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黄鳝Ostf和β-actin基因的克隆与表达分析及其BAC文库的初步构建

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
前言第9-18页
 一 性别决定和分化相关的基因第11-12页
  (一) Sry和Sox9第11-12页
  (二) Dmrt1和DMY第12页
  (三) Fgf9和胰岛素受体基因insulin receptor gene第12页
  (四) 其它性别决定基因第12页
 二 鱼类的性别决定和分化第12-14页
 三 Ostf基因第14-15页
 四 β—actin基因第15页
 五 BAC文库第15-16页
 六 本研究的主要内容和目的第16-18页
材料和方法第18-34页
 一 材料与试剂第18-19页
 二 实验方法第19-34页
  (一) Ostf cDNA克隆的获得和相关的序列分析第19-20页
  (二) Ostf基因在基因组中的southern杂交第20-23页
  (三) Ostf基因表达模式的研究第23-29页
  (四) 黄鳝β—actin基因的克隆及序列分析第29-31页
  (五) 黄鳝基因组BAC文库的构建第31-34页
结果和分析第34-47页
 一 雄性黄鳝性腺SMARTcDNA文库插入片段的检测第34页
 二 黄鳝Ostf基因序列分析第34-37页
  (一) 测序第34-35页
  (二) Ostf基因的同源序列比对第35-36页
  (三) Ostf基因系统发生分析第36-37页
 三 黄鳝Ostf基因的基因组southern杂交第37-38页
 四 黄鳝Ostf基因的表达特征分析第38-39页
  (一) 总RNA和mRNA的提取第38页
  (二) cDNA合成及RT-PCR第38页
  (三) Northern blot第38-39页
  (四) 组织原位杂交第39页
 五 黄鳝β—actin基因的克隆及序列分析第39-45页
  (一) 基因克隆第39-42页
  (二) 序列分析第42-45页
 六 黄鳝BAC文库的构建第45-47页
  (1) 部分消化酶切条件的确定第45页
  (2) 两次脉冲场电泳选择回收第45-46页
  (3) 回收的大片断DNA定量第46页
  (4) 转化结果及酶切鉴定第46-47页
讨论第47-51页
 一 Ostf基因的表达及功能第47-48页
 二 鱼类β-actin基因的系统发生第48-49页
 三 黄鳝基因组BAC文库的初步构建第49-51页
参考文献第51-60页
研究生期间发表的论文第60-61页
致谢第61页

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