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非小细胞肺癌中miRNAs调控TGF-β/SMAD信号通路诱导上皮—间充质转化(EMT)的机制研究

中文摘要第4-7页
abstract第7-8页
引言第12-17页
    参考文献第13-17页
材料和方法第17-35页
    (一)材料第17-22页
        一、细胞株及临床样本第17页
        二、实验试剂及仪器第17-22页
    (二)方法和步骤第22-26页
        一、细胞培养第22-24页
        二、Western Blot第24-26页
    (三)细胞总RNA提取、逆转录cDNA合成及Real Time PCR第26-29页
    (四)Transwell细胞侵袭实验第29页
    (五)细胞划痕实验第29-30页
    (六)双荧光素酶报告载体的构建及活性检测第30-32页
    (七)肺癌组织样本中SMADs的表达分析第32-34页
    (八)统计分析第34页
    参考文献第34-35页
实验结果第35-52页
    第一部分 miR-145 和miR-203 下调SMAD3进而抑制NSCLC细胞中TGF-β 介导的EMT进程第35-46页
        1. SMAD3在NSCLC细胞与组织中的表达上调第35-36页
        2. 在NSCLC细胞和组织中miR-145 和miR-203 表达下调第36-37页
        3. miR-145 和miR-203 通过靶向作用SMAD33’-UTR特定位点来抑制SMAD3的表达第37-40页
        4. miRNA-145 和miR-203 抑制了NSCLC细胞株中TGF-β1 介导的EMT第40-43页
        5. siRNA沉默SMAD3表达抑制了TGF-β 诱导的NSCLC细胞株的EMT和迁移和侵袭能力第43-46页
    第二部分 miR-205 靶向抑制SMAD4从而抑制TGF-β 诱导的NSCLC细胞的EMT进程第46-52页
        1. 瞬时沉默SMAD4的表达能够抑制TGF-β 诱导的EMT和NSCLC细胞的迁移和侵袭能力第46-48页
        2. 在NSCLC细胞中miR-205 直接靶向抑制SMAD4的表达第48-51页
        3. miR-205 抑制了TGF-β/SMAD4信号所诱导的NSCLC细胞的EMT进程、迁移和侵袭能力第51-52页
讨论第52-55页
总结第55-56页
参考文献第56-58页
综述 miRNAs通过TGF-β信号通路诱导细胞上皮-间充质转化(EMT)在非小细胞肺癌发生发展中的研究进展第58-84页
    参考文献第72-84页
附录:缩略词表及注释第84-85页
本论文中课题受以下基金资助第85-86页
致谢第86-87页

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