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油菜菌核病抗性相关基因EIN3及3A06和6C02的功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第1章 绪论第11-23页
   ·植物抗病机理第11-14页
     ·过敏反应(HR)和系统获得性抗性(SAR)第11-12页
     ·诱导系统抗性(ISR)及茉莉酸/乙烯信号转导第12-14页
   ·菌核病研究进展第14-19页
     ·核盘菌的生物学特性第14-15页
     ·核盘菌的侵染和致病机理第15-16页
     ·油菜抗菌核病研究第16-19页
   ·植物功能基因组学研究第19-22页
     ·基因芯片第19-20页
     ·RNA 干扰及人工microRNA 干扰第20-22页
     ·油菜与拟南芥重要功能基因的比较基因组学研究第22页
   ·本研究的目的和意义第22-23页
第2章 油菜BnEIN3 的克隆及受菌核病的诱导表达研究第23-32页
   ·材料第23页
   ·方法第23-29页
     ·基因组DNA 提取(SDS 法)第23-24页
     ·cDNA 制备第24-25页
     ·PCR 及RT-PCR第25-26页
     ·PCR 扩增产物的回收纯化第26页
     ·PCR 扩增产物的T-A 克隆第26-27页
     ·大肠杆菌的转化第27页
     ·阳性克隆的鉴定第27-28页
     ·重组质粒的提取第28页
     ·序列测定与分析第28页
     ·荧光定量PCR第28-29页
   ·结果与分析第29-31页
     ·BnEIN3 的克隆及序列分析第29-30页
     ·BnEIN3 诱导表达第30-31页
   ·讨论第31-32页
第3章 amiRNA 干扰鉴定油菜同源基因AtEIN3 及At3A06 和At6C02 的功能第32-38页
   ·材料第32-33页
   ·方法第33-35页
     ·重组质粒DNA 转化农杆菌第33-34页
     ·拟南芥的遗传转化(花序浸染法)第34页
     ·转基因植株除草剂筛选第34页
     ·转基因植株PCR 鉴定第34页
     ·荧光定量PCR第34页
     ·菌核病抗性鉴定第34-35页
   ·结果与分析第35-36页
     ·转基因植株筛选鉴定第35页
     ·目的基因的表达第35-36页
     ·转基因植株的抗病性鉴定第36页
   ·讨论第36-38页
第4章 甘蓝型油菜Bn6C02 和Bn3E09 的克隆及在拟南芥中的过表达研第38-46页
   ·材料第38页
   ·方法第38-42页
     ·全长cDNA 序列的分析第38-39页
     ·目的基因的PCR 扩增第39页
     ·凝胶回收目的DNA第39-40页
     ·DNA 的限制性酶切第40页
     ·酶切载体与目的DNA 的连接第40页
     ·重组质粒转化大肠杆菌第40页
     ·重组质粒DNA 的PCR 及酶切检测第40-41页
     ·重组质粒DNA 转化农杆菌第41页
     ·拟南芥的遗传转化(花序浸染法)第41页
     ·转基因植株除草剂筛选第41页
     ·转基因植株PCR 鉴定第41-42页
   ·结果与分析第42-45页
     ·Bn6C02 和Bn3E09 全长cDNA 的序列分第42-43页
     ·过表达载体的构建第43-44页
     ·转基因植株的获得第44-45页
   ·讨论第45-46页
结论第46-48页
参考文献第48-52页
致谢第52-53页
附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录第53-54页
附录B 缩略语表第54页

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