| 缩写词和关键词 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 1.前言 | 第13-14页 |
| 2.文献回顾 | 第14-27页 |
| ·引言 | 第14页 |
| ·血管形成在肿瘤生长中的促进作用 | 第14-20页 |
| ·血管生成的一般过程及异同 | 第14-15页 |
| ·肿瘤组织血管的新生及形态结构 | 第15-17页 |
| ·新生血管形成在肿瘤生长中的作用 | 第17-20页 |
| ·血管生长因子及其在膀胱肿瘤研究中的现状 | 第20-24页 |
| ·生长因子研究概况 | 第20-21页 |
| ·血管生长因子家属 | 第21-24页 |
| ·膀胱肿瘤血管生长因子研究现状 | 第24页 |
| ·抑制肿瘤生长的可能途径 | 第24-27页 |
| 实验第一部分 BCAF的提取、分离与纯化 | 第27-42页 |
| 3.实验(一) BCAF的提取与初步分离 | 第27-32页 |
| ·材料和方法 | 第27-30页 |
| ·使用的主要试剂及仪器 | 第27页 |
| ·组织标本的收集与保存 | 第27-28页 |
| ·BCAF粗品的提取 | 第28页 |
| ·BCAF粗品的分离 | 第28-30页 |
| ·结果 | 第30-32页 |
| ·BCAF粗提液及蛋白质含量 | 第30页 |
| ·CM—纤维素交换色谱分离 | 第30页 |
| ·BCAF粗品提取分离后蛋白质回收率 | 第30-32页 |
| 4.实验(二) BCAF的纯化 | 第32-42页 |
| ·材料和方法 | 第32-34页 |
| ·使用的主要试剂及仪器 | 第32页 |
| ·GF-HPLC | 第32-33页 |
| ·RP-HPLC | 第33页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-42页 |
| ·GF-HPLC分离 | 第34-36页 |
| ·RP-HPLC分离 | 第36页 |
| ·蛋白质测定标准曲线 | 第36-39页 |
| ·HPLC分离后活性组分蛋白质含量 | 第39页 |
| ·HPLC分离后蛋白质回收率 | 第39页 |
| ·BCAF提纯后回收率及系数 | 第39-42页 |
| 实验第二部分 BCAF的生物学活性研究 | 第42-78页 |
| 5.实验(三) BCAF对CAM新生血管形成的促进作用 | 第42-53页 |
| ·材料和方法 | 第42-43页 |
| ·样品来源与分组 | 第42页 |
| ·鸡胚来源 | 第42页 |
| ·样品处理及载体制备 | 第42页 |
| ·CAM内样品接种 | 第42-43页 |
| ·组织学观察 | 第43页 |
| ·结果评定 | 第43页 |
| ·结果 | 第43-53页 |
| ·正常CAM血管 | 第43页 |
| ·CM-纤维素载体对照 | 第43-44页 |
| ·膀胱癌实体组织 | 第44页 |
| ·膀胱癌组织蛋白质粗提液样品 | 第44页 |
| ·CM-纤维素交换色谱分离样品 | 第44页 |
| ·GF-HPLC分离样品 | 第44页 |
| ·RP-HPLC分离样品 | 第44-46页 |
| ·CAM血管组织学检查 | 第46-53页 |
| 6.实验(四) BCAF对Balb／c 3T3细胞DNA合成的刺激作用 | 第53-72页 |
| ·材料和方法 | 第53-55页 |
| ·细胞及来源 | 第53页 |
| ·细胞培养基及培养条件 | 第53页 |
| ·细胞生长率测定 | 第53页 |
| ·实验分组 | 第53页 |
| ·细胞DNA合成~3H—TdR掺入放射性测定 | 第53-54页 |
| ·~3H—TdR掺入指数及活性单位计算 | 第54-55页 |
| ·统计学处理 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-72页 |
| ·Balb／c 3T3细胞生长率 | 第55页 |
| ·~3H放射性测定结果 | 第55-72页 |
| 7.实验(五) 正常膀胱组织蛋白质提取物的生物活性测定 | 第72-78页 |
| ·材料和方法 | 第72页 |
| ·使用的主要试剂及仪器 | 第72页 |
| ·组织标本的收集与保存 | 第72页 |
| ·正常膀胱组织的蛋白质提取 | 第72页 |
| ·蛋白质粗提物的阳离子交换色谱分离 | 第72页 |
| ·鸡胚CAM新生血管形成的检测 | 第72页 |
| ·Balb／c 3T3细胞DNA合成刺激作用的检测 | 第72页 |
| ·结果 | 第72-78页 |
| ·正常膀胱组织蛋白质提取及阳离子交换色谱分离 | 第72-73页 |
| ·CAM新生血管诱导反应 | 第73页 |
| ·CAM血管超微结构观察 | 第73页 |
| ·Balb／c 3T3细胞DNA合成刺激反应 | 第73-78页 |
| 实验第三部分 BCAF的理化性质分析 | 第78-108页 |
| 8.实验(六) BCAF的SDS—PAGE分析及分子量测定 | 第78-85页 |
| ·材料和方法 | 第78-81页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第78页 |
| ·标准分子量蛋白质及BCAF样品预处理 | 第78-79页 |
| ·垂直平板SDS—PAGE | 第79页 |
| ·凝胶银染色 | 第79页 |
| ·电泳相对迁移率测定 | 第79-80页 |
| ·标准曲线制定及分子量测定 | 第80-81页 |
| ·结果 | 第81-85页 |
| ·凝胶染色 | 第81页 |
| ·标准蛋白质和样品Rm值 | 第81页 |
| ·低分子量蛋白质标准曲线 | 第81-82页 |
| ·样品蛋白质分子量测定 | 第82-85页 |
| 9.实验(七) BCAF样品中DNA和RNA含量测定 | 第85-90页 |
| ·材料和方法 | 第85页 |
| ·使用的主要试剂与仪器 | 第85页 |
| ·测试方法 | 第85页 |
| ·结果 | 第85-90页 |
| ·DNA测定及标准曲线 | 第86页 |
| ·RNA测定及标准曲线 | 第86页 |
| ·BCAF样品中DNA、RNA含量测定 | 第86-90页 |
| 10.实验(八) BCAF的氨基酸成分分析 | 第90-97页 |
| ·材料和方法 | 第90-91页 |
| ·使用的主要试剂与仪器 | 第90页 |
| ·样品预处理 | 第90页 |
| ·氨基酸分析色谱参数 | 第90-91页 |
| ·结果 | 第91-97页 |
| ·BCAF氨基酸组成的重量浓度 | 第91-95页 |
| ·BCAF氨基酸组成的摩尔浓度 | 第95-97页 |
| 11.讨论 | 第97-107页 |
| ·BCAF提取与分离的条件 | 第97-98页 |
| ·BCAF纯化中分离步骤的选择 | 第98-100页 |
| ·BCAF生物学活性鉴定分析方法的建立 | 第100-101页 |
| ·BCAF的生物学活性 | 第101-102页 |
| ·血管生长因子及其BCAF在新生血管形成中的作用机理 | 第102-104页 |
| ·BCAF部分理化性质及成分分析 | 第104-105页 |
| ·BCAF研究的意义及展望 | 第105-107页 |
| 12.总结 | 第107-108页 |
| 13.致谢 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-117页 |
