中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-8页 |
引言 | 第12-17页 |
参考文献 | 第13-17页 |
材料和方法 | 第17-35页 |
(一)材料 | 第17-22页 |
一、细胞株及临床样本 | 第17页 |
二、实验试剂及仪器 | 第17-22页 |
(二)方法和步骤 | 第22-26页 |
一、细胞培养 | 第22-24页 |
二、Western Blot | 第24-26页 |
(三)细胞总RNA提取、逆转录cDNA合成及Real Time PCR | 第26-29页 |
(四)Transwell细胞侵袭实验 | 第29页 |
(五)细胞划痕实验 | 第29-30页 |
(六)双荧光素酶报告载体的构建及活性检测 | 第30-32页 |
(七)肺癌组织样本中SMADs的表达分析 | 第32-34页 |
(八)统计分析 | 第34页 |
参考文献 | 第34-35页 |
实验结果 | 第35-52页 |
第一部分 miR-145 和miR-203 下调SMAD3进而抑制NSCLC细胞中TGF-β 介导的EMT进程 | 第35-46页 |
1. SMAD3在NSCLC细胞与组织中的表达上调 | 第35-36页 |
2. 在NSCLC细胞和组织中miR-145 和miR-203 表达下调 | 第36-37页 |
3. miR-145 和miR-203 通过靶向作用SMAD33’-UTR特定位点来抑制SMAD3的表达 | 第37-40页 |
4. miRNA-145 和miR-203 抑制了NSCLC细胞株中TGF-β1 介导的EMT | 第40-43页 |
5. siRNA沉默SMAD3表达抑制了TGF-β 诱导的NSCLC细胞株的EMT和迁移和侵袭能力 | 第43-46页 |
第二部分 miR-205 靶向抑制SMAD4从而抑制TGF-β 诱导的NSCLC细胞的EMT进程 | 第46-52页 |
1. 瞬时沉默SMAD4的表达能够抑制TGF-β 诱导的EMT和NSCLC细胞的迁移和侵袭能力 | 第46-48页 |
2. 在NSCLC细胞中miR-205 直接靶向抑制SMAD4的表达 | 第48-51页 |
3. miR-205 抑制了TGF-β/SMAD4信号所诱导的NSCLC细胞的EMT进程、迁移和侵袭能力 | 第51-52页 |
讨论 | 第52-55页 |
总结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-58页 |
综述 miRNAs通过TGF-β信号通路诱导细胞上皮-间充质转化(EMT)在非小细胞肺癌发生发展中的研究进展 | 第58-84页 |
参考文献 | 第72-84页 |
附录:缩略词表及注释 | 第84-85页 |
本论文中课题受以下基金资助 | 第85-86页 |
致谢 | 第86-87页 |