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单增李斯特菌ActA的表达、免疫原性及胶体金试纸研制

内容提要第1-12页
前言第12-14页
第一篇 文献综述第14-56页
 第一章 单增李斯特菌的研究进展第14-40页
  1 LM 的生物学特性第14-16页
  2 LM 的分型第16-19页
  3 致病机理与毒力因子第19-29页
  4 抗LM 感染的免疫机理第29-31页
  5 LM 的流行情况与检测技术研究进展第31-40页
 第二章 免疫胶体金检测技术研究进展第40-56页
  1 免疫胶体金技术简介第40-41页
  2 免疫胶体金的制备第41-44页
  3 免疫胶体金检测技术及其应用第44-51页
  4 免疫胶体金在其它领域的应用第51-54页
  5 展望第54-56页
第二篇 研究内容第56-138页
 第一章 单增李斯特菌ActA 的原核表达与纯化第56-84页
  1 材料与方法第56-72页
   ·材料第56-61页
   ·方法第61-72页
  2 结果第72-81页
   ·LM 基因组DNA 的提取第73页
   ·目的基因PCR 扩增第73页
   ·重组质粒pMD-18T/ActA 的鉴定第73-74页
   ·actA 基因的序列测定第74-79页
   ·多克隆抗体效价测定第79页
   ·蛋白质印迹分析第79-80页
   ·纯化蛋白ActA 的SDS-PAGE 分析第80页
   ·纯化蛋白ActA 的浓度测定第80-81页
  3 讨论第81-82页
  4 小结第82-84页
 第二章 单增李斯特菌ActA 的免疫原性研究第84-94页
  1 材料与方法第84-87页
   ·材料第84-85页
   ·方法第85-87页
  2 结果第87-90页
   ·小鼠血清抗体的检测第87-88页
   ·淋巴细胞转化试验第88页
   ·T 淋巴细胞亚群分类试验第88-90页
  3 讨论第90-93页
  4 小结第93-94页
 第三章 单增李斯特菌单克隆抗体的研制第94-118页
  1 材料与方法第94-105页
   ·材料第94-96页
   ·方法第96-105页
  2 结果第105-113页
   ·免疫小鼠血清抗体效价第106页
   ·细胞融合、筛选和克隆第106-107页
   ·杂交瘤细胞染色体众数第107-108页
   ·单抗亚型的鉴定第108-109页
   ·单抗的纯度分析及分子量测定第109页
   ·单抗效价的测定第109-110页
   ·腹水中蛋白浓度及抗体含量测定第110-111页
   ·单抗亲和力测定第111-113页
   ·单抗特异性检测第113页
  3 讨论第113-116页
  4 小结第116-118页
 第四章 单增李斯特菌胶体金试纸的研制第118-138页
  1 材料与方法第118-126页
   ·材料第118-120页
   ·方法第120-126页
  2 结果第126-135页
   ·胶体金的鉴定第126-127页
   ·亲合纯化羊抗小鼠 IgG 抗体的浓度测定与纯度分析第127-128页
   ·抗体与胶体金结合的最适pH 值确定第128-130页
   ·抗体与胶体金结合的最佳浓度的确定第130-131页
   ·制备胶体金探针的鉴定第131-132页
   ·胶体金探针稳定性试验第132页
   ·试纸的制备第132-134页
   ·特异性试验第134页
   ·敏感性试验第134页
   ·稳定性试验第134页
   ·模拟样品试验第134-135页
  3 讨论第135-137页
  4 小结第137-138页
结论第138-140页
参考文献第140-164页
攻读博士期间发表的主要论文第164-165页
摘要第165-168页
英文摘要第168-172页
致谢第172-173页
导师简介第173-174页
作者简介第174页

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