中文摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-20页 |
符号说明 | 第20-22页 |
第一章 文献综述 | 第22-56页 |
1 植物次生代谢研究进展 | 第22-38页 |
·次生代谢产物种类及代谢途径基因调控 | 第22-26页 |
·植物次生代谢工程 | 第26-27页 |
·萜类研究进展 | 第27-38页 |
2 诱导子在植物次生代谢产物调控及生物合成中的研究进展 | 第38-44页 |
·诱导子的分类 | 第38-39页 |
·诱导子的作用方式 | 第39-44页 |
3 植物体细胞杂交研究进展 | 第44-49页 |
·植物体细胞杂交研究概况 | 第45-46页 |
·体细胞杂种重要性状的转移 | 第46-48页 |
·体细胞杂交技术在药用植物中的研究进展 | 第48-49页 |
4 麻花艽研究进展 | 第49-54页 |
·麻花艽(Gstraminea Maxim)的植物学及草本研究 | 第50-51页 |
·齐墩果酸的药理作用 | 第51-53页 |
·药效化学成分测定和含量分析的方法 | 第53-54页 |
5 研究背景及立题意义 | 第54-56页 |
第二章 麻花艽及其体细胞杂种齐墩果酸合成关键酶β-amyrin合成酶基因的克隆及序列分析 | 第56-107页 |
1 材料与方法 | 第56-67页 |
·材料、试剂及培养基 | 第56-58页 |
·总RNA的提取及纯化检测 | 第58-59页 |
·β-amyrin合成酶基因GsAS1和GsAS2的扩增 | 第59-63页 |
·目的片段切胶回收 | 第63-64页 |
·回收片段的连接 | 第64页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及其转化 | 第64-65页 |
·阳性质粒筛选 | 第65-66页 |
·测序 | 第66页 |
·核苷酸及蛋白质序列比对分析 | 第66-67页 |
2 结果与分析 | 第67-104页 |
·麻花艽β-amyrin合成酶基因GsAS1和GsAS2的克隆及序列分析 | 第67-77页 |
·狭叶柴胡中β-amyrin合成酶基因BsAS的克隆及序列分析 | 第77-80页 |
·狭叶柴胡与麻花艽体细胞杂种中β-amyrin合成酶基因全长cDNA克隆及序列分析 | 第80-93页 |
·狭叶柴胡、麻花艽及其杂种中β-amyrin合成酶基因的序列同源性比较 | 第93-101页 |
·狭叶柴胡、麻花艽和杂种中β-amyrin合成酶基因的进化树分析 | 第101-103页 |
·狭叶柴胡和麻花艽中β-amyrin合成酶基因的相互关系 | 第103页 |
·体细胞杂种中GsAS1和GsAS2的核苷酸序列变化研究 | 第103-104页 |
3 讨论 | 第104-107页 |
·麻花艽及其体细胞杂种中齐墩果酸合成关键酶基因的克隆及序列分析 | 第104-105页 |
·β-amyrin合成酶基因在麻花艽体细胞杂种中的存在方式及其等位变异 | 第105-107页 |
第三章 麻花艽及其体细胞杂种中齐墩果酸合成相关基因的表达分析 | 第107-128页 |
1 材料和方法 | 第107-112页 |
·实验材料 | 第107页 |
·试剂 | 第107页 |
·RNA提取和纯化 | 第107页 |
·HPLC样品制备 | 第107-108页 |
·半定量RT-PCR | 第108-110页 |
·Real-time PCR | 第110-112页 |
2 结果与分析 | 第112-125页 |
·麻花艽三萜代谢途径中相关基因片段的克隆 | 第112-118页 |
·齐墩果酸代谢途径中相关基因的表达分析 | 第118-124页 |
·水杨酸诱导下齐墩果酸代谢途径中相关基因表达分析 | 第124-125页 |
3 讨论 | 第125-128页 |
·齐墩果酸代谢途径中各关键酶基因组织特异性表达研究 | 第126页 |
·杂种齐墩果酸合成相关基因的表达模式及与齐墩果酸含量的关系 | 第126-127页 |
·MeJA对齐墩果酸合成相关基因表达及其齐墩果酸含量的影响 | 第127-128页 |
第四章 麻花艽中β-amyrin合成酶基因的功能分析 | 第128-169页 |
1 材料和方法 | 第128-147页 |
·GsAS1和GsAS2基因的原核表达 | 第128-131页 |
·GsAS1和GsAS2基因的真核表达 | 第131-138页 |
·使用Gateway技术构建GsAS1和GsAS2植物的过表达载体 | 第138-142页 |
·使用Gateway技术构建GsAS1和GsAS2的RNAi表达载体 | 第142-144页 |
·基因枪法转化麻花艽愈伤组织 | 第144-147页 |
2 结果与分析 | 第147-167页 |
·GsAS1和GsAS2的原核表达分析 | 第147-151页 |
·GsAS1和GsAS2的真核表达分析 | 第151-157页 |
·利用Gateway方法进行GsAS1和GsAS2的过表达载体构建 | 第157-158页 |
·利用Gateway方法进行GsAS1和GsAS2的RNAi载体构建 | 第158-160页 |
·GsAS1过表达载体和RNAi载体转化麻花艽愈伤组织 | 第160-163页 |
·GsAS2过表达载体和RNAi载体转化麻花艽愈伤组织 | 第163-167页 |
3 讨论 | 第167-169页 |
·麻花艽齐墩果酸合成关键酶——β-amyrin合成酶基因的性质 | 第167页 |
·麻花艽齐墩果酸合成关键酶——β-amyrin合成酶基因对麻花艽胚性愈伤组织的转化 | 第167-169页 |
第五章 中药材干植株材料化学成分研究 | 第169-174页 |
1 材料与方法 | 第169-170页 |
·材料 | 第169页 |
·仪器 | 第169页 |
·分析条件 | 第169-170页 |
·实验方法 | 第170页 |
2 结果与分析 | 第170-172页 |
·水母雪兔子和盐地风毛菊的GC-MS分析 | 第170页 |
·水母雪兔子和盐地风毛菊挥发性化学成份分析 | 第170-172页 |
3 讨论 | 第172-174页 |
论文创新点 | 第174-175页 |
参考文献 | 第175-193页 |
研究生期间发表论文情况 | 第193-194页 |
致谢 | 第194页 |