| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-25页 |
| 1. 抗菌肽及其在植物抗病基因工程中的应用 | 第11-13页 |
| ·抗菌肽的发现及意义 | 第11页 |
| ·抗菌肽的结构功能及抗菌机理 | 第11-12页 |
| ·抗菌肽基因结构及分子生物学研究 | 第11-12页 |
| ·抗菌肽的作用机理 | 第12页 |
| ·抗菌肽在植物基因工程中的应用 | 第12-13页 |
| ·抗菌肽在植物基因工程中的应用现状 | 第12-13页 |
| ·抗菌肽在植物基因工程中的应用前景及存在的问题 | 第13页 |
| 2. 根癌农杆菌介导的遗传转化研究进展 | 第13-19页 |
| ·农杆菌介导转化的机理 | 第14页 |
| ·农杆菌介导转化的特点 | 第14-15页 |
| ·农杆菌介导转化的方法 | 第15页 |
| ·影响农杆菌介导转化的主要因素 | 第15-17页 |
| ·不同属性农杆菌对转化的影响 | 第15页 |
| ·植物基因型及外植体对转化的影响 | 第15-16页 |
| ·培养方法对转化的影响 | 第16-17页 |
| ·影响外源基因在转基因植物中表达的主要因素 | 第17-18页 |
| ·表达载体的表达效率 | 第17页 |
| ·拷贝数 | 第17页 |
| ·DNA甲基化修饰 | 第17页 |
| ·转基因对非转基因性状的影响 | 第17-18页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化在果树基因工程中的应用 | 第18-19页 |
| 3. 果树转化受体系统及遗传转化的研究进展 | 第19-24页 |
| ·果树转化受体系统 | 第19-20页 |
| ·依赖于组织培养再生的受体系统 | 第19-20页 |
| ·完整植株的受体系统 | 第20页 |
| ·樱桃离体再生及遗传转化研究进展 | 第20-21页 |
| ·提高根癌农杆菌介导果树转化效率的策略研究进展 | 第21-24页 |
| ·诱导农杆菌侵染后植物材料的感受态 | 第21-22页 |
| ·协调植物与农杆菌间的相互作用关系 | 第22页 |
| ·对农杆菌的改良及活化 | 第22-23页 |
| ·对遗传转化受体系统的优化 | 第23页 |
| ·遗传转化条件的优化 | 第23-24页 |
| 4. 本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
| 第二部分 樱桃砧木Colt基因转化受体系统的建立 | 第25-34页 |
| 1. 材料与方法 | 第25-28页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-28页 |
| ·培养基的配制 | 第25页 |
| ·无菌外植体的获得 | 第25-26页 |
| ·各种外植体再生培养基设计 | 第26-27页 |
| ·培养条件 | 第27页 |
| ·结果统计 | 第27-28页 |
| 2. 结果与分析 | 第28-32页 |
| ·茎尖再生 | 第28-30页 |
| ·激素对茎尖分化率及增殖系数的影响 | 第28页 |
| ·茎尖大小对分化率的影响 | 第28-29页 |
| ·苗龄对樱桃砧木茎尖分化的影响 | 第29-30页 |
| ·叶片再生 | 第30-32页 |
| ·影响叶片愈伤组织诱导的因素 | 第30-31页 |
| ·影响叶片愈伤组织芽分化的因素 | 第31-32页 |
| ·茎段再生 | 第32页 |
| ·根段再生 | 第32页 |
| 3. 讨论 | 第32-33页 |
| 4. 小结 | 第33-34页 |
| 第三部分 工程菌构建 | 第34-43页 |
| 1. 材料与方法 | 第34-38页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·工程菌及农杆菌菌株 | 第34页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-38页 |
| ·农杆菌的培养与保存 | 第34-35页 |
| ·烟草转化实验 | 第35页 |
| ·工程菌pSMC/LBA4404质粒提取 | 第35-37页 |
| ·农杆菌EHA105、A208SE感受态细胞的制备 | 第37页 |
| ·质粒pSMC转化农杆菌EHA105、A208SE感受态细胞 | 第37页 |
| ·转化子的PCR鉴定 | 第37-38页 |
| ·工程菌pSMC/EHA105、pSMC/A208SE侵染能力测试 | 第38页 |
| 2. 结果与分析 | 第38-41页 |
| ·pSMC/LBA4404侵染能力测试结果 | 第38页 |
| ·工程菌建成 | 第38-40页 |
| ·制备感受态的细胞生长状态对转化率的影响 | 第38页 |
| ·感受态细胞保存方式对转化率的影响 | 第38-39页 |
| ·转化子获得 | 第39-40页 |
| ·pSMC/EHA105及pSMC/A208SE侵染能力的测定 | 第40-41页 |
| 3. 讨论 | 第41-42页 |
| 4. 小结 | 第42-43页 |
| 第四部分 抗菌肽基因转化樱桃砧木Colt | 第43-51页 |
| 1. 材料与方法 | 第43-44页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·工程菌 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·樱桃茎尖对Km及Cef的敏感性试验 | 第43页 |
| ·抗菌肽基因转化 | 第43-44页 |
| ·转化条件优化 | 第44页 |
| ·转化率评价指标 | 第44页 |
| ·培养条件 | 第44页 |
| 2. 结果与分析 | 第44-49页 |
| ·选择压的确定 | 第44-45页 |
| ·Km抗性芽的选择及转化植株的获得 | 第45-46页 |
| ·转化条件优化 | 第46-49页 |
| ·外植体苗龄及大小对转化的影响 | 第46页 |
| ·农杆菌状态对转化的影响 | 第46-47页 |
| ·菌液浓度对转化的影响 | 第47页 |
| ·预培养对转化的影响 | 第47-48页 |
| ·侵染时间对转化的影响 | 第48页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第48-49页 |
| ·延迟选择对转化的影响 | 第49页 |
| ·共培养温度对转化的影响 | 第49页 |
| 3. 讨论 | 第49-50页 |
| 4. 小结 | 第50-51页 |
| 第五部分 抗菌肽转化植株的检测 | 第51-55页 |
| 1. 材料与方法 | 第51-52页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·植物材料 | 第51页 |
| ·菌株 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-52页 |
| ·转化植株DNA提取 | 第51页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第51-52页 |
| ·牛津杯法检测转化植株叶片水提液的抑菌活性 | 第52页 |
| ·农杆菌接种诱发冠瘿瘤 | 第52页 |
| 2. 结果与分析 | 第52-54页 |
| ·转化植株PCR检测结果 | 第52-53页 |
| ·牛津杯法抑菌活性检测结果 | 第53页 |
| ·农杆菌接种诱发冠瘿瘤试验结果 | 第53-54页 |
| 3. 讨论 | 第54页 |
| 4. 小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 英文摘要 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 独创性声明 | 第63页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第63页 |
