| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 引言 | 第9-12页 |
| 第一章 重组人睾丸精子蛋白SP22提取和纯化 | 第12-15页 |
| 1 材料与方法 | 第12页 |
| ·主要仪器 | 第12页 |
| ·主要试剂及材料 | 第12页 |
| 2 人睾丸精子蛋白SP22的原核表达、提取和纯化 | 第12-13页 |
| ·目的蛋白诱导表达 | 第12-13页 |
| ·重组人精子蛋白SP22的提取和纯化 | 第13页 |
| 3 镍离子亲和层析纯化结果 | 第13-15页 |
| 第二章 分泌SP22单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立与鉴定 | 第15-28页 |
| 1 材料与方法 | 第15-16页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·主要试剂及材料 | 第16页 |
| ·试验动物及小鼠骨髓瘤细胞(SP2／0) | 第16页 |
| 2 动物免疫 | 第16-17页 |
| ·重组人精子蛋白SP22免疫BALB／c小鼠 | 第16-17页 |
| ·间接ELISA测定免疫小鼠外周血清中抗SP22抗体的效价 | 第17页 |
| 3 抗SP22杂交瘤细胞株的建立和单克隆抗体的制备 | 第17-21页 |
| ·小鼠骨髓瘤细胞(SP2／0)的复苏、传代培养及收集 | 第17-18页 |
| ·饲养细胞制备 | 第18页 |
| ·小鼠脾细胞的制备 | 第18页 |
| ·细胞融合 | 第18-19页 |
| ·杂交瘤细胞观察及换液 | 第19-20页 |
| ·分泌抗SP22抗体杂交瘤细胞的检测 | 第20页 |
| ·阳性克隆有限稀释 | 第20页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立、冻存及复苏 | 第20-21页 |
| 4 单克隆抗体的鉴定 | 第21-24页 |
| ·杂交瘤细胞染色体的检测 | 第21-22页 |
| ·腹水型单克隆抗体(McAb)的制备及效价测定 | 第22页 |
| ·单克隆抗体亚类的鉴定 | 第22页 |
| ·单克隆抗体特异性的Western blot鉴定 | 第22-23页 |
| ·单克隆抗体辣根过氧化物酶(HRP)标记 | 第23-24页 |
| ·抗SP22 McAb亲和力测定 | 第24页 |
| 5 结果 | 第24-26页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第24-25页 |
| ·杂交瘤细胞染色体检测 | 第25页 |
| ·抗SP22 McAb的效价与Ig类别 | 第25页 |
| ·单克隆抗体特异性的Western blot鉴定 | 第25页 |
| ·抗SP22 McAb亲和力测定结果 | 第25-26页 |
| 6 讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 人精子蛋白22在人精子中的定位和定量研究 | 第28-34页 |
| 1 材料和方法 | 第28-29页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·样品处理 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-29页 |
| ·精子头部SP22免疫细胞化学定位分析 | 第28-29页 |
| ·精子头部SP22含量的流式细胞术检测 | 第29页 |
| ·试验结果处理 | 第29页 |
| 2 结果 | 第29-33页 |
| ·SP22在精子表面的定位 | 第30页 |
| ·精子头部SP22含量分析 | 第30-33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| 全文小结 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-36页 |
| 研究生期间主要学术成果 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 综述及参考文献 | 第38-51页 |
| 论文独创性声明 | 第51页 |
| 论文使用授权声明 | 第51页 |
