第一章 前言 | 第1-21页 |
·植物病原细菌Xcc的概述 | 第9-10页 |
·植物病原菌的致病生化因子 | 第10-13页 |
·多糖 | 第10页 |
·毒素 | 第10-11页 |
·生长激素 | 第11页 |
·胞外酶 | 第11-12页 |
·依赖于Hrp TTSS的效应蛋白分子 | 第12-13页 |
·胞外多糖(EPS)的研究进展 | 第13-15页 |
·胞外多糖的结构 | 第13页 |
·胞外多糖的生物合成及调控 | 第13-15页 |
·胞外多糖与致病性 | 第15页 |
·脂多糖(Iipopolysaccharide,LPS)的研究进展 | 第15-19页 |
·脂多糖的基本结构和化学组成 | 第15-16页 |
·脂多糖的生物合成 | 第16页 |
·脂多糖的生物学功能 | 第16-18页 |
·Xcc脂多糖研究进展 | 第18-19页 |
·目前Xcc中发现的与LPS合成相关的基因 | 第18-19页 |
·脂多糖致病作用的研究 | 第19页 |
·本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-36页 |
·材料 | 第21-25页 |
·菌株和质粒 | 第21-22页 |
·抗生素和其它药品 | 第22页 |
·培养基 | 第22-23页 |
·溶液与缓冲液 | 第23-25页 |
·试材 | 第25页 |
·方法 | 第25-36页 |
·菌株培养条件及保存 | 第25-26页 |
·PCR反应 | 第26-27页 |
·引物设计 | 第26页 |
·模板制备 | 第26页 |
·反应体系 | 第26页 |
·反应条件: | 第26-27页 |
·PCR扩增产物检测 | 第27页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
·DNA操作 | 第27-30页 |
·总DNA的提取 | 第27-28页 |
·质粒的提取 | 第28-29页 |
·快速碱裂解法少量提取质粒DNA | 第28页 |
·质粒DNA的大量提取 | 第28-29页 |
·DNA的纯化和DNA的沉淀 | 第29-30页 |
·限制性内切酶酶(?) | 第30页 |
·DNA片段的试剂(?)回收 | 第30页 |
·DNA连接 | 第30页 |
·转化 | 第30-31页 |
·电脉冲感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
·电脉冲转化 | 第31页 |
·整合突变体构建的技术路线 | 第31-32页 |
·三亲本接合 | 第32-33页 |
·脂多糖(LPS)分析 | 第33页 |
·胞外多糖的检测 | 第33-34页 |
·胞外多糖的平板检测 | 第33页 |
·胞外多糖的摇瓶发酵检测 | 第33-34页 |
·胞外酶的检测 | 第34-35页 |
·胞外蛋白酶的检测 | 第34页 |
·胞外淀粉酶的检测 | 第34页 |
·胞外纤维素酶的检测 | 第34-35页 |
·植株试验 | 第35-36页 |
·致病性试验 | 第35页 |
·过敏反应试验 | 第35-36页 |
第三章 结果与分析 | 第36-54页 |
·wxc基因簇概况 | 第36页 |
·基因wxcN、XC3621、rmd和wzt的序列分析 | 第36-39页 |
·基因wxcN、XC3621、rmd和wzt的整合突变体的构建 | 第39-44页 |
·5’端DNA同源片段的扩增 | 第39-40页 |
·将各基因5’端DNA同源片段克隆到pK18mob上 | 第40-42页 |
·三亲接合和整合突变体的验证 | 第42-44页 |
·整合突变体PK3620、NK3626和NK3632的功能互补 | 第44-47页 |
·互补基因片段的扩增 | 第44-45页 |
·将互补基因片段C3620、C3626和C3632分别克隆到质粒pLAFR3上 | 第45-46页 |
·三亲接合和互补菌株的验证 | 第46-47页 |
·wxc基因簇的功能分析与鉴定 | 第47-54页 |
·致病性试验 | 第47-48页 |
·过敏反应试验 | 第48-49页 |
·基本培养基上的生长繁殖情况 | 第49-50页 |
·检测致病生化因子 | 第50-54页 |
·LPS表型检测 | 第50页 |
·EPS表型检测 | 第50-52页 |
·胞外酶表型检测 | 第52-54页 |
第四章 结论与讨论 | 第54-57页 |
·对Xcc B100和8004两菌株的wxc基因簇的比较分析 | 第54页 |
·关于wxc基因簇内各基因整合突变体的构建 | 第54-55页 |
·关于wxc基因簇的功能 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
致谢 | 第62页 |