农杆菌介导法将水稻几丁质酶基因导入油菜的研究
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第一部分：材料与方法 | 第10-28页 |
| 1．材料 | 第10-14页 |
| 1．1 植物材料 | 第10-11页 |
| 1．2 根癌农杆菌及质粒 | 第11页 |
| 1．3 主要试剂 | 第11页 |
| 1．4 培养基及溶液 | 第11-14页 |
| 2．方法 | 第14-28页 |
| 2．1 无菌苗的获取 | 第14页 |
| 2．2 油菜植株再生系统的优化 | 第14-16页 |
| 2．3 抗性芽的生根、移栽 | 第16页 |
| 2．4 抑菌剂和各种选择压浓度的测定 | 第16-17页 |
| 2．5 重组质粒向农杆菌中的转化 | 第17-21页 |
| 2．6 油菜高效农杆菌转化体系的建立 | 第21-28页 |
| 第二部分：结果与分析 | 第28-46页 |
| 1 最佳植株再生系统的建立 | 第28-30页 |
| 1．1 最佳外植体及其苗龄的确定 | 第28页 |
| 1．2 不同激素组合对芽分化的影响 | 第28-30页 |
| 1．3 基因型对芽分化的影响 | 第30页 |
| 2．AgNO_3对外植体芽分化频率的影响 | 第30-32页 |
| 3．抗性芽的生根、移栽 | 第32-33页 |
| 4．抑菌剂和各种选择压浓度的确定 | 第33-35页 |
| 4．1 恢复培养中采用的抑菌剂cab的浓度 | 第33-34页 |
| 4．2 潮霉素(hyt)选择压 | 第34页 |
| 4．3 除草剂Basta选择压 | 第34-35页 |
| 5．重组质粒向农杆菌中的转化和鉴定 | 第35-37页 |
| 5．1 重组质粒向农杆菌中的转化 | 第35-36页 |
| 5．2 农杆菌转化子的鉴定 | 第36-37页 |
| 6．高效油菜农杆菌遗传转化系统 | 第37-42页 |
| 6．1 预培养对外植体遗传转化的影响 | 第37页 |
| 6．2 农杆菌菌液浓度及浸染时间对转化的影响 | 第37-39页 |
| 6．3 共培养时间对转化的影响 | 第39-40页 |
| 6．4 恢复培养时间 | 第40-41页 |
| 6．5 选择培养 | 第41页 |
| 6．6 乙酰丁香酮(AS)对油菜转化的影响 | 第41-42页 |
| 7．外源基因整合与表达的检测结果 | 第42-46页 |
| 7．1 油菜基因组DNA的小量抽提 | 第42页 |
| 7．2 PCR检测结果 | 第42-43页 |
| 7．3 Southem杂交 | 第43-46页 |
| 第三部分 讨论与结论 | 第46-51页 |
| 1 讨论 | 第46-50页 |
| 1．1 最佳外植体的选择 | 第46页 |
| 1．2 植物组织培养中常见的试管苗玻璃化现象 | 第46-48页 |
| 1．3 AgNO_3对外植体转化效率的影响 | 第48页 |
| 1．4 抗生素对外植体转化效率的影响 | 第48页 |
| 1．5 转化子的筛选方法及时期 | 第48-49页 |
| 1．6 试管苗的移栽 | 第49-50页 |
| 2．结论 | 第50-51页 |
| 文献综述 | 第51-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 声明 | 第70页 |
