| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 世界山羊产业发展概况 | 第11页 |
| 2 贵州地方山羊产业发展概况 | 第11-13页 |
| 2.1 贵州地方山羊产业存在问题 | 第12页 |
| 2.2 贵州地方山羊产业发展趋势 | 第12-13页 |
| 3 贵州山羊主要品种 | 第13-14页 |
| 3.1 黔北麻羊 | 第13页 |
| 3.2 贵州黑山羊 | 第13-14页 |
| 4 山羊高繁殖力性能的分子遗传基础 | 第14-18页 |
| 4.1 骨形态发生蛋白4基因（BMP4）研究进展 | 第14-16页 |
| 4.2 骨形态发生蛋白受体IB基因（BMPR-IB）研究进展 | 第16-18页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 山羊BMPR-IB和BMP4基因多态性及其与繁殖性状的关联研究 | 第19-36页 |
| 1 材料和方法 | 第19-21页 |
| 1.1 实验动物 | 第19页 |
| 1.2 实验仪器 | 第19-20页 |
| 1.3 实验试剂及溶液配制 | 第20-21页 |
| 2 试验方法 | 第21-27页 |
| 2.1 山羊血液基因组DNA的提取 | 第21页 |
| 2.2 基因组DNA浓度和纯度的检测 | 第21-22页 |
| 2.3 DNA池的构建 | 第22页 |
| 2.4 引物设计及合成 | 第22-23页 |
| 2.5 PCR反应 | 第23页 |
| 2.6 PCR-SSCP反应 | 第23-25页 |
| 2.7 PCR片段测序 | 第25页 |
| 2.8 遗传学分析 | 第25-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-32页 |
| 3.1 基因组DNA检测结果 | 第27页 |
| 3.2 PCR扩增产物的琼脂糖凝胶检测结果 | 第27-30页 |
| 3.3 BMPR-IB和BMP4基因的品种DNA池PCR产物测序结果 | 第30页 |
| 3.4 BMPR-IB基因第9外显子C40G位点的SSCP分析 | 第30-31页 |
| 3.5 BMPR-IB基因第9外显子 40 bp位点的遗传学分析 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-36页 |
| 4.1 PCR-SSCP方法影响因素分析 | 第32-33页 |
| 4.2 BMPR-IB基因的多态性及其与繁殖性状的关联分析 | 第33-36页 |
| 第三章 黔北麻羊BMPR-IB和BMP4基因表达规律的研究 | 第36-51页 |
| 1 实验材料 | 第36-37页 |
| 1.1 动物材料及样品采集 | 第36页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第36页 |
| 1.3 主要试剂 | 第36-37页 |
| 2 试验方法 | 第37-41页 |
| 2.1 组织RNA的提取 | 第37页 |
| 2.2 总RNA质量的检测 | 第37-38页 |
| 2.3 第一链cDNA的合成 | 第38页 |
| 2.4 BMPR-IB和BMP4基因荧光定量PCR引物的设计 | 第38-39页 |
| 2.5 荧光定量PCR反应条件的探索与优化 | 第39-40页 |
| 2.6 标准曲线的建立 | 第40-41页 |
| 2.7 数据处理 | 第41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-48页 |
| 3.1 组织总RNA的提取和纯度检测 | 第41页 |
| 3.2 扩增产物特异性检测 | 第41-42页 |
| 3.3 实时荧光定量PCR反应的特异性分析 | 第42-44页 |
| 3.4 BMPR-IB基因表达差异分析 | 第44-46页 |
| 3.5 BMP4基因表达差异分析 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 4.1 实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第48-49页 |
| 4.2 BMPR-IB基因mRNA表达研究 | 第49-50页 |
| 4.3 BMP4基因m RNA表达研究 | 第50-51页 |
| 第四章 山羊BMPR-IB和BMP4基因原核表达载体的构建及生物信息学分析 | 第51-68页 |
| 1 材料和方法 | 第51-52页 |
| 1.1 试验样品 | 第51页 |
| 1.2 试验试剂 | 第51页 |
| 1.3 实验仪器 | 第51页 |
| 1.4 常用试剂配制 | 第51-52页 |
| 2 实验方法 | 第52-55页 |
| 2.1 黔北麻羊卵巢组织总RNA的提取 | 第52页 |
| 2.2 RNA的逆转录反应 | 第52页 |
| 2.3 黔北麻羊BMPR-IB和BMP4基因CDS区的克隆 | 第52-55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-65页 |
| 3.1 总RNA的提取和cDNA的合成 | 第55页 |
| 3.2 CDS区扩增产物的PCR检测结果 | 第55-56页 |
| 3.3 目的基因CDS区凝胶回收产物检测 | 第56页 |
| 3.4 pUCm-T-BMPR-IB/BMP4重组载体的菌液PCR鉴定 | 第56-57页 |
| 3.5 pUCm-T-BMPR-IB/BMP4重组质粒的提取和鉴定 | 第57页 |
| 3.6 pUCm-T-BMPR-IB/BMP4重组质粒的双酶切和测序鉴定 | 第57-58页 |
| 3.7 PET32a(+)-BMPR-IB/BMP4重组载体的构建 | 第58-59页 |
| 3.8 黔北麻羊BMPR-IB和BMP4基因CDS区的生物信息学分析 | 第59-65页 |
| 4 讨论 | 第65-68页 |
| 4.1 原核表达载体的选择 | 第65-66页 |
| 4.2 稀有密码子对蛋白表达的影响 | 第66-68页 |
| 第五章 黔北麻羊BMP4基因原核表达 | 第68-76页 |
| 1 材料与方法 | 第68-72页 |
| 1.1 实验材料 | 第68-69页 |
| 1.2 实验方法 | 第69-72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-74页 |
| 2.1 重组蛋白的表达形式 | 第72页 |
| 2.2 诱导温度和IPTG浓度、时间对表达结果的影响 | 第72-74页 |
| 3 讨论 | 第74-76页 |
| 第六章 结论与展望 | 第76-77页 |
| 1 小结 | 第76页 |
| 2 展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 附录 | 第86-91页 |
