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油菜Oleosin基因克隆及其与GUS基因融合子表达载体的构建

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-7页
一. 文献综述第7-20页
 1.1 植物生物反应器第7-12页
  1.1.1 基本概念与表达系统第7页
  1.1.2 植物生物反应器的优势第7-8页
  1.1.3 利用植物生物反应器生产大分子物质第8-11页
  1.1.4 用于植物生物反应器的植物第11页
  1.1.5 问题与对策探讨第11-12页
 1.2 油体和油体相关蛋白第12-15页
  1.2.1 油体大小、结构与组成第13页
  1.2.2 油体相关蛋白第13-14页
  1.2.3 油体的形成与分解及其生物学功能第14-15页
 1.3 油体蛋白oleosin第15-20页
  1.3.1 Oleosin的组成、类型与分布第15页
  1.3.2 Oleosin的结构和功能第15-17页
  1.3.3 Oleosin基因及其表达第17-18页
  1.3.4 Oleosin在基因工程方面的应用第18-20页
二. 引言第20-21页
三. 材料与方法第21-28页
 3.1 实验材料第21-22页
  3.1.1 植物材料第21页
  3.1.2 菌种和质粒第21页
  3.1.3 主要试剂第21页
  3.1.4 主要仪器第21页
  3.1.5 培养基第21页
  3.1.6 常用溶液第21-22页
 3.2 实验方法第22-28页
  3.2.1 植物总DNA的提取第22-23页
  3.2.2 PCR引物设计第23页
  3.2.3 目的基因的聚合酶链式反应第23页
  3.2.4 重组子的鉴定第23-24页
  3.2.5 序列分析与结构预测的方法第24页
  3.2.6 农杆菌的培养与活化第24页
  3.2.7 植物细胞转化第24页
  3.2.8 GUS活性的组织染色法第24页
  3.2.9 大肠杆菌质粒DNA的提取第24-25页
  3.2.10 农杆菌质粒DNA的提取第25-26页
  3.2.11 质粒DNA的纯化第26页
  3.2.12 DNA限制性内切酶反应第26页
  3.2.13 DNA片段的连接第26页
  3.2.14 DNA片段的回收第26-27页
  3.2.15 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第27页
  3.2.16 农杆菌感受态的制备及转化第27-28页
四. 结果与分析第28-43页
 4.1 油菜Oleosin基因OTS的克隆与序列分析第28-32页
  4.1.1 PCR扩增及其产物克隆鉴定第28页
  4.1.2 PCR扩增片段的序列测定与分析第28-32页
 4.2 Oleosin基因OTS与GUS基因的融合及融合子序列分析第32-34页
  4.2.1 融合子重组质粒pUC-OTS-GUS的构建第32页
  4.2.2 融合子重组质粒pUC-OTS-GUS的酶切验证第32-34页
  4.2.3 融合子OTS-GUS的序列分析第34页
 4.3 OTS-GUS融合蛋白结构与性质预测分析第34-36页
  4.3.1 理化特性曲线预测第34-35页
  4.3.2 二级结构预测第35页
  4.3.3 跨膜区和潜在信号肽切割位点预测第35-36页
 4.4 OTS-GUS融合子植物表达载体的构建第36-41页
  4.4.1 OTS-GUS融合子35S启动子植物表达载体pBI35S-OTS121的构建第36-38页
  4.4.2 OTS-GUS融合子Lea启动子植物表达载体pBI-Lea-OTS121的构建第38页
  4.4.3 OTS-GUS融合子Napin启动子植物表达载体pBI-Napin-OTS121的构建第38-41页
 4.5 OTS-GUS融合子中GUS基因瞬时表达的检测第41-43页
五. 讨论第43-47页
 5.1 扩增获得的OTS基因特点与功能第43页
 5.2 基因融合及其预测分析第43-44页
 5.3 融合子OTS-GUS基因启动子的选用第44-45页
 5.4 Gus基因的瞬时表达第45-47页
六. 结论第47-48页
参考文献第48-52页
缩略词表第52-53页
附录第53-54页
致谢第54页

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