| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-22页 |
| ·高等植物细胞中 Ca~(2+)运输系统 | 第10-15页 |
| ·Ca~(2+)通道（Calcium Channels） | 第11-12页 |
| ·Ca~(2+)主动运输系统 | 第12页 |
| ·植物 Ca~(2+)泵的研究进展 | 第12-15页 |
| ·RNAi 技术及其在基因功能研究中的应用 | 第15-22页 |
| ·RNAi 的发现与发展 | 第15-16页 |
| ·RNAi 的分子机制 | 第16-18页 |
| ·RNAi 的优点及应用 | 第18-22页 |
| 2 利用 RNAi 技术研究拟南芥 Ca~(2+)泵基因 ECA1 和 ACA2 的功能 | 第22-51页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·酶以及试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·常用溶液的配制 | 第23-25页 |
| ·培养基的配制 | 第23页 |
| ·一般溶液的配制 | 第23页 |
| ·实验试剂的配制 | 第23-25页 |
| ·实验方法 | 第25-37页 |
| ·拟南芥基因组 DNA 的提取 | 第25页 |
| ·从基因组中克隆目的基因 | 第25-26页 |
| ·PCR 产物的电泳回收 | 第26-27页 |
| ·PCR 扩增产物与pGEM-T 载体的连接 | 第27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·pGEM-T 载体连接产物的转化 | 第28页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·质粒 DNA 的酶切验证 | 第29页 |
| ·DNA 测序 | 第29页 |
| ·从质粒上扩增所需要的片段 | 第29-30页 |
| ·RNAi 载体的构建 | 第30-31页 |
| ·连接反应 | 第31页 |
| ·重组子导入大肠杆菌 | 第31页 |
| ·农杆菌电击转化感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·质粒转化农杆菌的电击转化 | 第32页 |
| ·根瘤农杆菌介导的转化 | 第32-33页 |
| ·转基因植株鉴定 | 第33-34页 |
| ·转基因纯合体的筛选 | 第34-35页 |
| ·半定量 RT-PCR 检测 ECA1 和 ACA2 的转录量 | 第35-37页 |
| ·转基因株系的表型观察 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-51页 |
| ·ECA_1和 ACA_2基因特异片段的克隆 | 第37-39页 |
| ·植物表达载体构建 | 第39-40页 |
| ·转基因拟南芥植株的获得 | 第40-41页 |
| ·阳性植株的 PCR 检测 | 第41-42页 |
| ·半定量 RT-PCR | 第42-44页 |
| ·转基因拟南芥生长发育的变化 | 第44-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 4 展望 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 附录1：RNAi 载体 E1-G-E1 的构建 | 第59-61页 |
| 附录2：RNAi 载体 A2-G-A2 的构建 | 第61-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
