致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1. 文献综述 | 第10-25页 |
·猪繁殖与呼吸综合征病毒的特性 | 第10-14页 |
·病毒的分类及理化性质 | 第10-11页 |
·抗原性 | 第11-12页 |
·PRRSV 的体外生长特性 | 第12页 |
·致病机制 | 第12-13页 |
·流行病学 | 第13-14页 |
·PRRSV 分子生物学研究进展 | 第14-21页 |
·基因组结构与功能 | 第14-15页 |
·蛋白质 | 第15-20页 |
·聚合酶 | 第16页 |
·主要结构蛋白 | 第16-19页 |
·次要结构蛋白 | 第19-20页 |
·PRRSV 基因组的变异 | 第20页 |
·生物学和抗原性变异 | 第20-21页 |
·PRRS 诊断方法研究进展 | 第21-25页 |
·病原学诊断 | 第22-24页 |
·PRRSV 的分离 | 第22-23页 |
·抗原检测 | 第23页 |
·病毒核酸的检测 | 第23-24页 |
·血清学诊断 | 第24-25页 |
·免疫过氧化物酶单层试验(IPMA) | 第24页 |
·间接免疫荧光试验(IFA) | 第24-25页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第25页 |
·血清中和试验(SNT) | 第25页 |
2. 引言 | 第25-26页 |
3 实验材料与方法 | 第26-31页 |
·实验材料 | 第26-27页 |
·细胞 | 第26页 |
·血清 | 第26页 |
·菌种与质粒 | 第26页 |
·主要药品与试剂 | 第26页 |
·主要培养基 | 第26-27页 |
·细胞消化液 | 第27页 |
·实验中所使的引物 | 第27页 |
·实验所用缓冲液 | 第27页 |
·质粒提取用缓冲液 | 第27页 |
·其他缓冲液 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-31页 |
·病料采集与处理 | 第27页 |
·细胞的培养 | 第27-28页 |
·病毒的分离 | 第28页 |
·TCID50 的测定 | 第28页 |
·中和试验 | 第28页 |
·PRRSV 基因组 RNA 的提取 | 第28-29页 |
·RT-PCR 扩增与检测 | 第29页 |
·RT-PCR 产物的回收与纯化 | 第29页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
·回收产物的连接 | 第30页 |
·连接产物的转化 | 第30页 |
·质粒的制备 | 第30-31页 |
·质粒的小量制备 | 第30页 |
·质粒的大量制备 | 第30-31页 |
·阳性克隆质粒的鉴定及其序列的测定与分析 | 第31页 |
4. 结果与分析 | 第31-36页 |
·病料接种细胞后的细胞病变 | 第31-32页 |
·所分离病毒的 TCID50测定结果 | 第32页 |
·中和试验结果 | 第32页 |
·PCR 鉴定结果 | 第32页 |
·PRRSV HN-Y 株 ORF5 基因的扩增与克隆 | 第32-33页 |
·ORF5 基因核苷酸序列测定 | 第33-34页 |
·序列比较 | 第34-35页 |
·系统发育树分析 | 第35页 |
·疏水性、糖基化位点和抗原性分析 | 第35-36页 |
5. 结论与讨论 | 第36-39页 |
·PRRSV ORF5 基因的遗传变异 | 第36-37页 |
·GP5 信号肽的预测 | 第37-38页 |
·GP5 的抗原漂移 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-48页 |