| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-14页 |
| 符号及缩略语 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-42页 |
| 1 棉铃虫抗性研究概况 | 第15-16页 |
| 1．1 棉铃虫的分布及为害 | 第15页 |
| 1．2 棉铃虫的防治与抗药性 | 第15-16页 |
| 2 苏云金芽孢杆菌 | 第16-24页 |
| 2．1 苏云金芽孢杆菌的发现 | 第16-17页 |
| 2．2 毒素分类 | 第17-19页 |
| 2．3 毒素的结构研究 | 第19-21页 |
| 2．4 毒素的作用及穿孔机理 | 第21-22页 |
| 2．5 苏云金芽孢杆菌的应用 | 第22-24页 |
| 3 Bt毒素在昆虫中肠内的结合受体 | 第24-33页 |
| 3．1 APN类受体 | 第24-29页 |
| 3．2 Cadherin类受体 | 第29-32页 |
| 3．3 昆虫中的其它结合受体 | 第32-33页 |
| 4 昆虫对Bt毒素的抗性 | 第33-41页 |
| 4．1 昆虫对Bt毒素的抗性概况 | 第33-36页 |
| 4．2 昆虫对Bt毒素的抗性机理 | 第36-39页 |
| 4．3 昆虫对Bt抗性机理研究中需要探讨的一些问题 | 第39-41页 |
| 5 棉铃虫对Cry1Ac毒素抗性机理研究的目的和意义 | 第41-42页 |
| 第二章 棉铃虫对Cry1Ac抗性品系的筛选 | 第42-50页 |
| 1 材料与方法 | 第43-45页 |
| 1．1 试验材料 | 第43页 |
| 1．1．1 供试昆虫 | 第43页 |
| 1．1．2 供试药剂 | 第43页 |
| 1．1．3 试验器具 | 第43页 |
| 1．2 生物测定方法(毒素涂表法) | 第43页 |
| 1．3 抗性筛选 | 第43-44页 |
| 1．4 抗性监测 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-48页 |
| 2．1 抗性筛选 | 第45-47页 |
| 2．2 田间棉铃虫抗性监测 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 棉铃虫中肠蛋白酶活性测定及酶谱分析 | 第50-69页 |
| 1 材料与方法 | 第51-55页 |
| 1．1 试验材料 | 第51-52页 |
| 1．1．1 供试昆虫 | 第51页 |
| 1．1．2 主要试剂 | 第51页 |
| 1．1．3 主要仪器 | 第51-52页 |
| 1．2 试验方法 | 第52-55页 |
| 1．2．1 棉铃虫中肠蛋白酶的制备 | 第52页 |
| 1．2．2 中肠总蛋白酶(Azocasein)活性测定 | 第52页 |
| 1．2．3 中肠类胰蛋白酶(BApNA)活性测定 | 第52页 |
| 1．2．4 中肠类胰凝乳蛋白酶活性测定 | 第52页 |
| 1．2．5 中肠氨肽酶(L-pNA)活性测定 | 第52页 |
| 1．2．6 中肠酯酶和谷胱甘肽—S—转移酶活性测定 | 第52-53页 |
| 1．2．7 PMSF、TPCK及TLCK抑制作用测定 | 第53页 |
| 1．2．8 中肠蛋白酶native-PAGE酶谱分析 | 第53页 |
| 1．2．9 中肠蛋白酶SDS-PAGE酶谱分析 | 第53-54页 |
| 1．2．10 中肠蛋白酶降解CrylAc毒素分析 | 第54页 |
| 1．2．11 PMSF、TPCK及TLCK抑制中肠蛋白酶降解Cry1Ac毒素分析 | 第54页 |
| 1．2．12 蛋白质含量测定 | 第54-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-66页 |
| 2．1 中肠蛋白酶及解毒酶活性 | 第55-56页 |
| 2．2 PMSF、TPCK及TLCK抑制作用测定 | 第56-58页 |
| 2．3 中肠蛋白酶native-PAGE酶谱分析 | 第58-60页 |
| 2．4 中肠蛋白酶SDS-PAGE酶谱分析 | 第60-62页 |
| 2．5 中肠蛋白酶降解Cry1Ac毒素分析 | 第62-64页 |
| 2．6 PMSF、TPCK及TLCK抑制中肠蛋白酶降解Cry1Ac毒素分析 | 第64-66页 |
| 3 讨论 | 第66-69页 |
| 第四章 棉铃虫中肠Cadherin类受体基因克隆及遗传分析 | 第69-96页 |
| 1 材料与方法 | 第70-78页 |
| 1．1 试验材料 | 第70页 |
| 1．1．1 供试昆虫 | 第70页 |
| 1．1．2 主要试剂 | 第70页 |
| 1．1．3 主要仪器 | 第70页 |
| 1．2 试验方法 | 第70-78页 |
| 1．2．1 中肠总RNA的制备 | 第70-71页 |
| 1．2．2 模板cDNA合成 | 第71页 |
| 1．2．3 DNA制备 | 第71-72页 |
| 1．2．3．1 试剂准备 | 第72页 |
| 1．2．3．2 基因组DNA提取 | 第72页 |
| 1．2．4 PCR引物设计 | 第72-73页 |
| 1．2．5 PCR反应 | 第73页 |
| 1．2．6 PCR产物的回收纯化、克隆及测序测定 | 第73-75页 |
| 1．2．6．1 PCR产物的回收纯化 | 第73页 |
| 1．2．6．2 连接反应 | 第73-74页 |
| 1．2．6．3 转化大肠杆菌 | 第74页 |
| 1．2．6．4 小量质粒DNA的提取 | 第74页 |
| 1．2．6．5 质粒中转化产物检测 | 第74页 |
| 1．2．6．6 序列测定 | 第74-75页 |
| 1．2．7 抗性遗传连锁分析 | 第75-76页 |
| 1．2．8 棉铃虫对Cry1Ac毒素抗性基因组水平的分子检测 | 第76-78页 |
| 2 结果与分析 | 第78-94页 |
| 2．1 敏感及抗性品系Cadherin类受体的克隆 | 第78-84页 |
| 2．2 敏感及抗性品系Cadherin类受体比较分析 | 第84-87页 |
| 2．3 抗性遗传连锁分析 | 第87-89页 |
| 2．4 棉铃虫对Cry1Ac毒素抗性基因组水平的分子检测 | 第89-94页 |
| 2．4．1 引物筛选 | 第89-90页 |
| 2．4．2 棉铃虫Cadherin受体基因在基因组上的片段克隆 | 第90-92页 |
| 2．4．3 棉铃虫基因组中Cadherin类受体基因分布 | 第92页 |
| 2．4．4 基因组水平F2代抗性遗传连锁分析 | 第92-94页 |
| 3 讨论 | 第94-96页 |
| 第五章 棉铃虫中肠受体与Cry1Ac毒素结合分析 | 第96-111页 |
| 1 材料与方法 | 第97-102页 |
| 1．1 试验材料 | 第97-98页 |
| 1．1．1 供试昆虫 | 第97页 |
| 1．1．2 主要试剂 | 第97-98页 |
| 1．1．3 主要仪器 | 第98页 |
| 1．2 试验方法 | 第98-102页 |
| 1．2．1 棉铃虫中肠BBMV的制备 | 第98页 |
| 1．2．2 Cry1Ac毒素的~(125)Ⅰ标记 | 第98-99页 |
| 1．2．3 Cry1Ac毒素的biotin标记 | 第99页 |
| 1．2．4 Cry1Ac毒素与受体的Western Blot | 第99-100页 |
| 1．2．5 Cry1Ac毒素与受体结合动力学分析 | 第100-101页 |
| 1．2．5．1 结合试验方法 | 第100页 |
| 1．2．5．2 饱和结合试验 | 第100-101页 |
| 1．2．5．3 同源竞争结合试验 | 第101页 |
| 1．2．5．4 数据分析 | 第101页 |
| 1．2．6 蛋白质含量测定 | 第101-102页 |
| 2 结果与分析 | 第102-108页 |
| 2．1 棉铃虫中肠BBMV与Cry1Ac毒素的饱和结合 | 第102-104页 |
| 2．2 棉铃虫中肠BBMV与Cry1Ac毒素的同源竞争结合 | 第104-106页 |
| 2．3 Cry1Ac毒素与抗性、敏感棉铃虫中肠BBMV杂交比较分析 | 第106-108页 |
| 3 讨论 | 第108-111页 |
| 全文总结 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-126页 |
| 附表1 | 第126-127页 |
| 附表2 | 第127-129页 |
| 附表3 | 第129-130页 |
| 附录：发表学术论文 | 第130-131页 |
| 致谢 | 第131页 |
