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CarMV和IFV衣壳结构、SrMV柱状内含体的电子显微镜三维重构研究

致谢第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-14页
第一章 文献综述第14-42页
 第一节 蛋白质的结构生物学第14-16页
     ·晶体学方法(X射线晶体衍射和电子晶体学)第15页
     ·多维核磁共振方法第15页
     ·电子显微学三维重构方法第15-16页
 第二节 生物大分子结构的电子显微学第16-25页
     ·冷冻电子显微术第18-19页
     ·单颗粒技术第19-22页
     ·冷冻断层成像技术第22-25页
 第三节 病毒的结构第25-34页
     ·二十面体病毒衣壳蛋白的结构第26页
     ·麝香石竹斑驳病毒第26-30页
     ·家蚕传染性软化病病毒第30-31页
     ·高粱花叶病毒第31-34页
 第四节 选题的意义、研究内容和目标第34-36页
     ·选题的意义第34-35页
     ·研究的内容和目标第35-36页
       ·麝香石竹斑驳病毒的衣壳结构第35页
       ·家蚕传染性软化病病毒的衣壳结构第35-36页
       ·马铃薯Y病毒科柱状内含体的结构第36页
 参考文献第36-42页
第二章 麝香石竹斑驳病毒的分离提纯及细胞病理学研究第42-61页
   ·材料与方法第42-47页
     ·毒源与寄主第42-43页
     ·试剂第43页
     ·仪器设备第43页
     ·病毒接种第43页
     ·病毒初步提纯第43-44页
     ·初提纯病毒电镜负染色检查第44页
     ·血清学鉴定(I-ELISA)第44页
       ·免疫电镜观察第44页
     ·病毒蛋白SDS-PAGE电泳第44页
     ·部分基因序列的测定第44-45页
     ·病毒的精细提纯第45-46页
     ·精提纯病毒电镜负染色观察第46页
     ·提纯病毒的浓度测定第46页
     ·超薄切片制备和电镜观察第46-47页
     ·超薄切片免疫胶体金标记第47页
   ·结果第47-56页
     ·病毒症状第47-48页
     ·病毒初步提纯的电镜观察结果第48页
     ·I-ELISA检测结果第48-49页
     ·蛋白电泳检测结果第49页
     ·部分基因序列测定结果第49-50页
     ·免疫电镜观察结果第50页
     ·病毒精提纯结果第50-52页
     ·细胞病理学及免疫定位的电镜观察结果第52-56页
   ·讨论第56-59页
     ·CarMV的检测鉴定第56页
     ·CarMV引起的细胞病理变化第56-57页
     ·适合冷冻电镜的CarMV提纯方法第57-58页
     ·pH值对CarMV颗粒的影响第58-59页
 参考文献第59-61页
第三章 麝香石竹斑驳病毒冷冻电镜三维结构研究第61-85页
   ·材料与方法第62-69页
     ·病毒材料第62页
     ·试剂与仪器第62页
     ·计算机及分析软件第62页
     ·病毒粒子电镜观察第62页
     ·病毒样品浓度调整第62-63页
     ·样品的快速冷冻第63页
     ·样品冷冻转移第63页
     ·冷冻电镜的图象采集第63-64页
     ·图象的数据处理和三维重构第64-68页
     ·重构结果的三维显示及分析第68-69页
     ·晶体学数据的获得与比较第69页
     ·PROSITE软件结构域的预测第69页
   ·结果第69-77页
     ·病毒悬液浓度调整第69页
     ·冷冻电镜三维重构的结果第69-72页
     ·晶体学结构比较结果第72-76页
     ·结构域预测的结果第76-77页
   ·讨论第77-82页
     ·冷冻电镜三维重构第77-78页
     ·CarMV粒子的确认第78页
     ·晶体学结构比较的分析第78-80页
     ·冷冻电镜结构与晶体学结构的差异第80-82页
 参考文献第82-85页
第四章 家蚕传染性软化病病毒冷冻电镜三维结构研究第85-99页
   ·材料与方法第86-90页
     ·病毒材料第86页
     ·试剂与仪器第86页
     ·计算机及分析软件第86页
     ·病毒提纯第86-87页
     ·提纯病毒的浓度测定第87页
     ·病毒样品浓度调整第87页
     ·病毒电镜观察第87页
     ·冷冻样品的制备第87页
     ·样品样品转移第87页
     ·冷冻电镜的图象采集第87-88页
     ·图象的数据处第88-90页
     ·重构结果的三维显示及分析第90页
     ·肽链折叠的预测第90页
   ·结果第90-94页
     ·病毒悬液浓度调整第90页
     ·冷冻电镜三维重构的结果第90-93页
     ·肽链折叠的预测结果第93-94页
   ·讨论第94-97页
 参考文献第97-99页
第五章 Potyvirus柱状内含体的超微结构研究第99-118页
   ·材料与方法第101-104页
     ·毒源与寄主第101页
     ·试剂第101页
     ·仪器设备及软件第101页
     ·病毒接种第101页
     ·超薄切片样品制备和电镜观察第101-102页
     ·病叶组织汁液负染色电镜观察第102页
     ·胞间连丝直径的测量第102页
     ·电镜ET三维重构第102-104页
   ·结果第104-111页
     ·受SrMV侵染的细胞病变特征和柱状内含体结构第104-105页
     ·柱状内含体与细胞壁、胞间连丝的连接第105页
     ·维管束组织中病毒粒子及柱状内含体的分布第105-110页
     ·健康玉米叶细胞超微结构第110页
     ·电镜ET三维重构结果第110-111页
   ·结论与讨论第111-115页
 参考文献第115-118页
附录A 本论文中所用术语缩写与中英文对照第118-119页
附件B 常用缓冲液及培养基配方第119-122页
在读博士期间的论文第122页

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