| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-24页 |
| ·植物嫁接成活机理研究 | 第14-19页 |
| ·嫁接形态解剖学机理 | 第14-15页 |
| ·嫁接成活生理生化机理 | 第15-18页 |
| ·水分 | 第15页 |
| ·养分 | 第15页 |
| ·激素 | 第15-16页 |
| ·净光合速率(fn) | 第16-18页 |
| ·呼吸 | 第18页 |
| ·嫁接成活分子机理 | 第18-19页 |
| ·基因 | 第18页 |
| ·蛋白质 | 第18-19页 |
| ·植物嫁接的展望 | 第19页 |
| ·CDNA-AFLP 技术原理及特点 | 第19-21页 |
| ·cDNA-AFLP 技术原理 | 第19-20页 |
| ·cDNA-AFLP 技术特点 | 第20-21页 |
| ·重复性高，可检测低丰度表达的mRNA | 第20页 |
| ·可准确地反映基因间表达量的差异 | 第20-21页 |
| ·全面获取转录组的表达信息 | 第21页 |
| ·CDNA-AFLP 技术在植物上的应用 | 第21-24页 |
| ·基因表达特性的研究 | 第21-22页 |
| ·构建转录图谱 | 第22页 |
| ·分离特异表达的基因 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-40页 |
| ·材料准备 | 第24-26页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·试剂及来源 | 第24-25页 |
| ·接头和引物序列 | 第25-26页 |
| ·RNA 的提取及纯化 | 第26-28页 |
| ·RNA 提取 | 第26-27页 |
| ·总RNA 提取质量检测 | 第27页 |
| ·mRNA 纯化 | 第27-28页 |
| ·CDNA-AFLP | 第28-32页 |
| ·双链cDNA 的合成 | 第28-29页 |
| ·第一链cDNA 合成 | 第28-29页 |
| ·第二链cDNA 合成 | 第29页 |
| ·用QIAquick PCR Purification Kit 纯化cDNA | 第29页 |
| ·cDNA 酶切连接 | 第29-30页 |
| ·TaqI 酶切 | 第29-30页 |
| ·AseI 酶切 | 第30页 |
| ·连接 | 第30页 |
| ·预扩增 | 第30-31页 |
| ·选择性扩增 | 第31页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31-32页 |
| ·配制测序胶 | 第31-32页 |
| ·测序胶电泳 | 第32页 |
| ·测序胶银染 | 第32页 |
| ·特异片段克隆测序 | 第32-37页 |
| ·特异片段回收 | 第32-33页 |
| ·扩增片段纯化 | 第33-34页 |
| ·PCR 产物与T-Vector 的连接 | 第34页 |
| ·感受态细胞制备(CaC12 法) | 第34页 |
| ·质粒转化 | 第34-35页 |
| ·质粒提取并进行酶切检测 | 第35-36页 |
| ·PCR 鉴定 | 第36页 |
| ·序列测定 | 第36-37页 |
| ·定量RT-PCR 方法 | 第37-39页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·RNA 提取 | 第37页 |
| ·选择内参 | 第37页 |
| ·定量RT-PCR 分析引物设计 | 第37-38页 |
| ·定量RT-PCR 操作方法 | 第38-39页 |
| ·按下列组份配制反转录反应液(反应液配制请在冰上进行) | 第38-39页 |
| ·Real Time PCR 反应 | 第39页 |
| ·序列比对 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-49页 |
| ·RNA 提取电泳图 | 第40页 |
| ·CDNA-AFLP 分析 | 第40-42页 |
| ·山核桃cDNA 合成 | 第40-41页 |
| ·预扩增 | 第41页 |
| ·选择性扩增聚丙烯酰胺凝胶电泳图 | 第41-42页 |
| ·特异片段克隆测序分析 | 第42-44页 |
| ·回收二次扩增产物结果分析 | 第42-43页 |
| ·纯化回收产物分析 | 第43页 |
| ·重组质粒提取及酶切结果分析 | 第43-44页 |
| ·测得的所有序列 | 第44页 |
| ·定量RT－PCR 分析 | 第44-46页 |
| ·序列功能分析 | 第46-49页 |
| 4 讨论 | 第49-55页 |
| ·RNA 提取 | 第49页 |
| ·CDNA-AFLP 体系的建立与优化 | 第49-50页 |
| ·模板质量是影响实验结果的主要因素 | 第49页 |
| ·cDNA-AFLP 反应条件的优化 | 第49页 |
| ·差异片段的检测 | 第49-50页 |
| ·特异片段克隆测序 | 第50页 |
| ·定量RT－PCR | 第50-51页 |
| ·嫁接调控网络初探 | 第51-54页 |
| ·4 个基因可能在嫁接过程中参与信号转导和IAA 运输相关基因的表达调控 | 第52-53页 |
| ·水孔蛋白PIP18 在山核桃嫁接过程中增强表达 | 第53页 |
| ·生长素响应因子(ARF)在山核桃嫁接过程中抑制表达 | 第53-54页 |
| ·下一步工作构想 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附表 | 第61-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
