| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-19页 |
| ·金属硫蛋白的结构与生物学特性 | 第11-12页 |
| ·金属硫蛋白的主要功能 | 第12-15页 |
| ·重金属解毒作用 | 第13页 |
| ·参与微量元素的储存、运输和代谢 | 第13页 |
| ·清除羟自由基,拮抗电离辐射 | 第13-14页 |
| ·参与激素和发育调节,增强机体应激反应 | 第14页 |
| ·MT的免疫调节作用 | 第14-15页 |
| ·MT在细胞凋亡中的作用 | 第15页 |
| ·MT的应用 | 第15-16页 |
| ·MT分子生物学研究进展 | 第16-18页 |
| ·研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 第2章 黄颡鱼金属硫蛋白cDNA的克隆与序列分析 | 第19-38页 |
| ·引言 | 第19页 |
| ·材料与方法 | 第19-26页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·仪器与试剂 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-26页 |
| ·黄颡总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·RT-PCR | 第21页 |
| ·黄颡鱼金属硫蛋白基因cDNA的克隆 | 第21-22页 |
| ·PCR产物的回收 | 第22页 |
| ·PCR产物克隆到大肠杆菌 | 第22-23页 |
| ·黄颡鱼MT cDNA 3'-RACE和5'-RACE | 第23-24页 |
| ·序列分析 | 第24-25页 |
| ·半定量实验 | 第25-26页 |
| ·结果 | 第26-35页 |
| ·黄颡总RNA的提取 | 第26页 |
| ·黄颡MT基因片段克隆 | 第26-27页 |
| ·黄颡鱼MT cDNA 3'-RACE和5'-RACE | 第27页 |
| ·黄颡鱼MT cDNA序列拼接及全序列分析 | 第27-32页 |
| ·黄颡鱼MT的分子系统进化分析 | 第32-33页 |
| ·半定量实验 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-38页 |
| 第3章 黄颡鱼MT基因的原核表达 | 第38-50页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·菌株与质粒 | 第38页 |
| ·主要试剂与酶 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-44页 |
| ·引物设计 | 第39-40页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第40页 |
| ·pMAL-c2x质粒抽提 | 第40页 |
| ·pMAL-c2x-MT重组质粒的构建 | 第40-42页 |
| ·PCR产物酶切 | 第40-41页 |
| ·pMAL-c2x质粒酶切 | 第41页 |
| ·连接 | 第41页 |
| ·大肠杆菌BL21感受态细胞的制备 | 第41-42页 |
| ·酶切产物连接液的转化 | 第42页 |
| ·阳性克隆的PCR鉴定 | 第42页 |
| ·诱导表达 | 第42页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第42-43页 |
| ·样品处理 | 第42页 |
| ·SDS-PAGE操作 | 第42-43页 |
| ·两种金属离子对表达MT的大肠杆菌生长的影响初步研究 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44-48页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第44-45页 |
| ·pMAL-c2x质粒抽提及酶切 | 第45-46页 |
| ·双酶切鉴定重组质粒pMAL-c2x-MT | 第46-47页 |
| ·重组质粒测序结果 | 第47页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第47页 |
| ·两种金属离子对表达MT的大肠杆菌生长的影响初步研究 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第4章 结语 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 攻读硕士学位期间已发表论文情况 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
