| 摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-29页 |
| ·概述 | 第11-15页 |
| ·介体传播的病毒病害发生的生态学理论 | 第12页 |
| ·介体传毒研究的一些概念 | 第12-14页 |
| ·介体取食行为与病毒传播方式的相关性 | 第14-15页 |
| ·非循回型病毒 | 第15-22页 |
| ·非循回型病毒传播的生物学过程 | 第16-17页 |
| ·非循回型传播的几大病毒类群 | 第17-20页 |
| ·黄瓜花叶病毒属 | 第17页 |
| ·马铃薯Y病毒属 | 第17-19页 |
| ·花椰菜花叶病毒属 | 第19-20页 |
| ·介体体内受体位点研究 | 第20-22页 |
| ·介体传播的非循回型病毒的进化学理论 | 第22页 |
| ·循回型病毒 | 第22-28页 |
| ·循回非增殖型病毒 | 第23-27页 |
| ·循回非增殖型病毒的循回假说模型 | 第23-25页 |
| ·循回非增殖型病毒和病毒编码的CP通读蛋白的关系 | 第25-26页 |
| ·蚜虫体内和循回非增殖型病毒互作的受体蛋白的研究 | 第26-27页 |
| ·循回增殖型病毒 | 第27-28页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第29-40页 |
| ·供试毒源 | 第29页 |
| ·菌种、质粒和试剂 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-40页 |
| ·HC-pro基因的克隆与分析 | 第29-35页 |
| ·引物的设计与合成 | 第29页 |
| ·模板RNA的提取 | 第29-31页 |
| ·cDNA的合成 | 第31页 |
| ·PCR反应条件的建立 | 第31页 |
| ·核酸的琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| ·PCR反应产物的纯化 | 第31-32页 |
| ·质粒DNA的少量提取 | 第32-33页 |
| ·目标片断和质粒的酶切反应 | 第33-34页 |
| ·载体和目标片断的连接 | 第34页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第34-35页 |
| ·重组质粒转化大肠杆菌 | 第35页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第35页 |
| ·菌种的保存 | 第35页 |
| ·HC-pro基因的原核表达 | 第35-37页 |
| ·表达载体的制备 | 第35-36页 |
| ·感受态细胞的制备和质粒的转化 | 第36页 |
| ·细菌的裂解与培养 | 第36页 |
| ·SDS-PAGE检测蛋白的表达 | 第36-37页 |
| ·目的蛋白胶条的回收和电洗脱法浓缩样品 | 第37页 |
| ·抗血清的制备和Western blot检测 | 第37-40页 |
| ·免疫家兔和血清的制备 | 第37页 |
| ·Western blot杂交检测 | 第37-40页 |
| 第三章 结果与分析 | 第40-48页 |
| ·马铃薯Y病毒N株系的获得 | 第40页 |
| ·RNA的提取检测 | 第40页 |
| ·马铃薯Y病毒N株系HC-pro基因RT-PCR扩增的目的片断 | 第40-41页 |
| ·HC-pro基因的克隆与鉴定 | 第41-43页 |
| ·原核载体的构建 | 第43页 |
| ·HC-pro基因的原核表达 | 第43-46页 |
| ·HC-pro蛋白的纯化和抗血清的制备 | 第46-47页 |
| ·Western blot检测 | 第47-48页 |
| 第四章 讨论 | 第48-64页 |
| ·马铃薯Y病毒属内成员间和种下不同株系间HC-Pro基因的变异 | 第48页 |
| ·PVYHC-pro蛋白和CaMVP2蛋白和P3蛋白可能的同源性 | 第48页 |
| ·RT-PCR方法的讨论 | 第48-49页 |
| ·HC基因的原核表达 | 第49页 |
| ·进一步研究的一点设想 | 第49-64页 |
| 作者简介 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
