中华紫胶虫紫胶合成关键基因筛选及功能验证
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第16-29页 |
| 1.1 引言 | 第16页 |
| 1.1.1 研究背景 | 第16页 |
| 1.2 国内外研究现状及评述 | 第16-26页 |
| 1.2.1 中华紫胶生物学特性 | 第16-17页 |
| 1.2.2 紫胶虫泌胶特性 | 第17-19页 |
| 1.2.3 紫胶主要成分 | 第19-22页 |
| 1.2.4 紫胶虫在分子水平上的研究 | 第22-23页 |
| 1.2.5 RNAi技术 | 第23-26页 |
| 1.2.6 项目来源和经费支持 | 第26页 |
| 1.3 研究的目标和主要研究内容 | 第26-28页 |
| 1.3.1 关键的科学问题与研究目标 | 第26-27页 |
| 1.3.2 主要研究内容 | 第27-28页 |
| 1.4 研究技术路线 | 第28-29页 |
| 第二章 紫胶虫泌胶特性与动态规律 | 第29-35页 |
| 2.1 试验材料与方法 | 第29-31页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第29页 |
| 2.1.2 仪器 | 第29-30页 |
| 2.1.3 试剂 | 第30页 |
| 2.1.4 显微成像 | 第30页 |
| 2.1.5 个体泌胶量的测定 | 第30页 |
| 2.1.6 个体泌胶速率的测定 | 第30-31页 |
| 2.2 结果与分析 | 第31-33页 |
| 2.2.1 中华紫胶虫雌虫形态学特征 | 第31页 |
| 2.2.2 个体泌胶量测定 | 第31-32页 |
| 2.2.3 个体泌胶速率测定 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-34页 |
| 2.5 小结 | 第34-35页 |
| 第三章 中华紫胶虫转录组分析 | 第35-60页 |
| 3.1 试验材料与方法 | 第35-36页 |
| 3.1.1 供试昆虫 | 第35-36页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第36页 |
| 3.1.3 试验仪器 | 第36页 |
| 3.2 试验方法 | 第36-42页 |
| 3.2.1 中华紫胶虫总RNA提取 | 第36-37页 |
| 3.2.2 转录组测序 | 第37-38页 |
| 3.2.3 转录组测序数据分析 | 第38-39页 |
| 3.2.4 数据处理 | 第39页 |
| 3.2.5 功能注释 | 第39页 |
| 3.2.6 差异基因表达和富集分析 | 第39页 |
| 3.2.7 荧光定量PCR验证 | 第39-42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-57页 |
| 3.3.1 转录组学分析策略 | 第42页 |
| 3.3.2 高通量测序和组装 | 第42-44页 |
| 3.3.3 转录组注释 | 第44-45页 |
| 3.3.4 GO、KEGG、COG注释结果 | 第45-49页 |
| 3.3.5 差异基因表达分析 | 第49-56页 |
| 3.3.6 RT-qPCR验证 | 第56-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-58页 |
| 3.5 小结 | 第58-60页 |
| 第四章 FAD基因RNA干扰载体构建及功能验证 | 第60-77页 |
| 4.1 试验材料 | 第61页 |
| 4.1.1 供试昆虫 | 第61页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第61页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第61页 |
| 4.2 试验方法 | 第61-70页 |
| 4.2.1 中华紫胶虫总RNA提取 | 第61-62页 |
| 4.2.2 cDNA第一链的合成 | 第62-63页 |
| 4.2.3 引物设计 | 第63页 |
| 4.2.4 候选基因的扩增 | 第63页 |
| 4.2.5 胶回收PCR扩增产物 | 第63-64页 |
| 4.2.6 目的片段与L4440干扰载体的酶切 | 第64页 |
| 4.2.7 T4DNA酶连接反应 | 第64-65页 |
| 4.2.8 重组质粒转化 | 第65-67页 |
| 4.2.10 dsRNA的诱导表达 | 第67-68页 |
| 4.2.11 大肠杆菌RNA提取 | 第68页 |
| 4.2.12 dsRNA转染 | 第68-69页 |
| 4.2.13 实时荧光定量PCR验证 | 第69-70页 |
| 4.3 试验结果 | 第70-74页 |
| 4.3.1 紫胶虫总RNA的提取 | 第70页 |
| 4.3.2 重组载体的构建 | 第70-71页 |
| 4.3.3 dsRNA的诱导表达 | 第71页 |
| 4.3.4 RT-qPCR检测 | 第71-73页 |
| 4.3.5 个体泌胶量测定 | 第73-74页 |
| 4.4 讨论 | 第74-76页 |
| 4.5 小结 | 第76-77页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第77-82页 |
| 5.1 讨论 | 第77-79页 |
| 5.2 结论 | 第79-81页 |
| 5.3 本研究的创新点 | 第81页 |
| 5.4 后续研究及展望 | 第81页 |
| 5.5 存在的问题 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 附录 | 第88-91页 |
| 在读期间的学术研究 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
