目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
1 引言 | 第11-17页 |
·植物脂肪酸代谢的研究概况 | 第11-12页 |
·抑制性消减杂交技术产生的背景 | 第12-13页 |
·抑制性消减杂交技术的主要原理 | 第13页 |
·抑制性消减杂交技术的基本过程 | 第13-15页 |
·抑制性消减杂交技术的主要优缺点 | 第15-16页 |
·抑制性消减杂交技术的主要优点 | 第15页 |
·抑制性消减杂交技术的主要缺点 | 第15-16页 |
·抑制性消减杂交技术的应用 | 第16页 |
·研究的目的与意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-34页 |
·材料 | 第17页 |
·植物材料 | 第17页 |
·菌株 | 第17页 |
·主要化学试剂 | 第17页 |
·主要仪器设备 | 第17页 |
·方法 | 第17-34页 |
·材料的培养 | 第17-18页 |
·材料的标记 | 第18-19页 |
·取材 | 第19页 |
·胚的取材 | 第19页 |
·组织的取材 | 第19页 |
·总RNA的提取 | 第19-20页 |
·mRNA的纯化 | 第20页 |
·RNA的反转录 | 第20-23页 |
·第一链cDNA合成 | 第21-22页 |
·第二链cDNA合成 | 第22-23页 |
·抑制性消减杂交 | 第23-29页 |
·Driver cDNA和Tester cDNA的制备 | 第23-24页 |
·接头连接 | 第24-25页 |
·连接分析 | 第25-26页 |
·第一次杂交 | 第26-27页 |
·第二次杂交 | 第27页 |
·第一轮PCR | 第27-28页 |
·第二轮PCR | 第28页 |
·消减杂交效率检测 | 第28-29页 |
·连接转化 | 第29-30页 |
·克隆涂板 | 第30页 |
·菌液PCR筛选 | 第30-31页 |
·点杂交 | 第31-32页 |
·探针制备 | 第31-32页 |
·点膜、烤膜及显色 | 第32页 |
·克隆测序及分析 | 第32-33页 |
·RT-PCR检测差异表达基因在不同组织中的表达情况 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-46页 |
·材料的培养 | 第34-35页 |
·总RNA的提取 | 第35-37页 |
·构建抑制性消减杂交cDNA文库的总RNA提取 | 第35页 |
·检测蓖麻不同组织的总RNA提取 | 第35-36页 |
·检测蓖麻胚不同发育时期的总RNA提取 | 第36-37页 |
·用于特异性检测的样品的反转录 | 第37-38页 |
·蓖麻不同组织RNA模板反转录检测 | 第37页 |
·蓖麻胚不同发育时期RNA模板反转录检测 | 第37-38页 |
·消减杂交文库构建 | 第38-40页 |
·接头连接效率分析 | 第38-39页 |
·消减杂交效率的PCR检测 | 第39-40页 |
·PCR检测克隆片段插入状况 | 第40-41页 |
·阳性克隆的点杂交筛选 | 第41页 |
·测序结果统计 | 第41-42页 |
·差异表达基因信息 | 第42-44页 |
·差异基因的RT-PCR检测 | 第44-46页 |
·差异基因的组织特异性检测 | 第44-45页 |
·差异基因的时序特异性检测 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-51页 |
·培养材料和取材上的分析 | 第46-47页 |
·培养方法的改进 | 第46-47页 |
·取材的改进 | 第47页 |
·差异表达基因功能分析 | 第47-51页 |
·脂肪酸代谢调控基因 | 第48页 |
·蛋白质合成调控基因 | 第48-49页 |
·糖类的合成降解调控基因 | 第49-50页 |
·其他差异表达基因 | 第50-51页 |
·展望和意义 | 第51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
附录一 常用溶液配方 | 第61-63页 |
附录二 接头与引物 | 第63-64页 |
附录三 研究生在读期间发表的文章 | 第64页 |