| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-30页 |
| 1 紫云英的概述 | 第10-11页 |
| ·紫云英研究现状 | 第10-11页 |
| 2.遗传多样性、遗传标记及应用 | 第11-20页 |
| ·遗传多样性 | 第11页 |
| ·遗传学研究的意义 | 第11-12页 |
| ·遗传标记及其研究方法 | 第12-15页 |
| ·分子标记的特点 | 第15页 |
| ·DNA 分子标记的建立和发展 | 第15-16页 |
| ·DNA 分子标记技术类型 | 第16-20页 |
| 3.主要 DNA 标记的种类和应用 | 第20-28页 |
| ·RFLP | 第20页 |
| ·随机扩增多态性 DNA (RAPD) | 第20-21页 |
| ·简单重复序列(SSR) | 第21-22页 |
| ·简单重复序列区间 ISSR | 第22-23页 |
| ·序列相关扩增多态性 SRAP | 第23-24页 |
| ·分子标记的应用 | 第24-28页 |
| 4.论文研究的内容、意义及技术路线 | 第28-30页 |
| ·论文研究的内容 | 第28页 |
| ·本论文的立题意义 | 第28-29页 |
| ·本论文的技术路线: | 第29-30页 |
| 第二章 紫云英 ISSR 引物的筛选及 ISSR-PCR 反应体系的优化及多样性分析 | 第30-47页 |
| 1 材料 | 第30-31页 |
| ·供试材料 | 第30页 |
| ·试验主要试剂 | 第30页 |
| ·实验所用引物 | 第30-31页 |
| ·试验仪器（型号） | 第31页 |
| 2 试验方法 | 第31-35页 |
| ·紫云英 DNA 的提取及检测 | 第31-33页 |
| ·温度梯度 PCR | 第33页 |
| ·ISSR-PCR 的反应体系和条件 | 第33-34页 |
| ·正交实验设计优化 PCR 反应体系 | 第34-35页 |
| ·种质资源的亲缘关系聚类分析 | 第35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-45页 |
| ·基因组提取与检测 | 第35-36页 |
| ·ISSR-PCR 筛选引物与最佳退火温度 | 第36-38页 |
| ·正交结果直观分析 | 第38-39页 |
| ·正交结果方差分析 | 第39-40页 |
| ·单因素水平对 ISSR-PCR 的影响 | 第40-43页 |
| ·Taq 酶浓度对 ISSR-PCR 结果的影响 | 第40-41页 |
| ·引物对 ISSR-PCR 结果的影响 | 第41页 |
| ·dNTP 浓度对 ISSR-PCR 的影响 | 第41-42页 |
| ·Mg~(2+) 浓度对 ISSR-PCR 的影响 | 第42页 |
| ·模板浓度对 ISSR-PCR 的影响 | 第42-43页 |
| ·紫云英 ISSR-PCR 反应体系稳定性的验证 | 第43-44页 |
| ·聚类分析 | 第44-45页 |
| 4. 讨论 | 第45-46页 |
| 5. 结论 | 第46-47页 |
| 第三章 基于 ISSR-PCR 对紫云英 SSR 引物的开发及对种质资源的鉴别应用 | 第47-66页 |
| 1.材料 | 第47-48页 |
| ·供试材料 | 第47页 |
| ·试验主要试剂 | 第47-48页 |
| ·实验所用的引物 | 第48页 |
| ·试验仪器（型号） | 第48页 |
| 2.试验方法 | 第48-57页 |
| ·紫云英 DNA 的提取及检测 | 第48-49页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第49-50页 |
| ·目的基因的连接和转化 | 第50-52页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第50-51页 |
| ·连接与转化 | 第51页 |
| ·细菌培养基 | 第51页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第51-52页 |
| ·基于 ISSR-PCR 开发紫云英 SSR 正向物 | 第52-53页 |
| ·基因组酶切和与接头连接、转化及反向引物的开发 | 第53-56页 |
| ·DNA 酶切 | 第54-55页 |
| ·接头连接 | 第55页 |
| ·PCR 检测 | 第55-56页 |
| ·巢式 PCR 扩增、测序及 SSR 反向引物设计 | 第56页 |
| ·SSR 引物的筛选及 PCR 扩增 | 第56-57页 |
| ·紫云英种质资源的遗传关系聚类分析 | 第57页 |
| 3.结果与分析 | 第57-65页 |
| ·基因组 DNA 提取结果 | 第57-58页 |
| ·基因用 ECORV 酶切结果 | 第58页 |
| ·ISSR-PCR 扩增及菌液检测结果 | 第58-59页 |
| ·巢式 PCR 扩增、测序及反向 SSR 引物设计 | 第59-61页 |
| ·用 ISSR-PCR 开发 SSR 引物的结果 | 第61页 |
| ·SSR 引物扩增后的聚丙烯酰胺凝胶电泳结果 | 第61-62页 |
| ·聚类分析 | 第62-65页 |
| 4. 讨论 | 第65页 |
| 5. 结论 | 第65-66页 |
| 第四章 总结与展望 | 第66-68页 |
| 1. 总结 | 第66-67页 |
| 2. 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-77页 |
| 附表: | 第77-78页 |
| 附图 | 第78-84页 |
| 作者简介 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 附件 | 第86页 |
