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野油菜黄单胞菌8004菌株wxc基因簇的功能分析

第一章 前言第1-21页
   ·植物病原细菌Xcc的概述第9-10页
   ·植物病原菌的致病生化因子第10-13页
     ·多糖第10页
     ·毒素第10-11页
     ·生长激素第11页
     ·胞外酶第11-12页
     ·依赖于Hrp TTSS的效应蛋白分子第12-13页
   ·胞外多糖(EPS)的研究进展第13-15页
     ·胞外多糖的结构第13页
     ·胞外多糖的生物合成及调控第13-15页
     ·胞外多糖与致病性第15页
   ·脂多糖(Iipopolysaccharide,LPS)的研究进展第15-19页
     ·脂多糖的基本结构和化学组成第15-16页
     ·脂多糖的生物合成第16页
     ·脂多糖的生物学功能第16-18页
     ·Xcc脂多糖研究进展第18-19页
       ·目前Xcc中发现的与LPS合成相关的基因第18-19页
       ·脂多糖致病作用的研究第19页
   ·本研究的目的和意义第19-21页
第二章 材料与方法第21-36页
   ·材料第21-25页
     ·菌株和质粒第21-22页
     ·抗生素和其它药品第22页
     ·培养基第22-23页
     ·溶液与缓冲液第23-25页
     ·试材第25页
   ·方法第25-36页
     ·菌株培养条件及保存第25-26页
     ·PCR反应第26-27页
       ·引物设计第26页
       ·模板制备第26页
       ·反应体系第26页
       ·反应条件:第26-27页
       ·PCR扩增产物检测第27页
     ·琼脂糖凝胶电泳第27页
     ·DNA操作第27-30页
       ·总DNA的提取第27-28页
       ·质粒的提取第28-29页
         ·快速碱裂解法少量提取质粒DNA第28页
         ·质粒DNA的大量提取第28-29页
       ·DNA的纯化和DNA的沉淀第29-30页
       ·限制性内切酶酶(?)第30页
       ·DNA片段的试剂(?)回收第30页
       ·DNA连接第30页
     ·转化第30-31页
       ·电脉冲感受态细胞的制备第30-31页
       ·电脉冲转化第31页
     ·整合突变体构建的技术路线第31-32页
     ·三亲本接合第32-33页
     ·脂多糖(LPS)分析第33页
     ·胞外多糖的检测第33-34页
       ·胞外多糖的平板检测第33页
       ·胞外多糖的摇瓶发酵检测第33-34页
     ·胞外酶的检测第34-35页
       ·胞外蛋白酶的检测第34页
       ·胞外淀粉酶的检测第34页
       ·胞外纤维素酶的检测第34-35页
     ·植株试验第35-36页
       ·致病性试验第35页
       ·过敏反应试验第35-36页
第三章 结果与分析第36-54页
   ·wxc基因簇概况第36页
   ·基因wxcN、XC3621、rmd和wzt的序列分析第36-39页
   ·基因wxcN、XC3621、rmd和wzt的整合突变体的构建第39-44页
     ·5’端DNA同源片段的扩增第39-40页
     ·将各基因5’端DNA同源片段克隆到pK18mob上第40-42页
     ·三亲接合和整合突变体的验证第42-44页
   ·整合突变体PK3620、NK3626和NK3632的功能互补第44-47页
     ·互补基因片段的扩增第44-45页
     ·将互补基因片段C3620、C3626和C3632分别克隆到质粒pLAFR3上第45-46页
     ·三亲接合和互补菌株的验证第46-47页
   ·wxc基因簇的功能分析与鉴定第47-54页
     ·致病性试验第47-48页
     ·过敏反应试验第48-49页
     ·基本培养基上的生长繁殖情况第49-50页
     ·检测致病生化因子第50-54页
       ·LPS表型检测第50页
       ·EPS表型检测第50-52页
       ·胞外酶表型检测第52-54页
第四章 结论与讨论第54-57页
   ·对Xcc B100和8004两菌株的wxc基因簇的比较分析第54页
   ·关于wxc基因簇内各基因整合突变体的构建第54-55页
   ·关于wxc基因簇的功能第55-57页
参考文献第57-62页
致谢第62页

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