| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 1 引言 | 第13-21页 |
| ·磷脂与磷脂酶 | 第13-17页 |
| ·磷脂酶 D(PLD)的发现与基因的克隆 | 第15页 |
| ·PLD 的生理作用 | 第15-16页 |
| ·PLD 基因在植物育种上的应用潜力 | 第16-17页 |
| ·几丁质酶的作用 | 第17-21页 |
| ·植物几丁质酶的特性 | 第18-19页 |
| ·几丁质酶与植物的防卫反应机制 | 第19页 |
| ·植物转几丁质酶基因工程的研究 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-33页 |
| ·实验材料 | 第21-24页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·农杆菌菌株和质粒 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21-23页 |
| ·质粒提取试剂 | 第21-22页 |
| ·植物基因组 DNA 提取试剂 | 第22页 |
| ·电泳缓冲液配制 | 第22页 |
| ·GUS 检测缓冲液的配制 | 第22-23页 |
| ·Southern 杂交试剂 | 第23页 |
| ·Fe2(KCN)3显色液 | 第23页 |
| ·酶及生化试剂 | 第23页 |
| ·酶 | 第23页 |
| ·生化试剂 | 第23页 |
| ·仪器 | 第23-24页 |
| ·研究方法 | 第24-33页 |
| ·美洲黑杨 G2 组培再生系统的建立 | 第24页 |
| ·抑菌性抗生素(头孢霉素)敏感性试验 | 第24页 |
| ·选择性抗生素(卡那霉素?潮霉素)敏感性试验 | 第24页 |
| ·根癌农杆菌介导的基因转化 | 第24-26页 |
| ·培养基的配制 | 第25页 |
| ·农杆菌的培养 | 第25页 |
| ·改良农杆菌侵染法转化杨树 | 第25页 |
| ·转化条件的优化 | 第25-26页 |
| ·转化芽获得 | 第26页 |
| ·杨树再生苗的 PCR 检测 | 第26-30页 |
| ·质粒 DNA 碱法提取 | 第26-27页 |
| ·美洲黑杨 G2 植物基因组 DNA 提取试剂 | 第27-28页 |
| ·PCR 扩增 | 第28-29页 |
| ·电泳检测 PCR 扩增结果 | 第29-30页 |
| ·PCR-Southern 检测 | 第30-31页 |
| ·转化植株的耐盐性生根鉴定 | 第31页 |
| ·GUS 基因稳定表达的组织化学染色 | 第31页 |
| ·转化植株移栽 | 第31页 |
| ·移栽植株耐盐性测定 | 第31-32页 |
| ·电导率测定 | 第31-32页 |
| ·移栽植株耐盐性的测定 | 第32页 |
| ·几丁质酶活性测定 | 第32-33页 |
| ·粗酶液的制备 | 第32页 |
| ·胶状几丁质(Collodial chitin)的制备 | 第32页 |
| ·几丁质酶活性测定 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-48页 |
| ·美洲黑杨 G2 组培再生体系的确立 | 第33-36页 |
| ·叶片外植体芽分化培养基的确立 | 第33-34页 |
| ·再生芽的获得 | 第33页 |
| ·不同激素浓度对芽分化的影响 | 第33-34页 |
| ·组培苗生根培养基的筛选 | 第34页 |
| ·抗生素敏感性浓度的确定 | 第34-36页 |
| ·头孢霉素敏感性试验 | 第34-35页 |
| ·选择性抗生素(卡那霉素?潮霉素)敏感性试验 | 第35-36页 |
| ·农杆菌介导基因的转化 | 第36-39页 |
| ·外植体(转化受体材料)的准备 | 第37页 |
| ·外植体的预培养 | 第37页 |
| ·菌液浓度和侵染时间对转化效果的影响 | 第37-38页 |
| ·共培养时间对转化效果的影响 | 第38-39页 |
| ·转基因植株的抗性筛选 | 第39页 |
| ·PCR,PCR-Southern 鉴定 | 第39-42页 |
| ·转反义 PLDγ基因植株的耐盐性测定与筛选 | 第42页 |
| ·GUS 基因稳定表达的组织化学染色 | 第42-44页 |
| ·转化植株移栽 | 第44-45页 |
| ·转化植株耐盐性测定 | 第45-47页 |
| ·电导率测定 | 第45-46页 |
| ·转基因植株耐盐性的增强 | 第46-47页 |
| ·几丁质酶活性测定 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| ·多价基因的转化 | 第48-49页 |
| ·转化过程中的选择时期 | 第49-50页 |
| ·生物基因表达的反义调控 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 6 参考文献 | 第52-61页 |
| 7 致谢 | 第61-62页 |
| 8 攻读学位期间发表论文情况 | 第62页 |