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1,3-丙二醇氧化还原酶基因的克隆分析及定向进化初探

摘要第1-6页
Abstract第6-7页
1 前言第7-17页
   ·1,3-丙二醇概况第7-9页
     ·1,3-丙二醇的应用第7页
     ·1,3-丙二醇的合成路线第7-9页
   ·.3-丙二醇氧化还原酶的研究概况第9-11页
     ·1,3-丙二醇氧化还原酶的作用底物第9页
     ·1,3-丙二醇氧化还原酶的理化特性第9-11页
     ·1,3-丙二醇氧化还原酶的制备与纯化第11页
   ·酶分子体外定向进化的概况第11-16页
     ·酶分子定向进化简介第11-12页
     ·定向进化的常用方法第12-15页
     ·定向进化的发展前景第15-16页
   ·课题由来和研究意义第16-17页
2 材料与方法第17-31页
   ·实验材料第17-21页
     ·质粒及菌种第17页
     ·内切酶、DNA分子标准及试剂盒第17页
     ·主要试剂第17页
     ·各种溶液、缓冲液及其配置方法第17-20页
     ·培养基配方第20-21页
     ·主要仪器及设备第21页
     ·应用软件及程序第21页
   ·实验方法第21-31页
     ·基因克隆第21-25页
     ·生物信息学分析第25-27页
     ·基因突变文库的构建第27页
     ·筛选第27-31页
3 结果与分析第31-51页
   ·基因克隆第31-37页
     ·PCR扩增体系的优化第31-36页
     ·目的基因的亚克隆第36-37页
     ·基因测序第37页
   ·生物信息学分析第37-42页
     ·基因序列的分析第37-38页
     ·编码蛋白的预测及分析第38-41页
     ·功能预测第41-42页
   ·基因突变第42-47页
     ·易错PCR体系的构建第42-45页
     ·DNA重排体系的优化第45-47页
   ·筛选第47-51页
     ·1,3-丙二醇对菌体生长的影响第47-48页
     ·显色反应的考察第48-51页
4 小结第51-53页
   ·基因克隆及分析第51页
   ·生物信息学分析第51-52页
   ·基因突变反应体系的建立第52页
   ·筛选方案的确定第52-53页
5 讨论第53-55页
   ·dhaT基因的克隆第53页
   ·生物信息学分析第53页
   ·突变文库的构建第53-54页
   ·均匀设计在本文中的应用第54-55页
6 研究展望第55-56页
参考文献第56-62页
致谢第62-63页
附录一 缩写词和英汉对照第63-65页
附录二 核苷标酸序列图谱第65-67页
附录三 dhaT基因数据库资料第67-70页
附录四 攻硕期间发表论文第70页

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