| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-17页 |
| 英文缩写注释 | 第17-19页 |
| 前言 | 第19-23页 |
| 第一章 RA患者血清和关节液中HSP70的改变及临床意义 | 第23-32页 |
| 1 材料与方法 | 第23-26页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-26页 |
| ·临床对象及分组 | 第24-25页 |
| ·临床标本采集和处理 | 第25页 |
| ·HSP70含量测定 | 第25页 |
| ·细胞因子含量测定 | 第25-26页 |
| ·统计学分析 | 第26页 |
| 2 结果 | 第26-30页 |
| ·类风湿关节炎患者血清HSP70含量变化 | 第26-28页 |
| ·类风湿关节炎组、骨关节炎组及正常对照组血清HSP70含量比较 | 第26-27页 |
| ·活动期类风湿关节炎和非活动期类风湿关节炎血清HSP70含量比较 | 第27页 |
| ·类风湿关节炎患者血清HSP70含量与RA活动性相关指标的相关性分析 | 第27页 |
| ·类风湿关节炎患者血清HSP70含量与血清TNF-α、IL-6、IL-10含量的相关性分析 | 第27-28页 |
| ·类风湿关节炎患者关节液HSP70含量变化 | 第28-30页 |
| ·类风湿关节炎组和骨关节炎组关节液中HSP70含量比较 | 第28-29页 |
| ·活动期类风湿关节炎和非活动期类风湿关节炎关节液中HSP70含量比较 | 第29页 |
| ·类风湿关节炎患者关节液HSP70含量与关节液TNF-α、IL-6、IL-10含量的相关性分析 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-31页 |
| 4 结论 | 第31-32页 |
| 第二章 应激对HSP70表达和释放的影响 | 第32-42页 |
| 1 材料与方法 | 第33-36页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·人成纤维样滑膜细胞的分离和培养 | 第34页 |
| ·热休克模型制作 | 第34-35页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第35页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第35页 |
| ·Western blotting分析 | 第35页 |
| ·细胞培养基中HSP70含量测定 | 第35-36页 |
| ·乳酸脱氢酶(LDH)释放率检测 | 第36页 |
| ·统计学分析 | 第36页 |
| 2 结果 | 第36-40页 |
| ·热休克对成纤维样滑膜细胞HSP70表达和释放的影响 | 第36-38页 |
| ·TNF-α对成纤维样滑膜细胞HSP70表达和释放的影响 | 第38-39页 |
| ·脂筏对成纤维细胞样滑膜HSP70表达和释放的影响 | 第39-40页 |
| 3 讨论 | 第40-41页 |
| 4 结论 | 第41-42页 |
| 第三章 HSP70对成纤维样滑膜细胞炎症细胞因子分泌的影响及机制 | 第42-73页 |
| 1 材料与方法 | 第44-49页 |
| ·材料 | 第44-46页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第44-45页 |
| ·主要仪器 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-49页 |
| ·人成纤维样滑膜细胞的分离和培养 | 第46页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第46页 |
| ·细胞核蛋白和胞浆组分的分离 | 第46-47页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第47页 |
| ·Western blotting分析 | 第47页 |
| ·酶联免疫吸附测定(ELISA) | 第47页 |
| ·细胞免疫荧光分析 | 第47-48页 |
| ·RT-PCR分析 | 第48页 |
| ·统计学分析 | 第48-49页 |
| 2 结果 | 第49-69页 |
| ·HSP70对成纤维样滑膜细胞促炎介质IL-6、IL-8和MCP-1分泌的影响 | 第49-54页 |
| ·HSP70与TNF-α单独刺激对成纤维样滑膜细胞IL-6、IL-8和MCP-1分泌的影响 | 第49-50页 |
| ·HSP70对TNF-α诱导的成纤维样滑膜细胞IL-6、IL-8和MCP-1分泌的影响 | 第50-52页 |
| ·重组HSP70中可能的内毒素污染对成纤维样滑膜细胞IL-6、IL-8和MCP-1分泌的影响 | 第52-54页 |
| ·HSP70对成纤维样滑膜细胞抗炎细胞因子IL-10分泌的影响 | 第54-55页 |
| ·HSP70直接促进成纤维样滑膜细胞中IL-10的分泌 | 第54页 |
| ·HSP70中内毒素污染对成纤维样滑膜细胞IL-10分泌的影响 | 第54-55页 |
| ·HSP70对成纤维样滑膜细胞炎症细胞因子分泌的影响具有TLR4依赖性 | 第55-59页 |
| ·成纤维样滑膜细胞中TLR2和TLR4的表达 | 第55-56页 |
| ·TLR4介导了HSP70对成纤维样滑膜细胞中IL-6、IL-8和MCP-1分泌的抑制 | 第56-58页 |
| ·TLR4介导了HSP70对成纤维样滑膜细胞中IL-10分泌的影响 | 第58-59页 |
| ·HSP70对成纤维样滑膜细胞MAPK信号通路活化的影响 | 第59-61页 |
| ·TNF-α对成纤维样滑膜细胞MAPK信号通路的活化 | 第59-60页 |
| ·HSP70对TNF-α诱导的成纤维样滑膜细胞MAPK信号通路活化的影响 | 第60-61页 |
| ·HSP70对成纤维样滑膜细胞NF-κB信号通路活化的影响 | 第61-66页 |
| ·TNF-α对成纤维样滑膜细胞NF-κB信号通路的活化 | 第61-62页 |
| ·HSP70对TNF-α诱导的NF-κB(P65)核移位的影响 | 第62-65页 |
| ·HSP70对TNF-α所致IκBα降解的影响 | 第65-66页 |
| ·HSP70对成纤维样滑膜细胞JAK2-STAT3-SOCS3信号通路直接的活化作用 | 第66-69页 |
| 3 讨论 | 第69-72页 |
| 4 结论 | 第72-73页 |
| 第四章 HSP70对胶原诱导性关节炎动物模型的影响 | 第73-89页 |
| 1 材料与方法 | 第74-79页 |
| ·材料 | 第74-75页 |
| ·动物 | 第74页 |
| ·质粒和菌株 | 第74页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第74-75页 |
| ·主要仪器 | 第75页 |
| ·方法 | 第75-79页 |
| ·重组人HSP70蛋白的制备 | 第76-77页 |
| ·重组HSP70的表达和分离纯化 | 第76页 |
| ·重组HSP70中内毒素的去除和检测 | 第76-77页 |
| ·重组HSP70浓度的测定 | 第77页 |
| ·重组HSP70纯度的鉴定 | 第77页 |
| ·胶原性关节炎动物模型的建立 | 第77页 |
| ·Ⅱ型胶原乳化液的制备 | 第77页 |
| ·造模方法 | 第77页 |
| ·动物分组、给药方法及取材方法 | 第77-78页 |
| ·关节炎评价方法 | 第78-79页 |
| ·关节炎评分 | 第78页 |
| ·组织病理学评分 | 第78页 |
| ·血清TNF-α、IL-6含量测定 | 第78-79页 |
| ·统计学分析 | 第79页 |
| 2 结果 | 第79-87页 |
| ·重组人HSP70在大肠杆菌的表达、纯化和鉴定 | 第79-81页 |
| ·HSP70对胶原诱导性关节炎小鼠关节炎症的影响 | 第81-83页 |
| ·HSP70对胶原诱导性关节炎小鼠组织病理学改变的影响 | 第83-86页 |
| ·HSP70对胶原诱导性关节炎小鼠血清中TNF-α、IL-6水平的影响 | 第86-87页 |
| 3 讨论 | 第87-88页 |
| 4 结论 | 第88-89页 |
| 总结论 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-103页 |
| 综述 | 第103-114页 |
| 参考文献 | 第107-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 攻读学位期间主要成果 | 第115-116页 |
