中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-36页 |
·细胞色素P450 酶系与细胞色素P450 | 第12-15页 |
·细胞色素P450 酶系 | 第12-13页 |
·细胞色素P450 | 第13页 |
·P450 的类型 | 第13-14页 |
·细胞色素P450 的系统命名 | 第14-15页 |
·P450 种类的多样性 | 第15页 |
·昆虫细胞色素P450 基因的研究进展 | 第15-25页 |
·昆虫细胞色素P450 基因的基本特性 | 第16-18页 |
·昆虫细胞色素P450 的表达 | 第18-20页 |
·昆虫P450 基因表达的调控机制 | 第20-23页 |
·昆虫细胞色素P450 的功能 | 第23-24页 |
·在昆虫取食中的作用 | 第23-24页 |
·在昆虫抗药性中的作用 | 第24页 |
·P450 介导抗性的分子基础 | 第24-25页 |
·家蚕细胞色素P450 的研究进展 | 第25-28页 |
·目前家蚕P450 的研究进展 | 第26-27页 |
·本研究室的工作 | 第27-28页 |
·实时荧光定量PCR(REAL-TIME QUANTITATIVE PCR)技术 | 第28-36页 |
·PCR 技术从定性到定量的飞跃 | 第28-30页 |
·荧光定量PCR 的荧光化学方法 | 第30-32页 |
·实验原理 | 第32-33页 |
·荧光定量PCR 的定量方法 | 第33-36页 |
第二章 引言 | 第36-46页 |
·研究的目的意义 | 第36-39页 |
·家蚕 P450 基因 CYP305B1 的基因组序列的研究 | 第36-37页 |
·家蚕P450 基因的定量研究 | 第37-39页 |
·实验材料、常用试剂及常规实验技术 | 第39-46页 |
·实验用杀虫剂和氟化物 | 第39-40页 |
·常用试剂及其配制 | 第40-42页 |
·常用基础分子生物学实验技术 | 第42-46页 |
第三章 家蚕P450 基因CYP305B1 的基因组序列克隆及其结构分析 | 第46-55页 |
·实验材料 | 第47页 |
·供试家蚕 | 第47页 |
·试剂 | 第47页 |
·实验技术线路和方法 | 第47-50页 |
·实验技术线路 | 第47-48页 |
·实验方法 | 第48-50页 |
·实验结果和分析 | 第50-54页 |
·分段PCR 和反向PCR 结果 | 第50-51页 |
·家蚕CYP305B1 的基因结构 | 第51-52页 |
·家蚕CYP305B1 的5’侧翼序列 | 第52-53页 |
·内含子比较 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-55页 |
·CYP305B1 基因结构分析与比对 | 第54页 |
·关于实验方法的思考 | 第54-55页 |
第四章 实时定量PCR 方法比较的研究 | 第55-69页 |
·实验材料与试剂 | 第55-56页 |
·材料 | 第55-56页 |
·试剂 | 第56页 |
·实验技术线路和方法 | 第56-61页 |
·实验技术线路 | 第56-57页 |
·引物设计 | 第57-58页 |
·体外转录及外源跟踪标定基因mRNA/DNA 混合物的的制备 | 第58-59页 |
·核酸提取 | 第59-60页 |
·逆转录 | 第60页 |
·实时荧光定量PCR | 第60页 |
·标准曲线线制备 | 第60页 |
·数据计算及分析 | 第60-61页 |
·实验结果和分析 | 第61-66页 |
·标准曲线 | 第61-62页 |
·A3, GAPDH ,28S rRNA 基因在不同组织器官中转录水平 | 第62-65页 |
·外源跟踪标定基因mRNA/DNA 和内源参照基因的测定比较 | 第65-66页 |
·讨论 | 第66-69页 |
·基因的双跟踪标定定量PCR 和表观转录活性 | 第66-67页 |
·基因的表观转录活性值的含义 | 第67页 |
·基因的表观转录活性测定时应注意的问题 | 第67-68页 |
·基因的表观转录活性和利用内源参照基因的相对测定方法的比较 | 第68-69页 |
第五章 杀虫剂诱导下的P450 基因的转录水平的测定 | 第69-92页 |
·实验材料与试剂 | 第69-70页 |
·材料 | 第69-70页 |
·试剂 | 第70页 |
·实验原理和方法 | 第70-74页 |
·实验技术线路 | 第70-71页 |
·引物设计 | 第71-72页 |
·体外转录及外双跟踪标定基因mRNA/DNA 混合物的的制备 | 第72页 |
·实验样品的提取 | 第72-73页 |
·逆转录 | 第73-74页 |
·实时荧光定量PCR | 第74页 |
·标准曲线线制备 | 第74页 |
·数据计算及分析 | 第74页 |
·实验结果和分析 | 第74-89页 |
·不同组织的P450 表观转录水平 | 第74-77页 |
·不蚕品种家蚕以及野桑蚕的P450 的正常转录水平 | 第77-80页 |
·不同组织的杀虫剂诱导效果 | 第80-84页 |
·不同P450 的诱导效果 | 第84-89页 |
·讨论 | 第89-92页 |
第六章 氟化物诱导的P450 基因的转录水平 | 第92-112页 |
·实验材料和试剂 | 第92-93页 |
·材料 | 第92页 |
·试剂 | 第92-93页 |
·实验原理和方法 | 第93-97页 |
·实验技术线路 | 第93-94页 |
·引物设计 | 第94-95页 |
·体外转录及外源跟踪标定基因mRNA/DNA 混合物的的制备 | 第95页 |
·实验样品的提取 | 第95-96页 |
·逆转录 | 第96页 |
·实时荧光定量PCR | 第96-97页 |
·标准曲线制作 | 第97页 |
·数据计算及分析 | 第97页 |
·实验结果的分析 | 第97-110页 |
·不同P450 基因的NaF 的诱导效果 | 第97-103页 |
·不同组织器官P405 基因的NaF 诱导效果 | 第103-110页 |
·讨论 | 第110-112页 |
结论 | 第112-114页 |
参考文献(REFERNCES) | 第114-122页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第122-123页 |
附录 | 第123-135页 |
致谢 | 第135页 |