| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-33页 |
| 1．1 油菜的杂种优势和利用 | 第13页 |
| 1．2 油菜杂种优势利用的途径 | 第13-16页 |
| 1．2．1 细胞质雄性不育 | 第14页 |
| 1．2．2 细胞核雄性不育 | 第14页 |
| 1．2．3 细胞核+细胞质雄性不育 | 第14页 |
| 1．2．4 生态型雄性不育 | 第14-15页 |
| 1．2．5 自交不亲和 | 第15页 |
| 1．2．6 化学杀雄 | 第15页 |
| 1．2．7 化学复雄 | 第15-16页 |
| 1．2．8 其它利用途径 | 第16页 |
| 1．3 油菜细胞核雄性不育的研究 | 第16-23页 |
| 1．3．1 油菜细胞核雄性不育的育性表现 | 第16-17页 |
| 1．3．2 油菜细胞核雄性不育的遗传分类 | 第17-20页 |
| 1．3．2．1 两对显性基因互作控制的细胞核雄性不育 | 第17-18页 |
| 1．3．2．2 两对隐性基因控制的细胞核雄性不育 | 第18页 |
| 1．3．2．3 隐性上位基因互作控制的细胞核雄性不育 | 第18-19页 |
| 1．3．2．4 转基因的细胞核雄性不育 | 第19-20页 |
| 1．3．3 油菜细胞核雄性不育的细胞学研究 | 第20页 |
| 1．3．4 油菜细胞核雄性不育的分子机理研究 | 第20-23页 |
| 1．4 分子标记在油菜遗传改良中的应用 | 第23-28页 |
| 1．4．1 常见的分子标记 | 第23-24页 |
| 1．4．2 油菜分子标记遗传图谱的构建和重要基因的定位 | 第24-27页 |
| 1．4．3 分子标记辅助选择在油菜遗传育种中的应用 | 第27-28页 |
| 1．5 图位克隆技术在芸苔属植物基因分离中的应用 | 第28-31页 |
| 1．6 芸蔓属作物和拟南芥基因组比较作图 | 第31-33页 |
| 2 本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 3 甘蓝型油菜双隐性核不育的基因定位 | 第34-54页 |
| 3．1 前言 | 第34页 |
| 3．2 材料与方法 | 第34-42页 |
| 3．2．1 实验材料 | 第34页 |
| 3．2．2 117B和 S45B的等位性鉴定 | 第34-35页 |
| 3．2．3 群体构建 | 第35页 |
| 3．2．4 DNA的提取和样品池的构建 | 第35-36页 |
| 3．2．5 AFLP分析 | 第36-39页 |
| 3．2．5．1 总 DNA的酶切与连接 | 第36-37页 |
| 3．2．5．2 预扩增 | 第37页 |
| 3．2．5．3 选择性扩增 | 第37-38页 |
| 3．2．5．4 扩增产物的PAGE胶检测 | 第38-39页 |
| 3．2．6 AFLP标记的 SCAR转化 | 第39-42页 |
| 3．2．6．1 差异片段的回收及再扩增 | 第39页 |
| 3．2．6．2 连接反应 | 第39-40页 |
| 3．2．6．3 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第40页 |
| 3．2．6．4 重组子筛选、鉴定 | 第40-41页 |
| 3．2．6．5 克隆片段的测序及其序列相似性分析 | 第41页 |
| 3．2．6．6 SCAR引物设计 | 第41页 |
| 3．2．6．7 PCR扩增和群体分析 | 第41-42页 |
| 3．2．7 连锁遗传分析 | 第42页 |
| 3．3 结果与分析 | 第42-49页 |
| 3．3．1 117B和 S45B杂交后代育性调查结果与分析 | 第42-44页 |
| 3．3．2 AFLP引物筛选 | 第44页 |
| 3．3．3 与可育基因连锁的AFLP标记 | 第44-46页 |
| 3．3．4 差异片段的回收与克隆 | 第46-47页 |
| 3．3．5 差异片段的序列测定及 SCAR标记检测 | 第47-48页 |
| 3．3．6 标记位点序列的相似性分析 | 第48-49页 |
| 3．4 讨论 | 第49-54页 |
| 3．4．1 117B和 S45 B中可育基因的等位性鉴定 | 第49页 |
| 3．4．2 AFLP标记及其向 SCAR标记的转化 | 第49-51页 |
| 3．4．3 分子标记辅助选择在 RGMS中的应用 | 第51-52页 |
| 3．4．4 双隐性核不育基因的精细定位及比较作图 | 第52-54页 |
| 4 甘蓝型油菜隐性上位互作核不育的基因定位 | 第54-88页 |
| 4．1 前言 | 第54-55页 |
| 4．2 材料与方法 | 第55-61页 |
| 4．2．1 实验材料 | 第55页 |
| 4．2．2 实验群体的构建 | 第55页 |
| 4．2．3 DNA的提取及育性调查 | 第55-56页 |
| 4．2．4 AFLP分析 | 第56页 |
| 4．2．5 遗传连锁分析 | 第56-57页 |
| 4．2．6 AFLP标记向 SCAR标记的转化 | 第57页 |
| 4．2．6．1 差异片段的回收、克隆和测序 | 第57页 |
| 4．2．6．2 SCAR引物设计、PCR扩增和群体分析 | 第57页 |
| 4．2．7 PCR walking | 第57-60页 |
| 4．2．7．1 酶切-连接文库的准备 | 第57-59页 |
| 4．2．7．2 PCR walking引物的设计 | 第59页 |
| 4．2．7．3 初级 PCR | 第59页 |
| 4．2．7．4 次级 PCR walking | 第59-60页 |
| 4．2．7．5 PCR walking产物的回收、克隆、测序 | 第60页 |
| 4．2．8 SCAR引物的设计及PCR扩增 | 第60页 |
| 4．2．9 SCAR引物的大群体分析及连锁遗传分析 | 第60-61页 |
| 4．2．10 各标记 PCR walking后序列与拟南芥序列的同源性比较 | 第61页 |
| 4．3 结果与分析 | 第61-77页 |
| 4．3．1 育性调查结果 | 第61页 |
| 4．3．2 AFLP引物的筛选 | 第61-62页 |
| 4．3．3 与可育基因连锁的AFLP标记 | 第62-64页 |
| 4．3．4 差异片断的回收与克隆 | 第64页 |
| 4．3．5 差异片断的序列分析及 SCAR标记的转化 | 第64-67页 |
| 4．3．6 PCR walking结果与分析 | 第67-73页 |
| 4．3．7 SCAR标记的转化及群体分析 | 第73-75页 |
| 4．3．8 育性与分子标记间的比较及连锁遗传分析 | 第75-76页 |
| 4．3．9 各标记 PCR walking后序列与拟南芥序列的同源性比较 | 第76-77页 |
| 4．4 讨论 | 第77-88页 |
| 4．4．1 AFLP标记转化为 SCAR标记的策略 | 第77-79页 |
| 4．4．2 利用获得的与可育基因连锁的分子标记辅助选育临保系的策略 | 第79-82页 |
| 4．4．3 用 PCR-walking分离甘蓝型油菜目标序列侧翼序列 | 第82-84页 |
| 4．4．4 隐性核不育基因的图位克隆策略 | 第84-88页 |
| 4．4．4．1 利用染色体登陆的方法克隆雄性不育基因 | 第85-86页 |
| 4．4．4．2 利用拟南芥生物信息进行甘蓝型油菜不育基因克隆 | 第86-88页 |
| 5 参考文献 | 第88-102页 |
| 6 附录 | 第102-109页 |
| 作者简历 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
