| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 图表目录(List of Figures and Tables) | 第16-19页 |
| 缩略词(List of Abbreviations) | 第19-22页 |
| 第一章 文献综述 | 第22-54页 |
| 1 骨髓间充质干细胞研究进展 | 第22-30页 |
| ·骨髓间充质干细胞的生物学特性 | 第22-23页 |
| ·骨髓间充质干细胞表面标志 | 第23-26页 |
| ·骨髓间充质干细胞多向分化潜能 | 第26-28页 |
| ·骨髓间充质干细胞在细胞和基因治疗方面的应用 | 第28-30页 |
| 2 血小板生成素(THPO)的研究进展 | 第30-33页 |
| ·THPO的基因和蛋白结构 | 第30-31页 |
| ·THPO的作用机理 | 第31页 |
| ·THPO水平的调节 | 第31-32页 |
| ·THPO的主要生物活性 | 第32-33页 |
| 3 Fit-3配体(FL)的研究进展 | 第33-37页 |
| ·Flt-3受体的表达 | 第34页 |
| ·FL对造血细胞的作用 | 第34-36页 |
| ·FL的临床作用 | 第36-37页 |
| 4 脐带血造血干细胞体外扩增研究进展 | 第37-43页 |
| ·脐带血造血干细胞的表面抗原 | 第37-38页 |
| ·脐带血造血干细胞的体外扩增方法 | 第38-43页 |
| 参考文献 | 第43-54页 |
| 第二章 研究目的意义和技术路线 | 第54-60页 |
| 1 研究目的意义 | 第54-56页 |
| 2 研究内容 | 第56-57页 |
| 3 技术路线 | 第57-60页 |
| 第三章 骨髓间充质干细胞的分离和培养 | 第60-71页 |
| 1 材料与方法 | 第60-64页 |
| ·骨髓标本来源 | 第60页 |
| ·主要实验试剂 | 第60-61页 |
| ·主要仪器设备 | 第61页 |
| ·实验方法 | 第61-64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-69页 |
| ·hMSCs的原代及传代培养特性 | 第64页 |
| ·hMSCs的生长动力学 | 第64-67页 |
| ·hMSCs的细胞周期分析 | 第67-69页 |
| ·hMSCs的表面抗原表达分析 | 第69页 |
| 3 讨论 | 第69-71页 |
| 第四章 THPO和FL膜外区的基因克隆及表达载体构建 | 第71-86页 |
| 1 材料和方法 | 第72-78页 |
| ·胎肝细胞来源 | 第72页 |
| ·主要实验试剂 | 第72页 |
| ·主要仪器设备 | 第72页 |
| ·实验方法 | 第72-78页 |
| 2 结果与分析 | 第78-83页 |
| ·重组逆转录病毒构建策略 | 第78页 |
| ·RT-PCR扩增FL膜外区基因片段 | 第78页 |
| ·RT-PCR扩增THPO基因片段 | 第78-80页 |
| ·重组质粒载体的克隆与鉴定 | 第80-83页 |
| 3 讨论 | 第83-86页 |
| 第五章 骨髓间充质干细胞的转染及表达分析 | 第86-101页 |
| 1 材料和方法 | 第86-95页 |
| ·实验材料 | 第86页 |
| ·主要试剂 | 第86-87页 |
| ·主要仪器设备 | 第87页 |
| ·实验方法 | 第87-95页 |
| 2 结果与分析 | 第95-99页 |
| ·转基因骨髓间充质干细胞的半定量RT-PCR分析 | 第95页 |
| ·转基因骨髓间充质干细胞的Western Blotting分析 | 第95-96页 |
| ·转EGFP基因的骨髓间充质干细胞的流式细胞术分析 | 第96-97页 |
| ·转基因骨髓间充质干细胞的分泌表达 | 第97-99页 |
| 3 讨论 | 第99-101页 |
| 第六章 转基因骨髓间充质干细胞扩增脐血CD34~+细胞研究 | 第101-113页 |
| 1 材料和方法 | 第102-106页 |
| ·脐带血细胞样本 | 第102页 |
| ·转基因骨髓间充质干细胞 | 第102页 |
| ·细胞因子和试剂 | 第102页 |
| ·主要仪器设备 | 第102页 |
| ·实验方法 | 第102-106页 |
| 2 结果与分析 | 第106-111页 |
| ·第一阶段共培养体系含血清培养中造血细胞扩增效果 | 第106-107页 |
| ·共培养体系无血清培养中造血细胞扩增效果 | 第107-108页 |
| ·第二阶段共培养体系中成鹅卵石样造血细胞扩增效果 | 第108-111页 |
| 3 讨论 | 第111-113页 |
| 第七章 扩增后造血细胞的长期培养起始细胞(LTC-ICs)研究 | 第113-126页 |
| 1 材料和方法 | 第114-117页 |
| ·骨髓细胞来源 | 第114页 |
| ·脐血细胞样本 | 第114页 |
| ·LTC-IC测定的扩增造血细胞 | 第114页 |
| ·细胞因子和试剂 | 第114页 |
| ·主要仪器设备 | 第114页 |
| ·实验方法 | 第114-117页 |
| 2 结果与分析 | 第117-123页 |
| ·阴性孔比率与起始种植CD34~+数线性相关 | 第117-122页 |
| ·不同CD34~+细胞群中LTC-ICs频率测定 | 第122-123页 |
| 3 讨论 | 第123-126页 |
| 第八章 扩增后造血细胞中的SCID小鼠体内增殖的人造血干细胞(SRC)研究 | 第126-139页 |
| 1 材料和方法 | 第126-132页 |
| ·NOD／SCID小鼠 | 第126页 |
| ·用于小鼠移植的造血细胞群 | 第126-127页 |
| ·人ALU重复序列引物设计 | 第127页 |
| ·细胞因子与试剂 | 第127页 |
| ·主要仪器设备 | 第127页 |
| ·实验方法 | 第127-132页 |
| 2 结果与分析 | 第132-136页 |
| ·NOD／SCID小鼠骨髓细胞中人ALU序列的PCR分析 | 第132-133页 |
| ·NOD／SCID小鼠骨髓细胞中人CD45阳性细胞分析 | 第133-134页 |
| ·NOD／SCID小鼠外周血细胞中人CD45阳性细胞分析 | 第134-136页 |
| ·NOD／SCID小鼠移植物中人造血细胞的多系表面标志分析 | 第136页 |
| 3 讨论 | 第136-139页 |
| 第九章 结论 | 第139-141页 |
| 参考文献(Literature Cited) | 第141-152页 |
| 致谢(Acknowledgements) | 第152-153页 |
| 附录(Appondix) | 第153-156页 |
| 附录一主要试剂配制 | 第153-156页 |
| 附录二攻博期间发表的论文 | 第156页 |
