摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
前言 | 第10-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-41页 |
1.甲壳动物神经多肽研究概述 | 第12-17页 |
·甲壳动物高血糖激素肽家族 | 第12-13页 |
·促色素细胞素 | 第13-14页 |
·心兴奋肽相关肽 | 第14-15页 |
·速激肽相关肽 | 第15页 |
·肠动肽 | 第15-16页 |
·甲壳动物心激肽 | 第16-17页 |
2.咽侧体抑制素 | 第17-24页 |
·咽侧体抑制素的分类与特征 | 第17页 |
·昆虫中的咽侧体抑制素 | 第17-20页 |
·甲壳动物中的咽侧体抑制素 | 第20-24页 |
3.天然反义RNA | 第24-31页 |
·天然反义RNA的概念 | 第24-25页 |
·顺式天然反义RNA | 第25-27页 |
·反式天然反义RNA | 第27-28页 |
·天然反义RNA在真核生物基因表达调控中的机制 | 第28-31页 |
参考文献 | 第31-41页 |
第二部分 研究内容 | 第41-92页 |
第一章 罗氏沼虾咽侧体抑制素基因及其天然反义RNA的分子克隆 | 第42-64页 |
1.引言 | 第42-43页 |
2.材料 | 第43-44页 |
·实验材料 | 第43页 |
·主要试剂 | 第43-44页 |
·主要仪器 | 第44页 |
3.方法 | 第44-52页 |
·罗氏沼虾神经组织的取材 | 第44页 |
·中枢神经系统总RNA的抽提 | 第44-45页 |
·mRNA的分离纯化 | 第45页 |
·cDNA文库的构建与滴度检测 | 第45-50页 |
·简并引物的设计与cDNA文库的PCR筛选 | 第50-51页 |
·文库筛选探针的制备 | 第51-52页 |
4.结果 | 第52-58页 |
·cDNA文库的构建与罗氏沼虾咽侧体抑制素基因片段的获得 | 第52-53页 |
·罗氏沼虾咽侧体抑制素基因及其天然反义RNA的分子克隆与特征分析 | 第53-58页 |
5.讨论 | 第58-61页 |
参考文献 | 第61-64页 |
第二章 罗氏沼虾咽侧体抑制素基因的表达特征与基因组结构分析 | 第64-79页 |
1.引言 | 第64-65页 |
2.材料 | 第65-66页 |
·实验材料 | 第65-66页 |
·主要试剂 | 第66页 |
·主要仪器 | 第66页 |
3.方法 | 第66-71页 |
·Northern blotting分析 | 第66-68页 |
·半定量RT-PCR(semi-quantitative RT-PCR) | 第68-69页 |
·Macro-AST A的基因组拷贝数分析 | 第69-71页 |
4.结果 | 第71-76页 |
·Macro-AST A的组织表达特异性研究 | 第72页 |
·Macro-AST A在发育过程中的表达特异性研究 | 第72-75页 |
·Macro-AST A的基因组拷贝数分析 | 第75-76页 |
5.讨论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-79页 |
第三章 罗氏沼虾咽侧体抑制素基因与其天然反义RNA互作的初步研究 | 第79-90页 |
1.引言 | 第79-80页 |
2.材料 | 第80页 |
·实验材料 | 第80页 |
·主要试剂 | 第80页 |
·主要仪器 | 第80页 |
3.方法 | 第80-83页 |
·Northern blotting分析 | 第81页 |
·引物特异性反转录PCR(primer-specific RT-PCR) | 第81页 |
·RNA-RNA二聚体的检测 | 第81-83页 |
4.结果 | 第83-85页 |
·asMacro-ASTA在罗氏沼虾中的组织分布 | 第83页 |
·asMacro-ASTA基因的引物特异性RT-PCR | 第83-84页 |
·RNA-RNA二聚体的检测 | 第84-85页 |
5.讨论 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-90页 |
第四章 结论与展望 | 第90-92页 |
1.结论 | 第90-91页 |
2.有待进一步开展的工作 | 第91-92页 |
第三部分 本研究的创新点 | 第92-94页 |
第四部分 附录 | 第94-101页 |
附录一 常用试剂配制一览表 | 第95-100页 |
附录二 攻读博士学位期间发表、投稿论文 | 第100-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
附图 | 第102页 |