摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
前言 | 第8-10页 |
一、材料与试剂 | 第10-14页 |
1. 主要仪器 | 第10-11页 |
2. 菌株和载体 | 第11页 |
3. 细胞系 | 第11页 |
4. 主要试剂 | 第11页 |
5. 引物和合成肽 | 第11-12页 |
6. 实验动物 | 第12页 |
7. 主要溶液配制 | 第12-14页 |
二、实验方法 | 第14-30页 |
1. 稳定转染细胞系的建立 | 第14-21页 |
·引物设计与CD52 cDNA扩增 | 第14-16页 |
·真核表达载体的构建 | 第16-20页 |
·建立稳定转染细胞系 | 第20页 |
·稳定转染细胞系鉴定 | 第20-21页 |
2. 单克隆抗体的制备与鉴定 | 第21-30页 |
·动物免疫 | 第21页 |
·细胞融合 | 第21-23页 |
·杂交瘤细胞培养、筛选、冻存 | 第23-25页 |
·抗体鉴定 | 第25-30页 |
三、实验结果 | 第30-48页 |
1. 人CD52 cDNA的扩增与测序 | 第30页 |
2. pcDNA3.1(+)/CD52真核表达载体构建 | 第30-32页 |
3. pcDNA3.1(+)/CD52重组载体测序结果 | 第32-33页 |
4. 稳定转染细胞系的鉴定 | 第33-35页 |
5. 鼠血清多克隆抗体的检测 | 第35-38页 |
6. 单克隆杂交瘤细胞株的建立 | 第38页 |
7. 单克隆抗体特异性的鉴定 | 第38-48页 |
·ELISA检测抗体 | 第38-39页 |
·流式细胞术检测抗体 | 第39-44页 |
·Western blot鉴定抗体 | 第44页 |
·细胞间接免疫荧光显微镜检测 | 第44-45页 |
·外周血流式细胞分析抗体 | 第45-47页 |
·单克隆抗体亚类与型鉴定 | 第47-48页 |
四、讨论 | 第48-54页 |
五、结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-57页 |
综述 | 第57-69页 |
常见英文缩写 | 第69-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
发表文章 | 第72-73页 |