| 缩略词表 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-19页 |
| 第一章 cAMP对TNF-α诱导L929 细胞死亡的影响 | 第19-28页 |
| 1 材料与方法 | 第19-21页 |
| ·细胞株 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要实验仪器 | 第19-20页 |
| ·细胞的培养与冻存 | 第20页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡及死亡 | 第20页 |
| ·胞内cAMP浓度的检测 | 第20-21页 |
| ·数据统计学分析 | 第21页 |
| 2 结果 | 第21-26页 |
| ·TNF-α诱导L929 细胞死亡模型的建立 | 第21-22页 |
| ·cAMP“激动剂”FSK对TNF-α诱导L929 细胞死亡的影响 | 第22-23页 |
| ·其它cAMP“激动剂”对TNF-α诱导L929 细胞死亡的影响 | 第23-24页 |
| ·不同cAMP“激动剂”对L929 细胞胞内cAMP浓度的影响 | 第24-25页 |
| ·TNF-α对L929 细胞胞内cAMP浓度的影响 | 第25-26页 |
| 3 讨论 | 第26-27页 |
| 4 小结 | 第27-28页 |
| 第二章 cAMP抑制TNF-α诱导的L929 细胞死亡机制探讨 | 第28-51页 |
| 1 材料与方法 | 第28-33页 |
| ·菌株、细胞株及质粒 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·主要实验仪器 | 第29页 |
| ·常用试剂的配制 | 第29-30页 |
| ·流式细胞术检测细胞死亡 | 第30页 |
| ·免疫印迹实验 | 第30页 |
| ·细胞转染 | 第30-31页 |
| ·引物合成、载体构建及测序 | 第31-32页 |
| ·转染用质粒的制备 | 第32页 |
| ·荧光素酶活性分析 | 第32-33页 |
| ·数据统计学分析 | 第33页 |
| 2 结果 | 第33-48页 |
| ·cAMP在转录水平对TNF-α诱导的L929 细胞的作用 | 第33-39页 |
| ·成纤维瘤细胞中cAMP对MAPK信号通路的影响 | 第39-42页 |
| ·JNK与p38 通路参与调控肿瘤细胞存活 | 第42-44页 |
| ·多功能调节蛋白DLC在cAMP促L929 细胞存活中的作用 | 第44-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 4 小结 | 第50-51页 |
| 第三章 JNK通路中新负调控因子的寻找 | 第51-72页 |
| 1 材料与方法 | 第52-60页 |
| ·菌株、细胞株及质粒 | 第52页 |
| ·主要试剂 | 第52页 |
| ·主要实验仪器 | 第52页 |
| ·酵母双杂交相关试剂的配制 | 第52-54页 |
| ·酵母菌的保存与复苏 | 第54页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第54页 |
| ·酵母细胞的转化 | 第54-55页 |
| ·提取酵母质粒 | 第55页 |
| ·构建pGBKT7-MKK7 诱饵载体 | 第55页 |
| ·利用酵母双杂交筛选MKK7 相互作用蛋白 | 第55-58页 |
| ·阳性克隆真核表达载体的构建 | 第58-59页 |
| ·免疫共沉淀验证阳性克隆与MKK7 蛋白的相互作用 | 第59-60页 |
| ·免疫印迹实验与荧光素酶活性分析 | 第60页 |
| 2 实验结果 | 第60-68页 |
| ·酵母双杂交筛选MKK7 相互作用蛋白 | 第60-65页 |
| ·MKK7 相互作用蛋白初步生物学功能检测 | 第65-68页 |
| 3 讨论 | 第68-71页 |
| 4 小结 | 第71-72页 |
| 全文总结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 附录一 文献综述 | 第80-87页 |
| 个人简历 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
