| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 一 前言 | 第9-16页 |
| ·双生病毒概述 | 第9-11页 |
| ·单组分双生病毒begomoviruses中伴随卫星小分子DNA β的研究 | 第11-12页 |
| ·双生病毒Begomovirus 启动子鉴定的研究概述 | 第12-14页 |
| ·立题依据 | 第14-16页 |
| 二 材料与方法 | 第16-33页 |
| 1 材料 | 第16-18页 |
| ·毒源 | 第16页 |
| ·菌株和质粒 | 第16页 |
| ·试剂与仪器 | 第16-17页 |
| ·引物设计及序列 | 第17-18页 |
| 2 方法 | 第18-33页 |
| ·CTAB 法提取植物总DNA | 第18页 |
| ·高保真酶PCR 技术 | 第18-19页 |
| ·DNA 纯化 | 第19页 |
| ·DNA 分子克隆技术 | 第19-22页 |
| ·载体构建 | 第22页 |
| ·外源基因的表达 | 第22页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞制备和转化 | 第22-23页 |
| ·瞬时表达 | 第23-24页 |
| ·蛋白提取以及蛋白质含量测定（Bradford 法） | 第24-25页 |
| ·Western Blot分析 | 第25页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第25-26页 |
| ·转基因烟草的PCR 鉴定 | 第26页 |
| ·Southern Blot 分析 | 第26-31页 |
| ·DNA 序列生物信息学分析 | 第31-33页 |
| 三 结果与分析 | 第33-55页 |
| ·F1 是胜红蓟黄脉中国病毒的一个分离物 | 第33-35页 |
| ·F1 的病毒基因组结构 | 第35-36页 |
| ·原核表达载体pGEX- F1-βC1 的构建 | 第36-37页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第37-38页 |
| ·F1 βC1 ORF 启动子的序列分析 | 第38-39页 |
| ·F1 βC1 ORF 启动子片段的分离与克隆 | 第39-40页 |
| ·F1 DNAβ启动子驱动egfp 报告基因的植物表达载体的构建 | 第40-43页 |
| ·重组植物表达载体转化根癌农杆菌细胞 | 第43-44页 |
| ·瞬时表达中启动子活性的检测 | 第44-47页 |
| ·eGFP 蛋白表达的荧光显微镜检测 | 第44-46页 |
| ·瞬时表达中eGFP 蛋白表达水平的Western Blot 分析 | 第46-47页 |
| ·稳定表达中启动子组织表达模式的检测 | 第47-55页 |
| ·转基因烟草植株的获得和分子鉴定 | 第47-50页 |
| ·转基因烟草植株的eGFP 活性分析 | 第50-55页 |
| 四 问题与讨论 | 第55-61页 |
| 全文小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 附录A | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
