摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-12页 |
第一章 绪论 | 第12-24页 |
·HCV 研究状况 | 第12-18页 |
·HCV 流行与传播 | 第12-13页 |
·HCV 基因组结构及特点 | 第13-15页 |
·HCV 的预防与治疗 | 第15页 |
·机体对 HCV 的免疫应答 | 第15-17页 |
·HCV 疫苗研究 | 第17-18页 |
·腺病毒载体研究状况 | 第18-23页 |
·腺病毒简介 | 第18-19页 |
·腺病毒载体的优点 | 第19-20页 |
·腺病毒载体的构建策略 | 第20-22页 |
·腺病毒载体的应用 | 第22-23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
第二章 HCV 重组腺病毒的构建、鉴定 | 第24-52页 |
·仪器与材料 | 第24-28页 |
·质粒、菌株及细胞株 | 第24-25页 |
·主要生化试剂、工具酶及试剂盒 | 第25-26页 |
·仪器设备 | 第26页 |
·主要溶剂配制 | 第26-28页 |
·实验方法 | 第28-45页 |
·目的基因制备 | 第29-38页 |
·重组腺病毒穿梭质粒的构建 | 第38-42页 |
·重组腺病毒的包装 | 第42-43页 |
·重组腺病毒的鉴定 | 第43-45页 |
·实验结果 | 第45-51页 |
·RT-PCR获取HCV Core基因片段 | 第45-46页 |
·重组T载体pMD19-C的PCR鉴定 | 第46-47页 |
·重组T 载体pMD19-Core 序列测定 | 第47页 |
·重组穿梭质粒pDC315-Core的鉴定 | 第47-48页 |
·重组腺病毒的包装 | 第48-49页 |
·重组腺病毒感染性鉴定 | 第49页 |
·重组腺病毒质粒DNA的PCR鉴定 | 第49-50页 |
·重组腺病毒质粒DNA序列测定 | 第50-51页 |
·本章小结 | 第51-52页 |
第三章 HCV 重组腺病毒初步免疫学效果观察 | 第52-75页 |
·仪器与材料 | 第52-55页 |
·实验动物 | 第52页 |
·细胞株及病毒 | 第52页 |
·生化及化学试剂 | 第52-53页 |
·主要仪器 | 第53页 |
·主要溶剂配制 | 第53-55页 |
·方法 | 第55-64页 |
·重组腺病毒的扩增、纯化 及病毒颗粒数、滴度测定 | 第55-58页 |
·重组腺病毒体外转染 HepG2 细胞目的蛋白表达测定 | 第58-60页 |
·重组腺病毒初步免疫效果观察 | 第60-64页 |
·结果 | 第64-68页 |
·重组腺病毒病毒颗粒数、滴度测定及比活性、单细胞产量计算 | 第64-66页 |
·Western Blot 检测目的蛋白表达 | 第66-67页 |
·HCV 重组腺病毒免疫小鼠血清抗-HCV-Core 滴度检测结果 | 第67页 |
·HCV 重组腺病毒免疫小鼠特异性细胞免疫反应检测 | 第67-68页 |
·本章小结 | 第68页 |
·综合讨论 | 第68-75页 |
·目的基因的选择 | 第68-69页 |
·载体的选择 | 第69-70页 |
·腺病毒载体的构建及表达 | 第70-72页 |
·腺病毒滴度测定 | 第72-73页 |
·HCV 重组腺病毒初步免疫学效果观察 | 第73-75页 |
全文总结 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-86页 |
附录 | 第86-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
攻读硕士期间发表的相关学术论文 | 第89-91页 |