCR | 第31页 |
| ·变性胶的制备 | 第31页 |
| ·涂板 | 第31页 |
| ·制胶 | 第31页 |
| ·电泳 | 第31页 |
| ·染色 | 第31-32页 |
| ·差异条带的回收与重扩增 | 第32页 |
| ·克隆 | 第32-33页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·用T-vector载体进行连接 | 第32页 |
| ·连接产物的转化 | 第32-33页 |
| ·挑取单克隆 | 第33页 |
| ·检测 | 第33页 |
| ·测序 | 第33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-41页 |
| ·萝卜总DNA的提取、PCR反应及电泳结果 | 第33-34页 |
| ·特异扩增产物的回收纯化及测序 | 第34-38页 |
| ·具有恢复基因杂交种与不育系的田间对照 | 第38页 |
| ·RNA的提取 | 第38-39页 |
| ·mRNA差异显示和cDNA差异片断的获得 | 第39-40页 |
| ·阳性差异片段克隆 | 第40-41页 |
| ·差异片段序列与分析 | 第41页 |
| 4 讨论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-44页 |
| 第三章 萝卜基因组DNA的RAMP-PCR体系优化及应用 | 第44-54页 |
| 1 材料 | 第44-45页 |
| 2 方法 | 第45-46页 |
| ·基因组 DNA提取 | 第45页 |
| ·反应体系不同浓度的比较 | 第45页 |
| ·PCR扩增反应与电泳检测 | 第45-46页 |
| ·适宜退火温度确定 | 第46页 |
| ·数据分析 | 第46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-49页 |
| ·Mg~(2+)，dNTPs与引物不同浓度水平对RAMP分析的影响 | 第46-47页 |
| ·不同退火温度对扩增效果的影响 | 第47页 |
| ·引物的筛选 | 第47页 |
| ·7个萝卜品种鉴定的RAMP分析 | 第47-49页 |
| ·育性分析中差异条带的获得 | 第49页 |
| ·退火温度的比较与确定 | 第49页 |
| 4. 讨论 | 第49-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 第四章 萝卜雄性不育小孢子的细胞学、超微结构及差异显示的比较研究 | 第54-67页 |
| 1. 材料和方法 | 第54-55页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-55页 |
| ·光学显微镜观察 | 第54-55页 |
| ·透视电镜观察 | 第55页 |
| ·差异显示观察 | 第55页 |
| 2. 结果与分析 | 第55-59页 |
| ·萝卜雄性不育保持系小孢子发育的细胞形态学观察 | 第55页 |
| ·萝卜雄性不育系小孢子发育的细胞形态学观察 | 第55-56页 |
| ·萝卜雄性不育保持系小孢子发育的超微结构 | 第56页 |
| ·萝卜雄性不育系小孢子发育的超微结构 | 第56页 |
| ·萝卜雄性不育小孢子的差异显示 | 第56-59页 |
| ·RNA的提取 | 第56-57页 |
| ·mRNA差异显示和cDNA差异片断的获得 | 第57-58页 |
| ·阳性差异片段克隆 | 第58页 |
| ·差异片段序列分析和比较 | 第58-59页 |
| 3. 讨论 | 第59-60页 |
| ·萝卜雄性不育小孢子败育时期及特点 | 第59-60页 |
| ·败育的原因 | 第60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 全文结论 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 硕士在读期间发表的论文情况 | 第69页 |
