| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-22页 |
| ·布鲁氏菌病概况 | 第9-10页 |
| ·布鲁氏菌的病原性 | 第10-11页 |
| ·布鲁氏菌病的发病机理 | 第11-12页 |
| ·布鲁氏菌主要外膜蛋白的研究进展 | 第12-18页 |
| ·应用于布鲁氏菌免疫与诊断的外膜蛋白 | 第12-14页 |
| ·用于布鲁氏菌基因多态性和基因分型的外膜蛋白 | 第14-16页 |
| ·与毒力相关的外膜蛋白 | 第16-18页 |
| ·布鲁氏菌检测方法的研究进展 | 第18-20页 |
| ·传统免疫学方法 | 第18页 |
| ·酶联免疫吸附试验（ELISA） | 第18-19页 |
| ·布鲁氏菌的PCR 检测方法 | 第19-20页 |
| ·内蒙古地区布鲁氏菌病疫情 | 第20页 |
| ·本试验研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 2 试验一 布鲁氏菌bp26 和OMP10 基因的克隆及序列分析 | 第22-38页 |
| ·试验材料 | 第22-23页 |
| ·布鲁氏菌试验菌株 | 第22页 |
| ·大肠杆菌及载体 | 第22页 |
| ·生物试剂及试剂盒 | 第22页 |
| ·主要试剂及配制 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·参考基因序列及登录号 | 第23页 |
| ·试验方法 | 第23-28页 |
| ·引物的设计与合成 | 第23页 |
| ·菌株的培养与DNA 模板的制备 | 第23-24页 |
| ·布鲁氏菌bp26 基因和OMP10 基因PCR 扩增 | 第24-25页 |
| ·PCR 产物的回收、纯化 | 第25-26页 |
| ·目的片段的连接 | 第26页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·目的基因的转化 | 第27页 |
| ·蓝白斑的筛选 | 第27页 |
| ·质粒 DNA 的小量提取 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定 | 第28页 |
| ·重组质粒DNA 序列测定与分析 | 第28页 |
| ·试验结果 | 第28-31页 |
| ·bp26 基因和OMP10 基因PCR 扩增产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第28-30页 |
| ·扩增产物的克隆及重组质粒的筛选和鉴定结果 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的序列测定结果 | 第31-32页 |
| ·bp26 基因序列分析 | 第32-34页 |
| ·bp26 基因序列比较分析 | 第32-33页 |
| ·bp26 基因序列与参考序列的比较分析 | 第33-34页 |
| ·OMP10 基因序列分析 | 第34-35页 |
| ·OMP10 基因序列比较分析 | 第34页 |
| ·OMP10 基因序列与参考序列的比较分析 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-38页 |
| ·布鲁氏菌bp26 基因和OMP10 基因的克隆 | 第35页 |
| ·布鲁氏菌bp26 基因和OMP10 基因序列及遗传进化分析 | 第35-36页 |
| ·布鲁氏菌bp26 基因和OMP10 基因的研究 | 第36-38页 |
| 3 试验二 布鲁氏菌PCR 快速检测方法的研究 | 第38-48页 |
| ·试验材料 | 第38页 |
| ·试验用细菌 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·分子生物学试剂 | 第38页 |
| ·试验方法 | 第38-40页 |
| ·引物的设计 | 第38页 |
| ·菌株的培养与DNA 模板的制备 | 第38页 |
| ·布鲁氏菌BCSP31 基因PCR 扩增 | 第38-39页 |
| ·BCSP31 基因PCR 反应条件的优化 | 第39-40页 |
| ·敏感性检测 | 第40页 |
| ·特异性检测 | 第40页 |
| ·重复性和稳定性试验 | 第40页 |
| ·试验结果 | 第40-45页 |
| ·培养细菌DNA 提取结果 | 第40页 |
| ·BCSP31 基因扩增结果 | 第40-41页 |
| ·BCSP31 基因PCR 反应条件的优化结果 | 第41-43页 |
| ·敏感性试验结果 | 第43-44页 |
| ·特异性试验结果 | 第44页 |
| ·重复性和稳定性试验结果 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-48页 |
| ·PCR 反应条件的优化 | 第45-46页 |
| ·布鲁氏菌PCR 检测的特异性和敏感性 | 第46页 |
| ·布鲁氏菌PCR 检测方法的研究 | 第46-48页 |
| 4 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 附录 | 第57-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
