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RT-PCR对水中肠道病毒灭活效果及机制的评价研究

缩略词表第1-10页
中文摘要第10-13页
英文摘要第13-16页
文献回顾:环境水中肠传病毒的检测研究进展第16-25页
 前言第17页
 一、水中肠传病毒浓缩技术第17-20页
  1.微孔滤膜吸附洗脱法第18页
  2.Al(OH)_3吸附沉淀法第18-19页
  3.聚乙二醇(PEG)脱水透析法第19页
  4.改良的病毒浓缩方法第19-20页
 二、水中肠传病毒的检出与计数第20-23页
  1.水中肠传病毒敏感宿主细胞的选择第20-21页
  2.组织培养及病毒分离第21页
  3.病毒检测、计数第21-23页
 参考文献第23-25页
课题研究第25-70页
 导言第26-29页
 第一部分:水中脊髓灰质炎病毒消毒实验细胞感染模型的建立第29-44页
  Ⅰ.病毒株与细胞系的筛选实验第29-34页
   1.材料与方法第30-31页
   2.结果第31-33页
   ·5种病毒株在5种细胞系中CPE及TCID_(50)滴定结果比较第32页
   ·Brunhide,Henan株在增殖后PFU,DIBA检测结果比较第32-33页
   3.讨论第33-34页
  Ⅱ.病毒增殖和PEG 6000沉淀结合差速离心方法浓缩PV 1病毒第34-38页
   1.材料与方法第35-36页
   2.结果第36-38页
   ·细胞培养物初处理效果第36页
   ·PEG 6000沉淀病毒蛋白的作用第36页
   ·差速离心提纯沉淀病毒的作用第36-37页
   ·RT-PCR及TEM鉴定结果第37-38页
   3.讨论第38页
  Ⅲ.病毒感染性、抗原性及核酸指标检测方法的评价研究第38-44页
   1.材料与方法第39-40页
   2.结果第40-42页
   ·PFUA、DIBA和RT-PCR的敏感性第40页
   ·PFUA、DIBA和RT-PCR的特异性第40-42页
   3.讨论第42-44页
 第二部分 四种理化消毒因子对水中脊髓灰质炎病毒的核酸、抗原及感染灭活效果研究及消毒机理探讨第44-59页
  1.材料与方法第45-47页
  2.结果第47-51页
   ·病毒漂浮法对病毒的回收效果第47页
   ·中和剂试验结果第47-48页
   ·热力消毒对PV 1的核酸、抗原及感染灭活效果第48页
   ·紫外线消毒对PV 1的核酸、抗原及感染灭活效果第48-49页
   ·氯消毒对PV 1的核酸、抗原及感染灭活效果第49-50页
   ·碘消毒对PV 1的核酸、抗原及感染灭活效果第50页
   ·热力、紫外线、氯、碘灭活PV 1所需CT值比较效果第50-51页
  3.讨论第51-59页
   ·中止方法第51-52页
   ·病毒回收方法第52页
   ·消毒方法及消毒条件第52-53页
   ·消毒指标第53-54页
   ·热力对PV三种指标的灭活作用比较及消毒机理第54-55页
   ·紫外线对PV三种指标的灭活作用比较及消毒机理第55页
   ·氯对PV三种指标的灭活作用比较及消毒机理第55-56页
   ·碘对PV三种指标的灭活作用比较及消毒机理第56-57页
   ·RT-PCR评价四种消毒方法对PV1灭活效果的指标安全性、代表性第57-59页
 第三部分 广谱引物半套式RT-PCR检测水中多种肠道病毒的研究第59-70页
  1.材料与方法第60-64页
  2.结果第64-66页
   ·单对引物(Primer 1'-3'或Primer2'-3')RT-PCR分别扩增Coxs.B3第64页
   ·半套式(Primer 1'-3'和Primer2'-3')RT-PCR扩增Coxs.B3第64-65页
   ·广谱引物半套式RT-PCR扩增16个肠传病毒株RNA第65-66页
  3.讨论第66-70页
   ·广谱引物半套式RT-PCR的特异性第66-67页
   ·广谱引物半套式RT-PCR的敏感性第67页
   ·广谱引物半套式RT-PCR用于检测水中肠道病毒的意义第67-70页
结论第70-71页
参考文献第71-75页
致谢第75-76页
附录一 野战条件下水中肠道病毒去除效果的安全性评价实验研究——全军医药卫生科研基金课题申请书第76-84页
附录二 野战条件下水中肠道病毒去除效果的安全性评价实验研究——主要内容及技术路线第84-88页
附录三 1993年以来已发表的论文题录第88页

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