摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
前言 | 第9-18页 |
一 性别决定和分化相关的基因 | 第11-12页 |
(一) Sry和Sox9 | 第11-12页 |
(二) Dmrt1和DMY | 第12页 |
(三) Fgf9和胰岛素受体基因insulin receptor gene | 第12页 |
(四) 其它性别决定基因 | 第12页 |
二 鱼类的性别决定和分化 | 第12-14页 |
三 Ostf基因 | 第14-15页 |
四 β—actin基因 | 第15页 |
五 BAC文库 | 第15-16页 |
六 本研究的主要内容和目的 | 第16-18页 |
材料和方法 | 第18-34页 |
一 材料与试剂 | 第18-19页 |
二 实验方法 | 第19-34页 |
(一) Ostf cDNA克隆的获得和相关的序列分析 | 第19-20页 |
(二) Ostf基因在基因组中的southern杂交 | 第20-23页 |
(三) Ostf基因表达模式的研究 | 第23-29页 |
(四) 黄鳝β—actin基因的克隆及序列分析 | 第29-31页 |
(五) 黄鳝基因组BAC文库的构建 | 第31-34页 |
结果和分析 | 第34-47页 |
一 雄性黄鳝性腺SMARTcDNA文库插入片段的检测 | 第34页 |
二 黄鳝Ostf基因序列分析 | 第34-37页 |
(一) 测序 | 第34-35页 |
(二) Ostf基因的同源序列比对 | 第35-36页 |
(三) Ostf基因系统发生分析 | 第36-37页 |
三 黄鳝Ostf基因的基因组southern杂交 | 第37-38页 |
四 黄鳝Ostf基因的表达特征分析 | 第38-39页 |
(一) 总RNA和mRNA的提取 | 第38页 |
(二) cDNA合成及RT-PCR | 第38页 |
(三) Northern blot | 第38-39页 |
(四) 组织原位杂交 | 第39页 |
五 黄鳝β—actin基因的克隆及序列分析 | 第39-45页 |
(一) 基因克隆 | 第39-42页 |
(二) 序列分析 | 第42-45页 |
六 黄鳝BAC文库的构建 | 第45-47页 |
(1) 部分消化酶切条件的确定 | 第45页 |
(2) 两次脉冲场电泳选择回收 | 第45-46页 |
(3) 回收的大片断DNA定量 | 第46页 |
(4) 转化结果及酶切鉴定 | 第46-47页 |
讨论 | 第47-51页 |
一 Ostf基因的表达及功能 | 第47-48页 |
二 鱼类β-actin基因的系统发生 | 第48-49页 |
三 黄鳝基因组BAC文库的初步构建 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-60页 |
研究生期间发表的论文 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |